Bacteriophage compositions and uses thereof

ABSTRACT

The present invention includes compositions and methods for increasing antibiotic sensitivity and/or decreasing virulence in bacteria.

CROSS-REFERENCE TO RELATED APPLICATION

The present application is entitled to priority under 35 U.S.C. § 119(e)to U.S. Provisional Patent Application No. 62/844,515 filed May 7, 2019and U.S. Provisional Patent Application No. 63/017,369, filed Apr. 29,2020, each of which are hereby incorporated by reference in theirentireties herein.

STATEMENT REGARDING FEDERALLY SPONSORED RESEARCH OR DEVELOPMENT

This invention was made with government support under AI144345 awardedby National Institutes of Health and under 0939454 awarded by theNational Science Foundation. The government has certain rights in theinvention.

BACKGROUND OF THE INVENTION

Widespread and inappropriate uses of chemical antibiotics have selectedfor multi-drug resistant (MDR) bacterial pathogens, presenting morefrequently in human infections and contributing significantly tomorbidity. Some bacteria even show evolved resistance to ‘drugs of lastresort’, resulting in emergent strains that are pan-drug-resistant(PDR). One example is the Gram-negative bacterium, Pseudomonasaeruginosa, a prevalent opportunistic MDR pathogen that is poised tobecome a common PDR disease problem. Humans readily encounter P.aeruginosa, which thrives in both natural and artificial environments,varying from lakes and estuaries to hospitals and household sink drains.P. aeruginosa causes biofilm-mediated infections, including catheterassociated urinary tract infections, ventilator associated pneumonia,and infections related to mechanical heart valves, stents, grafts andsutures (Cole, S. J., et al., Infection and Immunity 82, 2048-2058(2014)). Individuals with cystic fibrosis, severe burns, surgical woundsand/or compromised immunity are particularly at risk for P. aeruginosainfections, especially acquired in hospitals.

P. aeruginosa is a ubiquitous Gram-negative, rod-shaped bacteriumprevalent in natural and artificial environments (Remold, S. K., et al.Microb Ecol. 62(3), 505-17 (2011)). Adaptation to different habitats hasallowed P. aeruginosa to persist in many human-associated environments,most notably in hospitals, where it is increasingly associated withnosocomial infections (Emori, T. G., et al., Clin Microbiol Rev. 6(4),428-42 (1993)). These infections are difficult to manage, in part due tointrinsic antibiotic resistance resulting from decreased membranepermeability, active antibiotic efflux, and other chromosomally encodedenzymes. Further complicating the problem of P. aeruginosa infectionsare their ability to form biofilms, herein referred to as “P. aeruginosabiofilms” or “Pseudomonas aeruginosa biofilms”. Biofilm-mediatedinfections are notoriously difficult to manage, having seemingly muchhigher resistance to chemical antimicrobials (Stewart, P. S., et al.,Lancet 358(9276), 135-08 (2001)) and often form following sub-lethalconcentrations of antibiotics (Hoffman, L. R., et al., Nature 436(7054),1171-5 (2005)). This elevated resistance may be due to exopolymericsubstances in the biofilm matrix that slow diffusion of antibiotics andreduce effective concentrations. Furthermore, slow-growing cells presentin the biofilm (e.g., persister cells) may have sufficiently reducedmetabolisms to withstand bacteriostatic antibiotics that targetmetabolically active bacteria (Lewis, K. Biochemistry (Mosc). 70(2),267-74 (2005)). As a result, biofilms may also act as a reservoir forthe dissemination of infections throughout the body which could greatlyprolong infection duration and severity. Prosthetic vascular graftinfections are of significant concern due to the elevated mortality andmorbidity rates. A common culprit, P. aeruginosa, presents a seriouschallenge due to its intrinsic antibiotic resistance and ability to formbiofilms on prosthetic material.

Prosthetic vascular graft infections are catastrophic events whichpresent serious challenges to surgeons and place heavy economic burdenson patients and the healthcare system. The reported incidence can varyfrom 0.6% to 9.5% depending on the site of the vascular graft (Kieffer,E., et al., J Vasc Surg. 33(4), 671-8 (2001); Schild, A. F., et al., JVasc Access 9(4), 231-5 (2008)). There are currently no clear algorithmsfor the management of prosthetic vascular graft infections. The basicprinciples, however, involve systemic antibiotics, debridement ofinfected tissue, partial or complete graft excision, and secondaryrevascularization (Bunt, T. J. Cardiovasc Surg. 9(3), 225-33 (2001)).However, many patients presenting with vascular graft infections havesignificant comorbidities and are often critically ill, making surgicalmanagement even more difficult and in certain cases ill-advised. Despitebest management, mortality and morbidity rates remain high withconservative estimates for both over 20% (O'Connor, et al., S. J VascSurg. 44(1), 38-45 (2006); Perera, G. B., et al., Vasc EndovascularSurg. 40(1), 1-10 (2006)). Reinfection rates are also significant afterinitial treatment, highlighting the inadequacy of current treatmentmodalities at eradicating the infecting organism. As the number ofprocedures involving vascular grafts continues to rise with an agingpopulation and increasing prevalence of atherosclerosis and diabetes,new strategies are sorely needed.

P. aeruginosa infections are notoriously difficult to manage due to lowantibiotic permeability of the outer membrane and mechanisms ofantibiotic resistance that allow cross resistance to multiple classesand types of antibiotics. Clinically significant levels of antibioticresistance are mostly caused by interplay between the efficient outermembrane (OM) permeability barrier, ubiquitous periplasmic β-lactamases,and multi-drug resistance (MDR) efflux pumps. These pumps have broadsubstrate specificity and may act synergistically with the permeabilitybarrier to result in significant intrinsic resistance to manyantimicrobials. These pumps expel the antimicrobial from the cell intothe surrounding space, and the antimicrobials then have to pass throughthe OM permeability barrier to regain entry to the cell. Thus, the MDRpumps can effect significant resistance even when their transporteractivity is quite low, as long as the OM functions as an effectivebarrier.

Synergy between efflux and the permeability barrier is necessary foreffective drug resistance. Efflux pumps are transport proteins that arefound in both Gram-positive and -negative bacteria, as well as ineukaryotic organisms. Pumps may be specific for one substrate or maytransport a range of structurally dissimilar compounds (includingantibiotics of multiple classes); such pumps can be associated withmulti-drug resistance (MDR). Efflux pumps can also impact iron uptake,bile tolerance, quorum sensing, and other host colonization factors.

In the bacteria domain, there are five major families of effluxtransporter: MF (major facilitator), MATE (multidrug and toxic efflux),RND (resistance-nodulation-division), SMR (small multidrug resistance)and ABC (ATP binding cassette). All these systems utilize the protonmotive force as an energy source, apart from the ABC family, whichutilizes ATP hydrolysis to drive the export of substrates. Transportersthat efflux multiple substrates, including antibiotics, did not arise inresponse to the stresses of the antibiotic era. All bacterial genomesstudied contain several different efflux pumps; this indicates theirancestral origins. It has been estimated that ˜5-10% of all bacterialgenes are involved in transport and a large proportion of these encodeefflux pumps.

The interaction between selection from antibiotics and phages, alongwith its role in driving bacterial evolution, remain unclear, in partbecause these interactions depend on the environment, specific phagespecies, and the bacterial hosts involved in these interactions.Potential evolutionary interactions between drug resistance and phageresistance mechanisms in bacteria have been previously identified,including both positive and negative interactions that are highlygenotype-dependent. For example, Pseudomonas aeruginosa bacteria thatevolve resistance to phage 14/1 simultaneously become more resistant toantibiotics, whereas P. aeruginosa that evolve resistance to phage tivpbecome less resistant to antibiotics.

Escherichia coli, bacteria that evolve resistance to phage TLS also loseantibiotic resistance. Such interactions demonstrate that multipleselection pressures sometimes cause bacteria to evolve mutations withtrade-up potential (the ability to increase fitness on two traitssimultaneously), whereby phages contribute to the problems of increasedantibiotic resistance and virulence; in other cases, the mutations havetrade-off potential, whereby phages reduce the problem of antibioticresistance. In both cases of trade-offs and trade-ups, the mutationselected for one function has a pleiotropic effect on another function.This type of pleiotropy, sometimes called molecular gene pleiotropyoccurs when a single gene affects multiple traits. For example, theevolution of bacterial resistance to phage can occur via mutations thatalso decrease cellular resource acquisition (a form of antagonisticpleiotropy), and mutations that improve bacterial growth on one carbonsource may improve fitness during growth on another (a form ofsynergistic pleiotropy). In these ways, pleiotropy can have significanteffects on evolution within bacterial populations, shifting phenotypesthat are not directly selected.

Pleiotropy in the evolution of phage resistance and antibioticresistance can result in either decreased (antagonistic pleiotropy) orincreased (synergistic pleiotropy) sensitivity to antibiotics.Bacteria-phage interactions can be highly dependent on cell membraneproteins and other surface structures, such as outer membrane proteinsand lipopolysaccharides, and in some cases, those structures alsocontribute to antibiotic resistance. In particular, multi-drug effluxpumps are protein complexes spanning the inner and outer membranes ofsome bacteria, such as the homologous TolC-AcrAB system in E. coli andOprM-MexAB system in P. aeruginosa. These efflux systems conferresistance to multiple antibiotics, acting as generalized transportersfor multiple antibiotic classes as well as detergents, dyes, and bileacids. The outer membrane protein (OMP) components (TolC or OprM) aremembrane-spanning beta barrels, with peptide loops that extend outsideof the cell. The extracellular loops of OMPs are frequently exploited byphages as the specific binding sites for initiating phage infection.When phages use these OMPs as receptors, bacteria face selection forreduced or modified OMPs. Phages that use OMPs involved in antibioticresistance, like the previously-characterized TolC-targeting phage TLS,might impose selection on bacterial populations to evolve phageresistance while pleiotropically losing antibiotic resistance.

A need exists in the art to develop alternative methods for themanagement of antibiotic efflux of MDR in bacteria, like P. aeruginosaand E. coli. The present invention addresses this need.

SUMMARY OF THE INVENTION

As described herein, the present invention relates to compositionscomprising bacteriophage OMKO1, LPS-5, TIVP-H6, LPS-TLTL, TIVP-27,SFA1-1, SF60B, SFNHSI, SF37B, PG-I1, and U136B, and methods of usethereof.

In one aspect, the invention provides a method of increasing antibioticsensitivity and/or decreasing virulence in a pathogenic bacteria. Themethod comprises contacting the bacteria with a lytic bacteriophageselected from the group consisting of OMKO1, LPS-5, TIVP-H6, LPS-TLTL,TIVP-27, SFA1-1, SF60B, SFNHSI, SF37B, PG-I1, and U136B.

In certain embodiments, the bacteria are contacted with bacteriophage ata multiplicity of infection of bacteriophage to bacteria in the range ofabout 0.05 to about 50.

In certain embodiments, the bacteriophage binds at least one moleculeselected from the group consisting of an O-antigen, efflux pump, Type IVpilus, LPS (core), OmpA, OmpC, TolC, and peptidoglycan in the bacteria.In certain embodiments, the bacteriophage binds TolC and LPS.

In certain embodiments, the bacteriophage binds a protein of a Mexefflux pump. In certain embodiments, the Mex efflux pump is a surfaceexposed protein. In certain embodiments, the Mex protein is selectedfrom the group consisting of OprM, MexA, MexB, MexX, and MexY.

In certain embodiments, the method further comprises contacting thepathogenic bacteria with an antibiotic.

In certain embodiments, the pathogenic bacteria is drug resistant. Incertain embodiments, the pathogenic bacteria is a multi-drug resistant(MDR) bacteria.

In certain embodiments, the bacteriophage comprises a nucleotidesequence at least 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, or 100%identical to any one of SEQ ID NOs: 1-13.

In certain embodiments, the bacteriophage is administered to a subjectin need thereof.

In another aspect, the invention provides a pharmaceutical compositioncomprising one or more lytic bacteriophages selected from the groupconsisting of OMKO1, LPS-5, TIVP-H6, LPS-TLTL, TIVP-27, SFA1-1, SF60B,SFNHSI, SF37B, PG-I1, and U136B.

In certain embodiments, the bacteriophage binds at least one moleculeselected from the group consisting of an O-antigen, Type IV pilus, LPS(core), OmpA, OmpC, TolC, and peptidoglycan on multi-drug resistant(MDR) bacteria.

In certain embodiments, the one or more bacteriophages comprise anucleotide sequence at least 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, or100% identical to any one of SEQ ID NOs: 1-13.

In certain embodiments, the pharmaceutical composition further comprisesan antibiotic.

In another aspect, the invention provides a method of treating abacterial infection in a subject in need thereof. The method comprisesadministering any of the pharmaceutical compositions disclosed herein tothe subject with the bacterial infection.

In certain embodiments, the pharmaceutical composition is administereddirectly to a site of the bacterial infection.

In certain embodiments, the method further comprises administering anantibiotic to the subject. In certain embodiments, the antibiotic isadministered before or after or co-administered with the pharmaceuticalcomposition.

In certain embodiments, the bacterial infection is drug resistant. Incertain embodiments, the bacterial infection is multi-drug resistant.

In certain embodiments, the pathogenic bacteria is associated with abiofilm. In certain embodiments, the pathogenic bacteria is in abiofilm.

In certain embodiments, the pathogenic bacteria is Pseudomonasaeruginosa, a Shigella species, Staphylococcus aureus, or Escherichiacoli.

In another aspect, the invention provides a method of disrupting apathogenic bacteria associated with a biofilm. The method comprisescontacting the bacteria with a lytic bacteriophage selected from thegroup consisting of OMKO1, LPS-5, TIVP-H6, LPS-TLTL, TIVP-27, SFA1-1,SF60B, SFNHSI, SF37B, PG-I1, and U136B.

In another aspect, the invention provides a method of preventingformation of a biofilm on a surface. The method comprises contacting thesurface with a lytic bacteriophage selected from the group consisting ofOMKO1, LPS-5, TIVP-H6, LPS-TLTL, TIVP-27, SFA1-1, SF60B, SFNHSI, SF37B,PG-I1, and U136B.

In certain embodiments, the bacteriophage binds a molecule selected fromthe group consisting of an O-antigen, efflux pump, Type IV pilus, LPS(core), OmpA, OmpC, and TolC in the bacteria and the bacteria eithergenetically resists bacteriophage infection or becomes infected andlysed by the bacteriophage, wherein the genetically resistant bacteriahave impaired efflux pumps and increased sensitivity to one or moreantibiotics.

In certain embodiments, the method further comprises contacting thebacteria or surface with the one or more antibiotics.

In another aspect, the invention provides a composition comprising anLPS-5 bacteriophage targeting Pseudomonas aeruginosa, the bacteriophagehaving a genome comprising a nucleic acid sequence comprising SEQ ID NO:1.

In another aspect, the invention provides a composition comprising anOMKO1 bacteriophage targeting Pseudomonas aeruginosa, the bacteriophagehaving a genome comprising a nucleic acid sequence comprising SEQ ID NO:2.

In another aspect, the invention provides a composition comprising aTIVP-H6 bacteriophage targeting Pseudomonas aeruginosa, thebacteriophage having a genome comprising a nucleic acid sequencecomprising SEQ ID NO: 3.

In another aspect, the invention provides a composition comprising anLPS-TLTL bacteriophage targeting Pseudomonas aeruginosa, thebacteriophage having a genome comprising a nucleic acid sequencecomprising SEQ ID NO: 4.

In another aspect, the invention provides a composition comprising anTIVP-27 bacteriophage targeting Pseudomonas aeruginosa, thebacteriophage having a genome comprising a nucleic acid sequencecomprising SEQ ID NO: 5.

In another aspect, the invention provides a composition comprising anSFA1-1 bacteriophage targeting a Shigella spp. bacteria, thebacteriophage having a genome comprising a nucleic acid sequencecomprising SEQ ID NO: 6.

In another aspect, the invention provides a composition comprising anSF60B bacteriophage targeting a Shigella spp. bacteria, thebacteriophage having a genome comprising a nucleic acid sequencecomprising SEQ ID NO: 7.

In another aspect, the invention provides a composition comprising anSFNHSI bacteriophage targeting a Shigella spp. bacteria, thebacteriophage having a genome comprising a nucleic acid sequencecomprising SEQ ID NO: 8.

In another aspect, the invention provides a composition comprising anSF37B bacteriophage targeting a Shigella spp. bacteria, thebacteriophage having a genome comprising a nucleic acid sequencecomprising SEQ ID NO: 9.

In another aspect, the invention provides a composition comprising aPG-I1 bacteriophage targeting Staphylococcus aureus, the bacteriophagehaving a genome comprising at least one nucleic acid sequence selectedfrom the group consisting of SEQ ID NOs: 10-12.

In another aspect, the invention provides a composition comprising aU136B bacteriophage targeting E. coli, the bacteriophage having a genomecomprising a nucleic acid sequence comprising SEQ ID NO: 13.

In another aspect, the invention provides a method of treating abacterial infection in a subject in need thereof. The method comprisesadministering to the subject a therapeutically effective amount of anyof the compositions disclosed herein.

In certain embodiments, the bacterial infection is drug-resistant ormulti-drug resistant.

BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS

The following detailed description of specific embodiments of theinvention will be better understood when read in conjunction with theappended drawings. For the purpose of illustrating the invention, thereare shown in the drawings exemplary embodiments. It should beunderstood, however, that the invention is not limited to the precisearrangements and instrumentalities of the embodiments shown in thedrawings.

FIGS. 1A-1D illustrate the finding that phage U136B relies on TolC. FIG.1A shows an efficiency of plating receptor screen of phage U136B revealsTolC as the candidate outer membrane protein receptor. A phage thatproduces an equal number of plaques on a knockout as on wild-typebacteria has an EOP of 1.0 (dotted line). A “bd” at the lower, dashedline indicates that the efficiency of plating was below the limit ofdetection (˜10⁴). FIG. 1B shows genetic complementation with a plasmidcontaining tolC fully restores plaquing ability by phage U136B on a tolCknockout. Error bars=95% CIs. FIG. 1C is a series of bacterial growthcurves showing that phage U136B lyses wild type bacteria in liquidculture (˜1.5 h) but has no effect on the tolC knockout in liquidculture. FIG. 1D shows single-step growth curves that confirm phageU136B cannot grow on a tolC knockout in liquid culture.

FIGS. 2A-2C illustrate the finding that phage U136B relies onlipopolysaccharide. FIG. 2A shows results from an efficiency of platingscreen of phage U136B on LPS synthesis gene knockouts revealing genesimportant to phage replication: rfaC, rfaD, rfaE, and rfaP. FIG. 2Bshows genetic complementation with plasmids containing respective rfagenes fully restores plaquing ability by phage U136B on the knockouts.Error bars=95% CIs. FIG. 2C is a schematic of genes involved in LPSsynthesis, showing that the genes required by U136B affect the deepregion of core polysaccharide (figure adapted from Chang et al (2010)Journal of Experimental Microbiology and Immunology 14:101-107, Yethonet al (2000) Journal of Bacteriology 182(19):5620-5623).

FIGS. 3A-3I illustrate the trade-offs between phage resistance andantibiotic resistance. FIGS. 3A-3B show MICs for phage-resistantisolates from the fluctuation experiment. FIGS. 3D-3E show MICs forphage-resistant isolates evolved in +phage treatment communities. FIGS.3G-3H show MICs for phage-sensitive isolates evolved in control −phagepopulations. FIGS. 3C, 3F, and 3I show a phage-mediated trade-offbetween colistin resistance and tetracycline resistance is evident inthe fluctuation experiment (FIG. 3C), but this result is alleviatedafter evolution (FIG. 3F) and doesn't appear in the control treatment(FIG. 3I). In FIGS. 3C, 3F, and 3I, a jitter of ±7.5% has been added tothe data points for visualization but regression lines are based on theoriginal, non-jittered data.

FIGS. 4A-4B illustrate the evolution of antibiotic sensitivity inbacterial populations while under selection for phage resistance. FIG.4A shows total bacterial population densities, and FIG. 4B showstetracycline-resistant bacterial densities, in the presence and absenceof phage.

FIG. 5 is a table illustrating phage U136B has a limited host rangewithin E. coli, plaquing on strains with and without the LPS O-antigen.EOP=efficiency of plating (mean of three replicates). NA=not applicable.

FIG. 6 is a table illustrating the phage resistant mutations isolatedfrom the fluctuation experiment. ^(a)A “Δ” indicates deletion ofindicated base pairs or gene. A * indicates a point mutation resultingin a stop codon. Values in parentheses indicate either singlesubstitutions or the location of either a stop codon or IS-elementinsertion within coding sequences. Underlined bases indicate singlesubstitutions. ^(b) Concentrations tested were 0.125, 0.25, 0.5, 1.0,2.0, and 4.0 μg/mL, so discrete value listed may be greater than theactual MIC but not more than the next highest value tested. Values arethe mode of 4-5 replicates tested for each mutant. ^(c)All rfa genenames are synonymous with the corresponding waa gene names used in theBW25113 annotation. Mutations are reported in the rfa form forreadability (e.g., waaP is equivalent to rfaP). ^(d)Concentrationstested were 12.5, 25, 50, 100, 150, 200, 250, 300, 350, and 400 ng/mL,so discrete value listed may be greater than the actual MIC but not morethan the next highest value tested. Values are the mode of 4-7replicates tested for each mutant. ^(e)The 48-gene deletion included LPSsynthesis gene gmhA (also called lpcA), which codes for a phosphoheptoseisomerase involved in LPS synthesis. A full list of the 48 genes andtheir annotations is included in FIG. 15 . Gene ydeM putatively encodesa YdeN-specific sulfatase-maturating enzyme.

FIG. 7 is a table illustrating phage resistance mutations arising duringexperimental communities with and without phage. Control MIC values forBW25113 and tolC mutant are from the same dataset reported in FIG. 6 .^(a)A “A” indicates deletion of indicated base pairs or gene. A *indicates a point mutation resulting in a stop codon. Values inparentheses indicate either single substitutions or the location ofeither a stop codon or IS-element insertion within coding sequences.Underlined bases indicate single substitutions. ^(b) Concentrationstested were 0.125, 0.25, 0.5, 1.0, 2.0, and 4.0 μg/mL, so discrete valuelisted may be greater than the actual MIC but not more than the nexthighest value tested. Values are the mode of 3-4 replicates tested foreach strain. ^(c)Concentrations tested were 12.5, 25, 50, 100, 150, 200,250, 300, 350, and 400 ng/mL, so discrete value listed may be greaterthan the actual MIC but not more than the next highest value tested.Values are the mode of 2 replicates tested for each mutant. ^(d) narZ:nitrate reductase 2 (NRZ), alpha subunit; ryiB: novel sRNA, functionunknown; arsC: arsenate reductase; yhiS: putative uncharacterizedprotein; bglH is a cryptic carbohydrate-specific OMP gene; metE is a5-methyltetrahydropteroyltriglutamate-homocysteine S-methyltransferasegene; lplT is a lysophospholipid transporter gene.

FIG. 8 is a transmission electron micrograph showing phage U136B has asiphophage morphology.

FIG. 9 shows Kirby-Bauer disk-diffusion assay measurements for colistinsensitivity have high variance but yield similar relative results to themicrobroth dilution method. The control strains (DrfaD and DrfaH) andphage resistant mutants (RGB-036 to RGB-079) had increased sensitivityto colistin compared to ancestor. Phage resistant mutants RGB-040, 045,and 071 contain tolC mutations. Error bars show SEM of 11 to 19independent measurements of each strain.

FIG. 10 illustrates the finding that phage-resistant mutants vary infitness costs. Bacterial growth curves include wild type bacteria(BW25113), tolC phage-resistant mutants, and LPS-related mutants listedin FIG. 6 . Each line shows the mean of three biological replicates.

FIGS. 11A-11B illustrate location of point mutations and small INDELS inthe TolC amino acid sequence for strains from the fluctuation experiment(FIG. 11A) and evolution experiment (FIG. 11B). Insertion-sequence (IS)mediated mutations are not shown. (Figure adapted from Koronakis et al.(2000) Nature 405:914-919).

FIG. 12 is a table illustrating bacteria and phage used in the study.

FIG. 13 is a table illustrating sensitivities to colistin in rfa geneknockouts. Data summarized from Table S18 of the genome-wide screenreported by Liu et al. 2010 Antimicrob Agents Chemother 54(4):1393-1403.

FIG. 14 is a table illustrating phage extinction dynamics during theevolution experiment. Timing of phage extinctions was based on platingfiltered phage samples as spot tests, top agar overlays, or both. At Day10, Population +9 was not detectable in the serial dilution spot test,but it did have plaques appear in the filtered phage sample.

FIG. 15 is a table illustrating genes in the 48-gene deletion. The onlygene readily related to LPS synthesis is smhA (row 6), a phosphoheptoseisomerase involved in core polysaccharide synthesis.

FIG. 16 is a table illustrating mutations in experimentally evolvedTet^(R) isolates. ^(a)A “Δ” indicates deletion of indicated base pairsor gene. Values in parentheses indicate either single substitutions, orthe location of a stop codon, INDEL, or IS-element insertion withincoding sequences. Underlined bases indicate single substitutions. ^(b)All rfa gene names are synonymous with the corresponding waa gene namesused in the BW25113 annotation. Mutations are reported in the rfa formfor readability (e.g., waaP is equivalent to rfaP). ^(c)gatR:pseudogene, repressor for gat operon, interrupted by IS3, splitgalactitol utilization operon repressor, fragment 2, split galactitolutilization operon repressor, interrupted; ^(d)argV one of sevenarginine tRNAs. ^(e)moaB: inactive molybdopterin adenylyltransferase^(f)yaiX: pseudogene, interrupted by IS2A, acetyltransferase homolog,nonfunctional, interrupted by IS2, putative transferase; ^(g)metE:5-methyltetrahydropteroyltriglutamate-homocysteine S-methyltransferase;^(h)lpIT: lysophospholipid transporter.

FIG. 17 is a table illustrating statistical analysis for phage-mediatedtrade-offs between colistin resistance and tetracycline resistance. Thetrade-off is only observed among fluctuation assay mutants(“Fluctuation” model) and not after 10 days of evolution with phage(“Evolution+Phage” model) or in the control populations(“Evolution-Phage” model).

FIG. 18 illustrates phage that target Shigella flexneri bacteria. PhagesSF37B and SF60B cannot kill bacteria where OmpA and/or OmpC are missing.A plasmid with OmpA or OmpC can ‘rescue’ killing but empty plasmidcannot.

FIGS. 19A-19D illustrate S. flexneri phage SFA1-1. FIG. 19A shows datafrom the “cross-streak” method showing the phage cannot kill (disruptbacteria growth) when bacteria lack OmpA. In contrast, the phageeffectively disrupts wild-type (M90T) growth. FIG. 19B shows phageSFA1-1 cannot kill bacteria where OmpA is missing; a plasmid with OmpAcan ‘rescue’ killing but empty plasmid cannot. FIG. 19C shows phageSFA1-1 prevents wild type (M90T) from growing (but phage-resistantmutants appear and grow around hour 14). In contrast, M90T, M90T withoutOmpA, and OmpA knockout plus phage all grow roughly equally. FIG. 19Dshows results from absorption (attachment) assays showing phage binding(disappearance from media) occurs only on wt and ompA plasmid-rescuestrains.

FIGS. 20A-20B illustrate details of phage SFA1-1 genetics and molecularbiology. SFA1-1 was isolated from waste water in Cuatro Cinenegas,Mexico. It belongs to the Myoviridae family (likely Tevenvirinae), is adsDNA virus, 105,517 bp contig assembled, 139 CDS, and GC content 35.89%(S. flexneri GC content 50.9%).

FIG. 21 illustrates phage that target Pseudomonas aeruginosa. Relateddata for LPS5 phage: PA01 bacteria have a frequency of resistance toLPS5 equal to ˜ 7.2×10-4 (i.e., mutants observed at roughly 1 in 7,200cells).

FIGS. 22A-22B illustrate P. aeruginosa phage TIVP-H6. FIG. 22A showsburst assay data that estimate phage TIVP-H6 growth traits on PA14bacteria. Burst size—14.8 particles released per infected cell;Latent/Eclipse time—40 minutes. FIG. 22B illustrates InSeq Screen totest for putative binding of TIVP-H6 on PA14 bacteria. Every point is anormalized counts-per-million read for a single gene. Statisticallysignificant genes included those involved in Type IV pilus biogenesis;strongly suggests Type-IV pilus is binding target.

FIG. 23 illustrates P. aeruginosa phage TIVP-H6 causes trade-off wherebacteria evolve resistance that causes reduced pyocyanin production.Shown is bacteria pyocyanin relative to untreated control.Ciprofloxacin, Tetracycline, Nalidixic acid, Carbenicillin, and Dead(heat inactivated) phage TIVP-H6 do not reducte production. But phageTIVP-H6 reduces pyocyanin production on par with Eythromycin, and incombination with Cip and Ery. When P. aeruginosa bacteria are exposed totreatments along x-axis, the supernatant of the culture is tested forpyocyanin level. Exposure to TIVP-H6 yielded lowest level, such thatbacteria die from phage attack and remaining mutants are phage resistantand produce very low pyocyanin levels, comparable to Ery which does notkill bacteria in this assay but causes reduced pyocyanin production.Thus, H6 does both, and works well in presence of Ery and otherantibiotics that do not affect pyocyanin or even cause increase.

FIG. 24 illustrates P. aeruginosa phage LPS-5 causes trade-off wherebacteria evolve resistance that causes reduced elastase production.Classic congo-elastase assays confirmed that elastase production inculture supernatant was below the limit of detection when bacteria weregrown for 48 hours. Data compared wildtype PA01 and 3 spontaneousphage-resistant mutants of PA01.

DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

As more alternative therapies are considered to combat the rise ofantibiotic resistant biofilm-associated infections, the use ofbacteriophages, as described herein, presents a novel strategy to managethese difficult to manage infections.

Definitions

Unless defined otherwise, all technical and scientific terms used hereinhave the same meaning as commonly understood by one of ordinary skill inthe art to which the invention pertains. Although any methods andmaterials similar or equivalent to those described herein may be used inthe practice for testing of the present invention, the preferredmaterials and methods are described herein. In describing and claimingthe present invention, the following terminology will be used.

It is also to be understood that the terminology used herein is for thepurpose of describing particular embodiments only, and is not intendedto be limiting.

As used herein, the articles “a” and “an” are used to refer to one or tomore than one (i.e., to at least one) of the grammatical object of thearticle. By way of example, “an element” means one element or more thanone element.

As used herein when referring to a measurable value such as an amount, atemporal duration, and the like, the term “about” is meant to encompassvariations of 20% or within 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%,0.5%, 0.1%, 0.05%, or 0.01% of the specified value, as such variationsare appropriate to perform the disclosed methods. Unless otherwise clearfrom context, all numerical values provided herein are modified by theterm about.

As used herein, the terms “antibacterial activity” and “antimicrobialactivity” with reference to a bacteriophage, isolated bacteriophageprotein (or variant, derivative or fragment thereof), or bacteriophageproduct, are used interchangeably to refer to the ability to kill and/orinhibit the growth or reproduction of a microorganism, in particular,the bacteria of the species or strain that the bacteriophage infects. Incertain embodiments, antibacterial or antimicrobial activity is assessedby culturing bacteria: gram-positive bacteria (e.g., S. aureus),gram-negative bacteria (e.g., K. pneumoniae, A. baumannii, E. coli, andP. aeruginosa) or bacteria not classified as either gram-positive orgram-negative, according to standard techniques (e.g., in liquidculture, on agar plates), contacting the culture with a bacteriophage orbacteriophage product and monitoring cell growth after the contact. Forexample, in a liquid culture, the bacteria may be grown to an opticaldensity (“OD”) representative of a mid-point in exponential growth ofthe culture; the culture is exposed to one or more concentrations of oneor more bacteriophage or bacteriophage product, and the OD is monitoredrelative to a control culture. Decreased OD relative to a controlculture is representative of a bacteriophage or bacteriophage productexhibiting antibacterial activity (e.g., exhibits lytic killingactivity). Similarly, bacterial colonies can be allowed to form on anagar plate, the plate exposed to a bacteriophage or bacteriophageproduct, and subsequent growth of the colonies evaluated related tocontrol plates. Decreased size of colonies, or decreased total numbersof colonies, indicate a bacteriophage product.

By “attenuated” is meant the bacterium has a decreased virulence withrespect to a wild-type bacterium. In particular, a bacterium has anattenuated virulence of about 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80% or moredecrease in virulence as compared to a wild-type bacterium.

As used herein the terms “bacteriophage” or “phage” refer to a virusthat infects bacteria. A “lytic bacteriophage” is an actively infectingbacteriophage, i.e. one that is in the lytic (virulent) cycle (asopposed to the (dormant) lysogenic cycle). In the lytic cycle, the phagetakes over the host cell's machinery for its own replication, ultimatelykilling (lysing) the host cell to produce its own progeny. The term“bacteriophage products” refers to polynucleotides, polypeptides, orfragments, variants, or derivatives thereof, isolated from abacteriophage of the invention, which polynucleotide, polypeptide, orfragment, variant, or derivative thereof, exhibits a biological functionor activity associated with the bacteriophage from which it was isolatedor derived (e.g., antimicrobial or antibacterial activity (e.g., lyticcell killing)).

By “effective amount” is meant the amount required to reduce or improveat least one symptom of a respiratory disorder, condition or diseaserelative to an untreated patient. The effective amount of airwayepithelial cells used for therapeutic treatment of the respiratorydisorder, condition or disease varies depending upon the manner of thespecific disorder, condition or disease, extent of the disorder,condition or disease, and administration of the cells, as well as theage, body weight, and general health of the subject.

The term “efflux pump” refers to an active, protein transporterlocalized in the cell membrane that exports substrate(s). In bacteria,five classes of efflux pumps exist: MF (major facilitator), MATE(multidrug and toxic efflux), RND (resistance-nodulation-division), SMR(small multidrug resistance) and ABC (ATP binding cassette).

The term “expression” as used herein is defined as the transcriptionand/or translation of a particular nucleotide sequence driven by itspromoter.

“Expression vector” refers to a vector comprising a recombinantpolynucleotide comprising expression control sequences operativelylinked to a nucleotide sequence to be expressed. An expression vectorcomprises sufficient cis-acting elements for expression; other elementsfor expression can be supplied by the host cell or in an in vitroexpression system. Expression vectors include all those known in theart, such as cosmids, plasmids (e.g., naked or contained in liposomes)and viruses (e.g., retroviruses, adenoviruses, and adeno-associatedviruses) that incorporate the recombinant polynucleotide.

A “vector” is a composition of matter that comprises a gene and that maybe used to deliver the gene to the interior of a cell. Vector refers toany plasmid containing the gene that is capable of moving foreignsequences into the genomes of a target organism or cell.

As used herein, the term “fragment” as applied to a nucleic acid, isless than the whole.

By “host” or “host cell” is meant a cell, such as a mammalian cell, thatharbors a pathogen, such as a bacterium. The pathogen can infect thehost cell.

By “immune response” is meant the actions taken by a host to defenditself from pathogens or abnormalities. The immune response includesinnate (natural) immune responses and adaptive (acquired) immuneresponses. Innate responses are antigen non-specific. Adaptive immuneresponses are antigen specific. An immune response in an organismprovides protection to the organism against bacterial infections whencompared with an otherwise identical subject to which the composition orcells were not administered or to the human prior to suchadministration.

By “infection” is meant a colonization of the host. Infection of a hostcan occur by entry through a membrane of the host, such as a phagepassing through the cell membrane of a bacterium.

The term “bacterial infection” means the invasion of the host organism,animal or plant, by pathogenic bacteria. This includes the excessivegrowth of bacteria which are normally present in or on the body of theorganism, but more generally, a bacterial infection is any situation inwhich the presence of a bacterial population(s) is damaging to a hostorganism. Thus, for example, an organism suffers from a bacterialinfection when excessive numbers of a bacterial population are presentin or on the organism's body, or when the effects of the presence of abacterial population(s) is damaging to the cells, tissue, or organs ofthe organism.

By “infectious disease” is meant a disease or condition in a subjectcaused by a pathogen that is capable of being transmitted orcommunicated to a non-infected subject. Non-limiting examples ofinfectious diseases include bacterial infections, viral infections,fungal infections, and the like.

The term “isolated” refers to a material or an organism, such asbacteria, that is free to varying degrees from components or otherorganisms that normally accompany it as found in its native state.Isolated denotes a degree of separation from an original source orsurroundings. An isolated bacterium is sufficiently free of otherbacteria such that any contaminants do not materially affect growth,pathogencity, infection, etc. or cause other adverse consequences. Thatis, bacteria are isolated if they are substantially free of bacteria ormaterials. Purity and homogeneity are typically determined usinganalytical techniques, for example, single cell culturing. The term“purified” can denote that a cell gives rise to essentially onepopulation.

By “multi-drug resistant,” “multi-drug resistance” or “MDR” is meantantimicrobial resistance to the effects of antibiotics or otherantimicrobial drugs.

By “non-pathogenic” is meant an inability to cause disease.

By “pathogen” is meant an infectious agent, such as bacteria, capable ofcausing infection, producing toxins, and/or causing disease in a host.

By “disrupt” is meant to kill bacteria and/or to inhibit, slow, stop, orprevent bacterial replication and/or growth.

By “associated with a biofilm” is meant that the pathogen is present inand/or on a biofilm or forms a biofilm.

A “portion” of a polynucleotide means at least about twenty sequentialnucleotide residues of the polynucleotide. It is understood that aportion of a polynucleotide may include every nucleotide residue of thepolynucleotide.

“Proliferation” is used herein to refer to the reproduction ormultiplication of similar forms, especially of bacteria. That is,proliferation encompasses production of a greater number of bacteria,and can be measured by, among other things, simply counting the numbersof bacteria, measuring incorporation of ³H-thymidine into the bacteria,and the like.

As used herein, “sample” or “biological sample” refers to anything,which may contain the cells of interest (e.g., cancer or tumor cellsthereof) for which the screening method or treatment is desired. Thesample may be a biological sample, such as a biological fluid or abiological tissue. In one embodiment, a biological sample is a tissuesample including pulmonary arterial endothelial cells. Such a sample mayinclude diverse cells, proteins, and genetic material. Examples ofbiological tissues also include organs, tumors, lymph nodes, arteriesand individual cell(s). Examples of biological fluids include urine,blood, plasma, serum, saliva, semen, stool, sputum, cerebral spinalfluid, tears, mucus, amniotic fluid or the like.

The term “strain” means bacteria or bacteriophage having a particulargenetic content. The genetic content includes genomic content as well asrecombinant vectors. Thus, for example, two otherwise identicalbacterial cells would represent different strains if each contained avector, e.g., a plasmid, with different phage open reading frameinserts.

A “subject” as used herein, may be a human or non-human organism.Non-human organisms include, but are not limited to, livestock, pets,aquaculture organisms, cultivated plants and crops. Preferably, thesubject is human.

As used herein, the terms “treat,” treating,” “treatment,” and the likerefer to reducing or improving an infectious disease or condition and/orone or more symptoms associated therewith. It will be appreciated that,although not precluded, treating an infectious disease or conditionand/or one or more symptoms associated therewith does not require thatthe disorder, condition, disease or symptoms associated therewith becompletely ameliorated or eliminated.

In the context of treating a bacterial infection a “therapeuticallyeffective amount” or “pharmaceutically effective amount” indicates anamount of a composition comprising bacteriophage which has a therapeuticeffect. This generally refers to the lysis of bacterial cells or, tosome extent, of the acquisition of resistance (genetic evolution) ofbacterial cells to bacteriophage infection.

By “virulence” is meant a degree of pathogenicity of a given pathogen orthe ability of an organism to cause disease in another organism.Virulence refers to an ability to invade a host organism, cause disease,evade an immune response, and produce toxins.

By “bacterial virulence” is meant a degree of pathogenicity of bacteria.Bacterial virulence includes causing infection or disease in a host,producing agents that cause or enhance disease in a host, producingagents that cause or enhance disease spread to another host, and causinginfection or disease in another host.

By “virulent” or “pathogenic” is meant a capability of a bacterium tocause a severe disease.

By “wildtype” is meant a non-mutated version of a gene, allele,genotype, polypeptide, or phenotype, or a fragment of any of these. Itmay occur in nature or produced recombinantly.

In this disclosure, “comprises,” “comprising,” “containing” and “having”and the like can have the meaning ascribed to them in U.S. Patent lawand can mean “includes,” “including,” and the like; “consistingessentially of” or “consists essentially” likewise has the meaningascribed in U.S. Patent law and the term is open-ended, allowing for thepresence of more than that which is recited so long as basic or novelcharacteristics of that which is recited is not changed by the presenceof more than that which is recited, but excludes prior art embodiments.

Ranges provided herein are understood to be shorthand for all of thevalues within the range. For example, a range of 1 to 50 is understoodto include any number, combination of numbers, or sub-range from thegroup consisting 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16,17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34,35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, or 50.

The recitation of an embodiment for a variable or aspect herein includesthat embodiment as any single embodiment or in combination with anyother embodiments or portions thereof.

Any compositions or methods provided herein can be combined with one ormore of any of the other compositions and methods provided herein.

DESCRIPTION

“Phage therapy”, the application of lytic bacteriophages (or “phages”;viruses of bacteria) for the bio-control of bacteria, is one method fortreating multi-drug-resistant (MDR) bacterial infections: the use oflytic (virulent) bacteriophages (bacteria-specific viruses) asself-amplifying ‘drugs’ that specifically target and kill bacteria.Lytic phages bind to one or more specific proteins on the surfaces ofparticular bacterial hosts, an intimacy that led to development of phagetherapy as a biocontrol strategy which predated use of broad-spectrumchemical antibiotics. Due to the recent precipitous rise in antibioticresistance, phage therapy has seen revitalized interest among Westernphysicians, buoyed by successful clinical trials demonstrating safetyand efficacy.

However, one limitation of phage therapy is the abundant evidence thatbacteria readily evolve resistance to phage infection. While multiplemechanisms of phage resistance exist, phage attachment to a receptorbinding-site exerts selection pressure for bacteria to alter ordown-regulate expression of the receptor, thereby escaping phageinfection. Given the certainty of evolved phage-resistance, modernapproaches to phage therapy must acknowledge and capitalize on thisinevitability. Genetic trade-offs are often observed in biology, whereorganisms evolve one trait that improves fitness (a relative advantagein reproduction or survival), while simultaneously suffering reducedperformance in another trait.

Described herein is an evolutionary-based strategy that forces a genetictrade-off: utilize phages that drive MDR bacterial pathogens to evolveincreased phage resistance thereby increasing sensitivity to chemicalantibiotics. Thus, this approach to phage therapy should be doublyeffective; success is achieved when phage lyse the target bacterium, andsuccess is also achieved when bacteria evolve phage resistance becausethey suffer increased sensitivity to antibiotics.

Antibiotic Resistance

Many strains of bacteria have become antibiotic resistant, and some havebecome resistant to multiple antibiotics and chemotherapeutic agents,the phenomenon of multi-drug resistance. Some strains have becomeresistant to practically all of the commonly available agents. Forexample, methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) is resistantto not only methicillin (which was developed to fight againstpenicillinase-producing S. aureus) but also aminoglycosides, macrolides,tetracycline, chloramphenicol, and lincosamides. Such strains are alsoresistant to disinfectants, and MRSA can act as a major source ofhospital-acquired infections. An old antibiotic, vancomycin, wasresurrected for treatment of MRSA infections. However, transferableresistance to vancomycin is now quite common in Enterococcus and foundits way finally to MRSA.

The emergence of “pan-resistant” gram-negative strains, notably thosebelonging to P. aeruginosa and A. baumanii, occurred more recently,after most major pharmaceutical companies stopped the development of newantibacterial agents. Hence, there are almost no agents that could beused against these strains, in which an outer membrane barrier of lowpermeability and an array of efficient efflux pumps are combined withmultitudes of specific resistance mechanisms.

Efflux pumps belonging to the resistance-nodulation-division (RND)family of transporters are the major multi-drug efflux (Mex) mechanismin both E. coli and P. aeruginosa. The pumps in this family consist ofthree components that function via active transport to move numerousmolecules, including antibiotics, out of the cell: an antiporter thatfunctions as a transporter (e.g., MexB, Mex D, MexF, MexY), an outermembrane protein that forms a surface-exposed channel (e.g., OprC, OprB,OprG, OprD, OprI, OprH, OprP, OprO, OprM, OprJ, OprN), and a periplasmicmembrane fusion protein that links the two proteins (e.g., MexA, MexC,MexE, MexH, MexX). This system is the major efflux pump associated withintrinsic resistance among 17 possible RND efflux pumps in P.aeruginosa. P. aeruginosa is more resistant than E. coli due to a highlyimpermeable OM and the presence of multiple efflux systems. Inactivationof the Mex efflux pump renders P. aeruginosa more vulnerable toantibiotics than the average E. coli strain.

Compositions

In one aspect, the invention includes a composition comprising a lyticbacteriophage selected from the group consisting of LPS-5, OMKO1,TIVP-H6, LPS-TLTL, TIVP-27, SFA1-1, SF60B, SFNHSI, SF37B, PG-I1, andU136B.

In certain embodiments, the bacteriophage binds a molecule of an effluxpump on pathogenic bacteria, drug resistant bacteria, multi-drugresistant (MDR) bacteria, and/or pan-drug resistant (PDR) bacteria.

In one embodiment, the bacteriophage binds a protein, such as a surfaceexposed protein, of a Mex efflux pump. In another embodiment, the Mexprotein is selected from the group consisting of OprM, MexA, MexB, MexX,and MexY. In various embodiments the lytic bacteriophage is selectedfrom the group consisting of OMKO1, LPS-5, TIVP-H6, LPS-TLTL, TIVP-27,SFA1-1, SF60B, SFNHSI, SF37B and PG-I1. In various embodiments thebacteriophage binds a molecule selected from the group consisting ofO-antigen, efflux pump, Type IV pilus, LPS (core), OmpA, OmpC andpeptidoglycan.

In certain embodiments, the bacteriophage utilizes the antibiotic effluxpump protein TolC and LPS.

In yet another embodiment, the composition further comprises anantibiotic. The antibiotic includes any commonly available agent, suchas an antibiotic selected from, but not limited to, amoxicillin,erythromycin, penicillin, ciprofloxacin, azithromycin,ceftolozane/taxobactam, ceftazidime/acibactiam, tetracycline,imipenem/carbapenem, and any combination thereof.

The present invention also includes a pharmaceutical compositioncomprising the bacteriophage described herein. Pharmaceuticalcompositions comprise the bacteriophage in combination with one or morepharmaceutically or physiologically acceptable carriers, diluents orexcipients. Such compositions may comprise buffers such as neutralbuffered saline, phosphate buffered saline and the like; carbohydratessuch as glucose, mannose, sucrose or dextrans, mannitol; proteins;polypeptides or amino acids such as glycine; antioxidants; chelatingagents such as EDTA or glutathione; adjuvants (e.g., aluminumhydroxide); Magnetic Resonance and Computerized Tomography contrastagents; and preservatives. Compositions of the present invention arepreferably formulated for intravenous administration.

Pharmaceutical compositions of the present invention may be administeredin a manner appropriate to the disease to be treated (or prevented). Thequantity and frequency of administration will be determined by suchfactors as the condition of the patient, and the type and severity ofthe patient's disease, although appropriate dosages may be determined byclinical trials.

In another aspect, the invention includes a composition or apharmaceutical composition comprising the bacteriophage describedherein, wherein the bacteriophage disrupts the multi-drug resistant(MDR) bacteria, Pseudomonas aeruginosa.

Details regarding various bacteriophage of the invention are presentedin Table 1, below.

TABLE 1 Phage strain Sequence Bacteria Putative Target LPS-5 SEQ ID NO:1 Pseudomonas O-antigen (LPS) aeruginosa OMKO1 SEQ ID NO: 2 PseudomonasEfflux pump and aeruginosa Type IV pilus TIVP-H6 SEQ ID NO: 3Pseudomonas Type IV pilus aeruginosa LPS-TLTL SEQ ID NO: 4 PseudomonasLPS (core) aeruginosa TIVP-27 SEQ ID NO: 5 Pseudomonas aeruginosa SFA1-1SEQ ID NO: 6 Shigella spp. OmpA SF60B SEQ ID NO: 7 Shigella spp. OmpCSFNHSI SEQ ID NO: 8 Shigella spp. SF37B SEQ ID NO: 9 Shigella spp. OmpCPG-I1 SEQ ID NO: 10-12 Staphylococcus Peptidoglycan aureus U136B SEQ IDNO: 13 E. coli TolC and LPS

In another aspect, the invention provides an LPS-5 bacteriophagetargeting Pseudomonas aeruginosa. In certain embodiments, LPS-5 binds amolecule of O-antigen (of a lipopolysaccharide). In certain embodiments,the LPS-5 bacteriophage has a genome comprising a nucleic acid sequencecomprising SEQ ID NO: 1.

LPS-5 (SEQ ID NO: 1):CGGTCGGTGCTCCATGGTACTCGGTCGGTGCTCCAACTGGTAACGCCAGAGAGCCGAGCGATGAAGAGTATCGGATGATCCTGAAAGCAAAGATCATCAAGAACAGAACAAACTCAACCCCAGAGCAAGTTATCGAAGCTTATAAATTTGTATTCGGGGTTCCTGAAGTATTCCTAGAGGAGTACGCTCCCGCTGCTGTCCGTATCGGCATCGGTAAGATTCTAACGAACGTAGAGCGTAGTCTTCTATTCGACCTAGGTGGTGCAGGTGCATTGCTTCCTAAGACTATCGGGGTTAACTACACATACACTGAGTTCCAAGCTGGCCGGGTATTTGCTACAGAAGGCTTCCCCGGAGGACAAGGCGTTGGAGACCTAAACGATCCCACTGTTGGTGGAATTCTGACCAACCTAGTGACATAAGGAGTTATAAATGGCTGATATCGGTCAACTACCTATTGAAAATATTTGGTCCACAGGCGGGGATATGGTAGCCCCGACCCCTGCGCAGCAGCAAGGCGGATGGGGTATTCAGTCGGTTCCTCGCCAATGGTGGAACTGGAAGTGGAACCTTCACGATACTAACCTAGCGTATTTGCTACAGAAGGGCATCCCAGAGTGGACTAGCACTCAAGAGTATATTGCAAACAAATCGTTCTGCACAAGAAACGGTTTCGTCTACAAGGCTGTCCGTACCCATACAGGTAGCGACCCGGCCACCGTTAGTTCTAACTGGGTCCGAGCTTTCGCAGACTTTACCACAGCTAGCTCTGCACTTGGAAGCCTGACTCCGAGAGAAGGAGGGATTCCTTTCTTCATTAGCGCATCTGGTGCAGGTGTGTTTGACTCTACGGCTTATGGACGTGGCATGCTGAACGTAGCCAACGCAGCGGGAGCTAGAGACTACATTTCGGCTCAAGAGAGTTCTGTTGTCCTGTCTAACCTGTCTACTGTGACTAGGGCTGCCAACGCGGTTCCGTACTTCAACACCGACACCTCGATGGCTACCTTCAACATTACAGCGTTCGGAAGAGGCCTAGTCAACGCGGGTGATGCAACTAACGCAAGAACCTTCCTAGGCCTAGCTAACTCTGCTACTATCACGGCTGATCCAGCCAACAGAGCACACACTCTGGTCTATAGAGACGCTGCTGGTAACTTCAACGCTGGTGTGATTACAGCCACTCTTTCTGGTAACGCGACTACAGCCAGCAAGCTCAGGGCTCCAGTTACGATTAACGGCGTAGCGTTCGACGGAAGCCAGAACATTGTTCTGCCGGGCCTAGATACAAGCTACGCCGGGGTTGTAGCGAGGCTCCATATTAATGGAGCTAACATGACCGGAACAGATAAGACTACCCAGTTGGCTCTTAGAAATAAATCTGATACAGATTGGATTAGCTTGGTGGCTCCTGATGACAGCTCGTTGGTATTTCAATTTAGAGGGCCAGAAGCGGCTAACGCCACTCTGCGGGTTAACTCTAATGTTGTGTTCCACGCGGGAAACCAGTATGGACTAGGAGCTACTCAAACGCAAGCCAGAGAGCGGCTCTTGGTTGACAGACTGGCACAGAACACGTCTCAAACTGTCCTGTACAACGCAGATAAGAGCAGGTACTTCTGGTTGCAAGATAACGGTGTTTCCGGTATCTGGGACGCAACGACTAACACCCCTCTATGGCGTTTTTCTAGACTAGGCCAGCTCGACTACGGAACAGTCCCTGTTGCACAAATTACAGGATTGGCCAACTCCGCGACAATTCCGGCATCCGCCTCCAATCTGACTAATCAGATTGTTGTGAGGAGCGGAACAGGAGATATCGCAGTACAAGGCGTTACAGCGTTTGGCGCTGTTCTGGGAACAGACTATATTAGAGTAAGAGCCAGCACTGGTAACGCTCACCTAGTATTCCAGAGGAATGATGGAGCAGAGGTAGGGCTTATTTGGGGAATCCCGTCTGCCAACTCTCTGAACTTCAGGACCGCAGGCGGTGCGACAGGCATGTCTCTGGCTGGTCAGGACTTGACTGTAGTTGGCAGGGTGAATGCTGCGACACTCAATTCGTCTGGCAACGTCAACTCTGGCAACAGCGTGATTGCTGCCGGGAACGTGCAGGCTGCTGGCCGTGTGTACTGCGGCGATGCTTTTATGAGCAGCAACGGCAACCTTACTGGCGGAGCTTTCGGCTCTTATGGGACTCTTACCAACTGGGTAGACTCTGTATACGCCAGAAAAACTGACGTAATGACTGATGCCCAAATCTTGGCTGCCACTTCTAGAGGTAGTGCTCAGGCTGTGGGAACATATGTCTTTGCGATTGCAGCTAGCGGAAGTGGGGATGTTGGGACTGTAGTAGCTGGTACGTCTCTAAGGTCTTCGTCTCCCGTCAACTACCACGGAACTACGCTATCCGGTAGCTACAGGTGCATGGGTAGGTTCGGAGCCAGAGGTTCTAACCAGATTACCTTGTTCCAGAAGGTTGCAGATTAACAAAATAGGCCCGTAAGGGCCTTTATAACTGGAGGTGATTTTAATGGAATTCAGAAACGTTGTAAAAATTAAAGCGGGGTTCGAGTGCGAAATAAACCATCCAGAATTGGGATGGATTCCTTACGGCGCTGTAGAGGGATGCCCTACGTCTCACTCCATGTACGTGAAGATCGCCGCAGCGATTGAAGATGGCTCTATGGAAGTGGTAGAAAAAGAGGACAAATATGATGACTTTGAAGCCAGATTGTGGAGAGACAACGAGCTAACCCGGGCTGACCGTCAAGTAGAGATTGCTATCGACGATGAAGACGAAGTAAGAGAGAAGGCTTGGCGTAAGTATCGTTCTGCACTACGTAAATGGCCAGAGCACAAGAACTTCCCATCCGAAAAGAGCAAACCTAAAGCTCCTAAAGAATAAGGCGAGGTAATATATGCCAAACATTATGAAGCCTACGGGTATTAACGCTATCTGGTCTGAAAACGGCCAGAAGGTTGACCCGGGTGCTGTAAAAGTTGGGCTTGGATGGGTGACAGAACTACCTCCCTACCAAACTGCCAACTTCATTGAATACAAGCAAGACTTGTTCAACGCGCACGTTAACCAGCACGGTATTCCCGAATGGGATAGCGTCACAGAGTATCAGGGTAACCTGAGCTACACTCAAGGCGCTAACGGGATCATCTATAAGTGCCTTAGAACCCATTCCGACAAGATTCCAACTGACCCTCTGAACATTACAGCCGGATATTGGCGAGTGGCGTTTGAGGATGCGGGAGAGGCAGCTAAGGTTCAAGCCAACCTTGATCGGCATGTAACAAACTACAACACCCTCTCTGGGATTGGCAACGTAGTTATTGCAAGACAAAACCTAAGTGTGTATAGTAAAGCTGAAGGCGACGCCCGGTACGCTATGAAGCACGGGAACGGCTCTAATGTTTTCAGCGTCGCCACTGCCACACAGCCAACTCACGCGATCCCGCTGAGCCAGCTATCGACTCTCGTTCCTCCTGCTACCGAGACTGTAGCCGGGGTTATGGCAGTTGCTACGACTATCGAGACAGAAGCTGGAGCCAATGATACCAAGGCTGTGAGTCCGCTCAAGGCCGCACAGGTGTATCTGAAGAAGAAAGACAACCTTTCCGGTCTGTCTAACGTCACTGCCGCAAGAGCTAATCTAGGACTGTCGGATACAGCGACTATGCCTTCTTCTACATTCCTGAAGGCAGGTAGCAATCTGGCAGATGTGCCTAACAAGGCGCTGGCAAGATCGAATCTTGGAATTACAAGTAGTGCTACCCAGCCGGAAACCTATTTCTTGAGGAGCGCTCAGAACCTAGCAGATGTACCTAACAAGGCACAAGCTAGAGTCAACCTAGGCCTCACTGGGATGGCTACAACAGACCCTGCGGCGGTTATGATGAAGGCAGACAACCTTGCTGGATTGGCTAACACTGCTACCGCTCGGTCCAACCTAGGGCTAGGCACAGCTTCTACTAGAAATACAGGAGACTTCCTGTCGTCTGGGGCTAACCTGTCCGACCTCACGAACGTCCAAGCAGCTAGAAACAACCTAGGGTTGAAGGGAGCGGCTACGCTCGATGTATGGGGTCTTCCTGCGAATACAACTGCTATGGACTTCCAGTCCAGTCAGTCGGATATTTCCAGAGGATGGGCTCGACTACCAAACGGCCTTCTGCTACAATGGGGAACTGGTCCCGGTCTGTCTGATGACACAAGGACGAATATCCAACTCCCTGTTCCAGCACGAATCTTGAACGTTCAAGTGACCGTAATGGGGACGTTTAACAACTCCATCGGCCCGGGCGCTTTCATGACGGATATGTGGAGCAACACCGGGTTTAGAGTTAGCTGCAACTGGGGCAACTGGTCTTACCCGTTCAACTGGTTTGCTATCACTTCCACCCTGTAATTCAGGAGTATCAAAAATGGCTCTAACTGAGCAAGACTTCCAATCGGCTGCCGATGATCTCGGAGTCGATGTTGCCAGTGTAAAGGCCGTCACTAAAGTAGAGAGTCGTGGGAGCGGCTTTCTACTTTCTGGCGTCCCTAAGATTCTATTCGAAAGGCACTGGATGTTCAAGCTTCTCAAAAGGAAGCTAGGTCATGACCCTGAAATAAACGACGTTTGCAACCCTAAAGCTGGAGGATACCTCGGCGGACAAGCGGAGCACGAACGTCTAGATAAAGCAGTCAAAATGGATAGAGACTGCGCACTTCAAAGTGCCTCTTGGGGCCTATTCCAGATTATGGGATTCCATTGGGAGGCACTAGGTTATGCGAGTGTTCAGGCATTTGTCAATGCCCAGTACGCCAGCGAAGGATCGCAACTAAACACTTTTGTACGCTTCATCAAGATCAATCCTGCAATCCACAAAGCTCTGAAATCCAAGAACTGGGCGGAATTTGCCCGGAGGTATAACGGGCCTGATTACAAGAAAAATAATTACGATGTTAAGCTAGCAGAAGC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CA

In another aspect, the invention provides an OMKO1 bacteriophagetargeting Pseudomonas aeruginosa. In certain embodiments OMKO1 binds amolecule of an efflux pump and/or Type IV pilus. In certain embodiments,the OMKO1 bacteriophage has a genome comprising a nucleic acid sequencecomprising SEQ ID NO: 2.

OMKO1 (SEQ ID NO: 2)AATTATTAACGAACGACTGGAGTCCAGCGGAAGTAGATGGTGCGTATATGCGCTATCGTGGTTATGAGCGCATGGCAGGGACTATTTTTAATGAACTCAATAGAGCGGTACGTGTATTTAATATGCGTAATGGTGGATCAGTACAAACTGTCGAGTTAGATCCGCACGTGATCTGGCGCAAGATTGTACAAGATCCGACAGTAGCCACTATTGAAGATTCTAACCCCATTGCAAATATCCGTGAACAAGAAGCGATGACTTATCGTGGAGATGGTGGACGCGGTTCAACTTCAATGGTTGCACGTACACGTATTTACGGTGAAGCGGATGTTGGTGTGGTTAGTGAATCAACTGTTGACTCAGGTGACGTTGGCGTTATTGCTTACTTAGTACCTGATGCTAACTTTGTAAACATGCGTGGTGTTACGCGTATGTTTGATCCAAAGACAGATGGACCAGCTAGACTACTTTCAACTAGTGCACTGCTTGGTGTTGCAACCGAGCATGATGACCCTAAGCGAATTAACTTTATCTCAATTCAGCAGCAGCAAGGTATTTATGCTGATGGGTATACAGTTACACCAGTTCGTACAGGCTATGAACAAATCATAGCCCAAAGAACTAGTTCTATCTTTGCTGTAGCAGCAGAACAAGATGGTGAAGTTGTAGCTATTGATGAATATGGTATCCAAGTTAAATATGCTGATGGTAATGTATTTGGATATCAATTAGGTACAGTTCATGGCACAGCAGCTGGTGTTAACTACCCACACATTCTTGTTACCTCATTAAAGAAAGGTGATAAGTTTAAACGTGGTGATACTATCACATATAACAAACGTTATTTCTCTGAAGATAGGTATACGCCTGGGCAAGTATTATGGAAAGCCGGTTGTATGGCTGTTGTAGCATTTGATGATAACCTTGACACTTTAGAAGACGGTTCAGTTATTTCTGAAGACCTAGCTAAAAGGTTAAATACTCAAACAACTGCAATCAAGAATATCGATGTTAGGTTTGATCAGACTATTCGAGATATGGTGAAAGTTGGGGATCATGTCGACTTAAATTCAATTCTATGTATAATTGAAGATCCTGAAACAGCTGCTCACTCACTATATGACGAGGCATCTATTGAGACATTACGCAAACTATCAGCATATTCGCCACGTGCTAAGCTCGTAGGTACAGTATCAAAGATTGAATGCTTCTATCATGGTGAAATAGACGATATGACACCAAGTTTACAAGCATTAGCTAATACGTCAGATAAACAACGTGCTGAACGAGCTAAATCATTGAAAGAACCTACCTTCACTGGACAAGTAGATGCTAACTATCGAGTGAAAGGACGAGCCTTAGAATATGACCACATGATTATTCGAGTGTATATCGATCATGATATCCCATGTGGTGTTGGAGATAAAGGCGTAGTAGCTAACCAGATGAAAACGGTATTCTCCCGTGTAATGACTGGACGTAATGAAACTGAAGATGGCCGTAATATTGATCTACTATTCGGTAATACATCGGTAGAAGAACGAATGGTTCTATCTCCTAAAATCATTGCTACAACAACTGGTATCTTGTGGGCAGCTGGAAAACATCTTGTAGCTGTATATAGAGGAAACACTAATGCAAAAGCTAAGTAATAATGTAGCACATGGTCAGAACATTGCTGTTCTTCATGCTGCTGTTAAACTAGGTACTCAAGCAATTCTACAATCGCTTGGTGGCACCACCAGCTCCCCATCTCTGAATGGGGAGTTTTTAACTGAGGCTGATATTGCAGCAGCTTTAAACGCTCGCTTAATGAAGAACCTCAATATCTAAGGAGTGTTAAAATGTTCTGTAAAGAAACCCAAGCTGCGATTGTTGGCTCAGCACGTAGTCTAACTGAGGATAACCTTGTTCTAGTTATCCCTAATGAAACATATCCCCTTGCGGTCTTTGCAGATGGTTTCAGTGTAGATGGCAACTCTAATAAAGTTGCCCTCTCTGAAGAACTGGAAGCATCTGTAGAAGAGTTCTTCGAGGAAGCTAACCAAGAGCAACCTGTTAGTGTAGAAGAAGAGCAAGAAGCTCTGATTGCACATGTCTGCTCATCATTACAAAAGATCCAATTCAATACGCAGAATGTTATTTGCCCTGCAATTGAATATATGGTACGTGTCTTTAATGAGCGTCAAAGCATTAGTTGTCAACCAGATGTAAGCGCTACATTCTACCACTATAATGCAGTTCACAGTGATCCCCGCCTAACTGCACACGTTAGTACACGATACAATAATTTACAGCCGTTACCTGAGTATCGTACCTTTATTCTAGAATCAATCGATGCTAATGAAATTATTCGGTTAGTATCAATGGGTAATCCGCATCTAGATCAAACTGAAGTTGAAGAATGGCTACTATCTATTCCTAATAGCGCTGCTGTTATTGAAGGTGTATGGAATTCTATCTTCAATGATGGTCGTCTTCTCATTCCAGGTGAACTTGAATATGTTGTGGGTAGATCCTTCCCATTCACTGTTGATTCACTAGCTCTGGCTTACATGATTTGCGGTCACTACATCGATAATCCGGTTGAAGTTATTGGCGAGAGTGATGTTGACCTAGAAACATGGTCACTAACTATCCGTAAACTACATGAGATGTTTGGATTCTATCTCAAGCGTGCTTATGAACGTCGTCAAGCTGATCGCGATGCAGGTCTACTCATCCTAGCTTCAGAAGCTAATAATGTAGTTGCTAATTCTCGTTGCAAAGTAATCATTAATGGTGATGTTGCACCTCAATTTGAATTAGCAGGTGGTGACATCCAAGCTATCCTTGGTGCAGCTGTAGCAGGTAGTAATAACATCTACCTAGAGCAGATTCTTAATAACTCAGAACAGTTTATTCAACGTTGGCTATCGGTATATCCGCTGATTAAACAGTCAGCTATGGATAAAGGTTTACGTAAACTACGCAATGACATCCATGAATCATTTATGGATGGCGTTATTAATACTGAACTTAAAGATCGTCATGTTAATGAACTCGAATATCGTATTAAAGAAGCAATGAGTACGATGACGACTGAGGATCTTAAGAATCCTTACATTACCTTTGGTAAACTTATCTGTAAAACATTCTTTACAGAAAATGTTTACTGGCAATATCTGTTAGCCATTGATGAATTTAGTCAAATGTATCCTGAGGCCACTCTACGTGAACTCAATACACAATCACTAATTTCGCTAATGGCAGCATGGCTATCTCAACAGATTAAAGTTGAGCGGTTCACTGGCGTTGTTGATCCATATGCGAAACTGCCAGTAAAAGAAGTTATTGAAACTGTAGAAGATGATGACACTGAAACTTTAGATGATGTTGAAATCGAAGAAGAAGTTTCCAATTAAATTATCTTAATGGTTAATAATCATTAAAACATGCAATCGATGATAAACTCCGGTATTTGGAAGGATACCGGAGTAATACAGCGAATATTTAAAGGTGCATGATTTTGATTAAGTATTTTAAACTTTACATAAATGAACAATTAGGACATGATAATGGACGTACGTTCTCTTCGACGGGATCCAGAACGGGTCCACAGTCATCTAACTGATTTAGAAGATAATTCAGTAGTAACTAATGCCCCATGTAAAATACAGATTCCAGAAAGATTTACAGGAAGACATCTAGCTGTTATTGGCAGTGAAGTATTTACTATTGGTATATTTCCTATTATTTTTAATGATGAATATTACGCAGTGAATAATACCATTGCAATGATGCGGATAAATCCAGTCTCCACTGAACGCGTCCACATCAATGGTGAAGTTTATCTAGAGTTTCATTTTGATAAAGGCAGTAAGATTTTCCAGAATACTTACTTAGTTGTTAATGATACATTAACTTACTATGTTTATGATGAGTTAATTAACAAAGGAAACTTCCCTTGGTATATTAACTATTATGACAAAGCCAAATTATTTGAGACAGCTAATTTACACGCTGGTGTTAATCTTGGTGGATGGCCTACATTACAACTTATTATTTCAACCACTCAGCGTGCCTCGGATGATATGTCACAACTATATCGACATGTGCTAACTAGACACAGTGATATCGTGGATAATCCACCAGTCGACGTACCATTCCGTTCAGTTATCTGGAATACTTCAGACACAACATCAAAACTCAATGGGGCTTATTTTGATCAAGCTATCACATCAGCACTTGTTAACCCATCTGAGTCAGTAGAGCTTATTGAAGAACTCCTCAGGACCTAAGGAGTTGCGTTATGCAACCATATTCTAATTTTTCTGGTTTGCAACAGCGTACTAATAACCAAGTAGTTATCGGCAGTGATATGTTAGCTGGTACTAATAAAAAAGGTGTATTAGTGCCTGATGCGGATGGTTACTATCTAACTCCACTAGGAGCTTATGGTACCCGAAATTCAGCTGGTATGTTCTATGAAATGGCATCCGGCGTATCTATGTTTAATCCAGACTCACCTTTAATGCGTCGTGTTAAAAAGGGTGTTCTATTCATGGAATACAAACACCCTGAACCCTATCGTAAAGATGGCACACGGATGAATGAACACGAGTACCTAATGCGCATTCGTCAAATCGATGATGATCGTGTGTGTGCGCATATTAAGGAACTTATTCTGGTTGATTCTACAGATGAGAAAGGTCTTCCTATTAAACTAGTACTTGGCAAATGCAAACCATACGGTCCTTTTGGTAAGTACTTCGAAGCATCTATTACCAATCCTTCTCAGAATACTTATTGCTCAGTAAGGTCAATAACCCAAGATGATCCTATGCGAGGTATTAAATATACCCGTGAGATTTCAACTTGGGATATGGTTGGGGAAGGTGGTATTTACGGTGCTAATAAATGGAATTCACCTGCATTAGAGAACTATGAAGATCAATTAATGGTTATCACGCCTGATACTCTATATCAGGTACAGCGTGAACGTGA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TGGCA

In another aspect, the invention provides an TIVP-H6 bacteriophagetargeting Pseudomonas aeruginosa. In certain embodiments, TIVP-H6 bindsa molecule of type IV pilus. In certain embodiments, the TIVP-H6bacteriophage has a genome comprising a nucleic acid sequence comprisingSEQ ID NO: 3.

TIVP-H6 (SEQ ID NO: 3)GTGGCGGCCTGGACAGTGTGGTCGCTGCCACTTATGTCAAGAAGGTCATCGGGGTCGAGACCGAGCTCATTCACTTCTGCTACGGTAGCCGAGCGGAAGGCCCTGAGGTGATTGCTGTGCAAGCTGCACCGGCCCAGCAGCCCTGGCAGCAGCCCGCAGCGGCCCAGCAGCCCTGGCAGCAGCCCGCAGCGGCCCAGCCCTGGCAGCAAGCGCCCCAGCAGCAAGCTCCGGTTCAGCAACCTGCTCCGCAGCAAGCCGCTCCGGCACCCCAGCAGGCAGCGCCGGCGGGTTTCAATCCGCAGACCGCCACCCCGCCCTGGGCTCAACCTCAGCAGTAAGCTGACCAGCATGGAGGGCGCATTCGAAAGAGTGCGCCCTCTTTTTCCGAGGAGATGTGATAATGGCAGATGATGCTGACCGCGCACTCAAAGACGCGGAAGTGCTGGATGAGGCGCATATTCGGGAGATAAGCGCAAGAGCGGCAAACATGCCCAAGGGTGTGCCTGGTATCTGCAAGCACTGTGACGAACACTTCGAACGACTGGTTGGCGGGCACTGCGGACGGTGCCGGGACTTGCTCAAGCTCCCCTAAGCCCTCTGAGTCATATAAGGAGGCGTGATGCCTAATGTAATTCTCGCGACGCACACTGTCGCAAAGATCGACGCAATGGTGAAGGCGGATCAAGGGTCTGCCTTCCGTGAGTGGCTCGGAAAGGTGATCGGGCACATCGGTGACGCATACCGCACGGGTAACGAGGGGCACCGCTCGCACATGGGCGCATCGCTCATTGGCGGGGAATGTGCTCGCGCGATCTGGTATAACTTCCGCTGGGCAACGAAATCAAACTTCGAGGGCCGTCTGCTGCGCTTGTTCAATCGCGGACACCTGGAGGAAGCACGTTTCATCGCAATGCTGCTGATGATCGGTTGCGACATCTACCAGCAAGACGAGAACGGGAACCAGTTCCGTATCTCTCACGCAGAAGGACATTTCGGTGGGAGTGGAGACGGTGTCGCTGTGGGGATCCCAGACCTGCCTCCGGGCACTGCTGCACTGACCGAGTTCAAGACTCACAACGACAAATCCTTCACCGAGCTGAAGGCCAAGGGTGTGCGTGACGCCAAGTTCGAGCACTACGTTCAGATGAACGTGTATATGCGCAAGATGGGCCTGGCTGTTGCGCTCTACCTTGCAGTGAATAAGAACACCGACGAACTCTACGGCGAGATCATTCCGCTCGACAGTGCTGTCGCTGATCAGTTCCTGGACAGGGGCGACAAGATCGTTTGGATGTCCGAGCCCCCGAACAAGCTGAACGAGTCGCCTGGATTCTTCAAGTGCAGATGGTGTGACCACAGGCCTGTCTGCCACCTCAAGGCTGCTCCCGATAAGAACTGCCGGACGTGCGCCTACAGCGAACCCGTCGAAGGTGCCAAGTGGATCTGCCGCTTGCATGATCAGCACATCGACAAGGAAGTGCAGCTGACCGGCTGCAAGGACTACACGCCCCGGAAGGTGTTCGGATGATCCAAGCTCGAAGCTATCAGGTCGAAGCGGTCAGCGCGATCTATACTTACTTCGGGAACAACACGGGGAACCCTGTTGTCGCTATGCCCACGGGTACGGGTAAGAGCGTCGTGATCGCGATGTTCCTGGAATCGGTGTTCAAGTATTACCCGAACCAGCGGGTGATGATCCTTACTCACGTCAAGGAGCTGATTCAACAGAACTACGAGAAGCTGATGGGCTTGTGGGCGTTCGCGCCCGCTGGTGTGTATAGCGCAGGCCTGAACCGACGGGACGTGCATGCGCCCATCACCTTTGCTGGTATCGGTTCGGTCGCCAAGAAGTGGGCCATGTTCGGCCATGTGGATCTTGTCATCATTGACGAAGCGCACCTCGTAAGCCCCAGCGAAGCGACCATGTATCAGACATTCCTGTCGGGCCTGATGAGCATCAACCCGAACTTGAAGGTGATCGGTCTGACTGCTACACCGTGGAGGCTTGGGCATGGCAAGCTGACCGACCCTGTGAAGAACGACAAGGGTGAAGAAGTCCCAGGCCTATTCACGGACATCTGTTTCGACATCACAGGCATCGAGGCGTTCAACCGACTCATCGCCGAGGGCTTCCTTGCGCCGCTGGTGCCCAAGAGCACCGTGACGAAGCTGGAAGTAGATGGCGTTCATATGCGCGGCGGCGAGTTCATAGCGAGCGAGCTGCAAACTGCTGTCGATAAGATGGACATCACAGTCGCAGCAGTCAAGGAGGCTCTAGAGCTAGGTTGGAACCGGAATCACTGGCTGGTGTTCGCTGCCGGTGTGGAACATGCTATCCACACCGCTGAGATCATGAATGACATGGGGATCCCGACTGTTGCGATTCACTCCAAGATGGGTGACAAGGAACGCGACAATGCGATCAGGGACTTCAAGGCTGGGAAGTACCGCGCGGCAGTCAATAACAACGTGCTGACCACAGGGTTCGACTTCCCTGCCATCGACCTGATCTTGTGTCTGCGCCCGACAGCTTCGGCGGTGCTGTGGGTGCAGATGCTAGGACGAGGAACGCGCCCAAGCCCTTGGACAGGGAAAGAGAATTGCCTGGTGCTTGACTTCGCGAACAACACACGCAGGCTCGGACCGATCAATGATCCTGTGGTTCCTCGTCGTAAGGGTGAGAAGGGTGGAGACGCACCCGTCAAGGAATGCCCGTGCTGCCGCACATGGGTTCATGCCAGCCTGCGCTGGTGTAATGGACTGATGCCCGACGGTTCGAACTGCACTTACGAATTCAAGTTCCAGACCAAGCTGAAGCAGGGCGCCAGCACCGCGGAGCTGATCAAGGGTGACATGCCCGTCGTTGAAGTGTTCAAGGTGGATCACATCACCTATATCGAGCACAAGAAGGACGGCAGGCCTCCAATGATGAAGGCCACCTACTATTGCGGGTATCGGATGTTCGAAGAGTTCGTCTGTGTCGAACATACGAACTATGCAGGCAAGAAGGCGCGCGACTGGTGGCGTGCGCGTAGCGACGAGCCTATGCCCAGCACTACGGCGGAGGCGCTGGAGCGTGCTGACAGGGTACGCACGCCAACGCACCTGAGAGTCTGGATCAACAAGAAGTATCCGGAAATCCTTGCGACGTGCTTTGATGGCACCGCGTTCGGCACTCAGGAAGCAAGTGACGGTGACGAAGGCCCCAGCGTGCAGACGCACCACAGCGCACCGCTTGAGGATCAACGTGCAAGCGAACCGACCAGCTATGCGGATCTGGACGATGATATTCCGTTCTAATCGATTTTTGGATGCCGATAAAAATCTTTTTTACGGGCAAGCCTGAAAAAGGGCTTGCATCTTTGTCCAGTTCGTCTATAGTACGATTCATGGATGCAGCGGTGCATCAAACAACGGTCGCAAGACCATCAACCTCTAGGAGCTTAAAATGATCAACTTCAACGAAATGGGCAAAGTGGAACTCCGTCAGGCTTGCAAAGAAGCTGGCATCAAGAACTATGGCAAGATGAATAATGACGGCATGCGTGCCGCGCTGGAAGCGCACTACGCAGAGGCCAAGGGTGCGGAAGAAGCTGCGCCGGAAGCTGTGGTCACCGAGGAAGTGCAGGAAGAAGCACCTGTCAGCGCCCCGAGCGGTTTGGCGACACTGGTTCAACAGATGATCGGTGCCAACGAGAAGAAGGAAGAGGAGCGCAGCGCTCCCGCCGCTGCCAAGCGCACCAGCAGCGGCCTCAAGATTGAGAAGGCACGCGAAGAACGCAACGGCATCAAGAAGCCCTCCGTGGGCGGTCAGTGCCGCGCTGTGTGGGACGCGCTGGACGACATGGTGGCAGCAGGCACCCAGCCCACCGCCAAGCAAGTGAAAGCGTTGGCGGAAGAACGCGGCTGGAATCCGAACAATGCGTCCATCGAGTTCTACCAGTGGCGCAAGTTCAACGGCATCCGCGGCCGTCAGTAATAACAGCAACGAGGGGCGAAAGCCCCTCCGGAGGCATGTCATGATTCGGTTTCTGTTAGTGCTTGCAGCCATTATCCTTGTGCTCTATCTGATCTTCTCCGAGGTGTTCGCTACCGCTGAGCGCTTCAAGCACAAGGCAGAATGCCGACAGCCGCTTGCGGCATACATGCACGGAGGGGCGCCCTTCAGATGTGAGGTGAAAGATGTACGTTAGTCTCGACATGCAGAACATGAGGATCGTCCATAAGCATTCGTCCGTGAATGCGGTGTGCGGCCTGGTGCATATTGAACTCCCCGACGTCGCAGTGAATGTCTGTCCGATCGACATGACAGTCAAGCACAGGACCGACATGGAGATCAAGATGCTCTTCCGATCGTGCTTCCCAGGGCAAGCTGACCACATGCCCGTCGCGGAGATGAAGTCCAAGATCCTCCAGTTCGCTGAGGAGTTTCCGGTCACAGACTTGGACGAGCTTGAAGTCAAGCGCCAAGCTGACAGCATTCGGGATGGCGACAAGAAGGCCTACAAGTATGTGAAGGGTTCGTTTCGTGCGTCTCGACCTGCTGAGCTGTTTGCCGACGCTACGGGCGACGCTGCGCGTGCTAGTGCTACCGTACCGGCCAGCAGTGCTGCGCGGCCTGTGCGGCCCGCTGCCGCCCCGCGCGCTGCAACTGGTTCCCCAAGGGCCAGCGGTGTGCGCGAGAAGATCTGGGCAGTCGCTGACCGCATGTGGGAGGAAGCTGGAAAACCGATCGAAAAGAGCACAGTCCTGGCGCTGCGCAAGGATATCATGAACGCTTTGGAGCAGGATGGGGTGAAGCGCACCAGTAGCTCCAATGAGTTGGGCAACTGGCAGAAAGCGAGGATCACGTAAGATATCCGATTTGCCCGCTTGCACTCATGCTCCCGGAGTGTTACATTGCAATCCCGTCCATCAACGGACTTTATTCACTTTCACTGGAGAAAGACCATGACCGAGAAGACCGCCGAACAGATCGCTGCCGAG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In another aspect, the invention provides an LPS-TLTL bacteriophagetargeting Pseudomonas aeruginosa. In certain embodiments, LPS-TLTL bindsa molecule of LPS (core). In certain embodiments, the LPS-TLTLbacteriophage has a genome comprising a nucleic acid sequence comprisingSEQ ID NO: 4.

LPS-TLTL  (SEQ ID NO: 4)TGGTCACCAATCGGCGGGTTATCCTGAGAGTTAGTTAGACCCTAGAGACTCGGTTGTTGAATGGTCACAGCAAACTATCGAGCCATTCCCAATGCCTGCCCTACCAGGGGCTTGTATCTCAACCCCATCAGATGGCAGGGACGTGCCTATGTTAGTAGCAAGGCGGCATCCAGTGGTCCGTCTGTATTTACGTGGTGGACCAATCCTATCGTAGGTACAGCTTTGTAGTTGGAAGGCTGCGACAAGGCGCCCTATCTACACCGCCCCGGACCATCACGTCCGCTTACTGTCGAGGCTACGCTAATCCCGAAGTCATGCGTTATGCCGTTGACTTGGGGGGCCATCTTACCCTTCCCTATCCCTTGTCAACCCCCGATGCCTGCCGGTCTTATACTTGGGTGACAAGGCATTCCCCTTGGTGGCAGCCCCGTTAGTGTCCGTAGACTCGGGGATGAGTGGCCCCTACGTGGAACGTGGTAGCCGATAGGCCAGGTTCCTGGGGTTGTCAAGCTAGGGAGTTTCCCGTTGCCCTATCGAGGACACCTACATAGAAACGGCGCCATTAGGCCATATTCTTTGGGGTTGTCTACTGGTTTTCATACAGTCTTAAGGACTATCGGTCCCCAGCAAACCCCCGGATATAGACAGTCTTTGATTAACATAGGGTATCGTGGGATGTCAATAGGGGATCAAGGGGTTATCAAGGGATATTCCCCGATCCACCCCTGAATACCCTAAGATTTTTCTTATGAATACCCTAGGGTCTATCCGATGAACGGTAGCTCAGGGGTTGACCCTGGACTAACCTTATGGTATCCCTAGGGAGGCTAGGAGGCTATACCCTGAGGATAGGCCACCCCACTGTCTGGGGGGACTCCCTGGGGGGATATTCCCCAGATACACCGGAGGGATAAAATAGACCTTTGGGGTATCCCCGGTTATAGGCCCTGGATCCAAAGGCAACCCCGATACCTGTTGGTATATTACTGGATAAAGGGCAATAGGCCAGGACATAGCAAACAGAGGTAGTCTAGGGTATACCTATGGAACAACCTCAGGGAGTACCTATAGAACCTGGATCAAGGGAACCCTATGCCATCACTTACCCCTTACCAGCAACCTACGAAGGGTAGTCTTAGGGTATATCTATAGAACCCTATCATACCGTTCGTCGGGTAAATCATGTGATTATCAAAGAAATATCAAAAAAGTACTTGACAAGGTATCGAAATGGGGTATAATAGACCCATAGGCTCTTAAGATCTTTCTTCCTTTGACTTACCTCTTACTAAGAAGGTTACCTTAAGGTTATCTTAAGATAGTCTTAGCGAACTCTTCCATTCCAGCAAAACCCCTATCAAATCCGGGTCTTGCGACCAAAAATAAAAAAAAAGATGAAAATTTGACAAAATAGAAAAAAGTGTGATATAATAGTATTATAAGGTTGGAGAAATTAACCTTAAGGGTGCTTTAGAATTAATTGGGATGTAGCTCAGTTGGTAGAGCAGGGAGCCGATAACTCTCAGGTCGTAGGTTCGAGCCCTACCGTCCCAACCATTATGGCCCATTAACTCAGCGGTTAGAGTGCCTCCCCTGTCTAGGGAGAAGCCGTCGGTTCGAATCCGACATGGGTCGCCATTAACTCCTCGTAGCTCAGTTGGTTAGAGTGCCTGTCTTGGACACAGGAGGTCGTAGGTTCGAGTCCTACCGGGTGACCATTTAGAGAGATCGGAGCAGTGTATGTCAGACGAAAAGGTTGTCTCGATTAGCTGCCCTTTCTGCTAAAGAAAAGCTAGACCTCTATTGTGAGGCTCTGGCAGATGGCAGGGCGAATAAAACCCAAGCGTATAGCCGCTGGGTTCTCCTAATCACGCTCAACGCAACGTTGCTGCATACCATCGAAAGCATGCCGAATACATCAACGCCTTTATCTCTGAGCGCATCGGGAGTCATGTCCCCATGGCGCTTCGTGTGGTTGTAGAGATTGCTAGCAACCCAGAAGAGAAAGGTGGATTCTCAAGGCAGCCCAGGATATCCTGACCGTGGAGGCTTCTGGAGCTAAGCAGAAACTGAGCTACTACTAAGAATGGGGAAGATATGTCCGCAGAGGATCTAATCAGTGAAGTTCGACGAATTCCTCGACGAAGAGCCAGAGTTGGCTAAAGTCATTTCTTTTCCCAACCTTAAGTACCTTTGATCTAATCAAGCGAAGAGAGGGGTTGGTTCTAGCGGGTACAAAGACTCTCGGGAAGATAATCCGGCGGTTATGGCCACTTGCAACTCCCTGGGAAGACGGACCGATTAATTCTAGCACGAGCAGAGACTTGGCTAGAGAAAGATAGTAAGGCAGCCTATGATGCAAGCCTCCGCTAGTATTATCTCAGCTGCCTTTTTTGCACTCCAGAGCTATTCGATGCCCTCTAGTTAGCGTCAACTTCCAGCTGGGTACAGCGTGGACGAAGAAGTTCCCCGGGCGACGTGGAGCCTTCTGAGCCGGGAGTTCGACAGAGCAGCTTGGGAGGCCGAGGATAGTGCCTGGGCTAAACAGAAACCCAGTGCGCGTAAGGGACCCTCCAACGGCCCCTGTGGCGTGCATCAACAGTAGGTGGTTGGCGGTGGTCTAATGGATACCCAAGAGCGGCTACGGAATCTAGTCAGGGAGCGGCTGAGCGGCAGAAGTATTCGCATGAACCAGTATAATTCTTATGGGTGGCAAGAGAAGTTTATCGCAGCCTCGAACTGCGCCCAGTTGCCGGCTATGACTGGTAACCGCTGTGGTAAAACCTACACCGGGCCTTTATCATGGCTCGCCACCTCACCGGTCGCCACCCCGGAGTGGTGGACTGGTAGAGTATGCATCGTCCAGTGAACTGGCGGGGATCTCCACGGATACCACTCGGGATATTCTTCAGTCCGAACTACTAGGTGACTGGAACCCTGAGGCTTTCGGAACGGGGATGATCCCCAAGGAAGATATCGTAGAGACGATTCGTAGGGAAGGTAAACCCGGATGTGTGCAAGCAGTAGTTGTTAAGCATGCCTCCGGGGCCTCTCGTCCCTTATCTTCAAGTCCTACGAAATGTCCCAGGACAAATTCATGGGTACTGCCATCGACGTTATCTGGCTCGATGAGGAATGCCCCAAAGATATTTATACCCAGTGTGTAACCCGAACGGCTACTACTGGGGTATTGTATATCTGACGTTTACCCCAGAGCATGGCCTCACGGAGATCGTGAAGGACTTCCTCCAGGATCTTAAACCTGGTCAGTTCCTTGTCCATGCAAGCTGGGAAGACGCCCCACACCTCAGTCCAGAAGTTAAAGAGCAGCTACTCGGTATACCTCCAGCAGAACGCAGGATGAGGGCCGAGGGTGTTCCTATGCTCGGATCTGGTGTAGTCTTCCCCATTCTGGAAGAGAAGTTTGTATGTGAGCCTTCCAGATCCCCGATCACTTCCACAGGATCATCGGTATCGACCTTGGGTTTGACCACCCTAACGCTATCGCCTGTGTTGCTTGGGACCCTGAGAAAGACAAGTATTACCTCTATGATGAGAGGAGTGAGAGTGGTGAGACCCTTGGGATGCACGCTGATGCTATCTACCTGAAGGGTGGTCACCAGATCCCGGTAGTTGTCCCCACGATGCCTTTAAGCACGATGGAGCAACCTCTGGTCGTAGATTCGTAGACCTTCTTAAAGATGACCACAACCTCAATGTAGTGTATGAGCCCTTCAGTAACCCACCGGGTCCTGATGGTAAACACGGGGTAACTCTGTAGAGTTCGGCGTTAACTGGATGTTGACCCGTATGGAGAATGGTGATCTGAAGGTGTTTAATACGTGTACGAACTTCCTAAAAGAAATGAAAATGTACCACCGAAAGGACGGAAAGATTATCGACAGAAACGACGATATGATCTCCGCTACCCGGTATGCCCTGTTGATGGCTTCCCGGCATGCACGTCCTGGTGCTGTACGAAACAGTGGATACTACAGGAGTGATACTGCAAAGTTGACCCCTGATTGGTTTGGGAGTATTGTCTAATGGCTAAGCGTCGTCGCAAGATTAAGCCTATGGATGATGAACAGGTACTTCGTCATCTAGACCAACTTGTTAACGACGCCCTTGATTTCAACTCTTCGGAACTTTCAAGCAGCGTTCTGAGGCCCTGAAGTATTACTTCGGAGAGCCCTTCGGTAACGAGCGCCCTGGGAAGTCCGCGATTGTATCTAGGGACGTTCAAGAGACTGTAGACTGGATTATGCCTTCTTATGAAGGTATTCACGTCAGGCGGTCAAGTAGTTAAGTATGAACCTCAGACTGCCGAAGATGTTGAACAGGCAGAGCAAGAGACTGAGTATGTGAACTACCTCTTCATGCGTAAGAACGAGGGGTTCAAGGTAATGTTCGACTGGTTCCAAGACACTCTGATGATGAAGACCGGTGTTGTAAAGGTCTATGTAGAAGAGGTCCTGAACCCTACCTTCGAACGATTCTCTGGTCTCTGAGGAAATGGTAGCGGATATCCTGGCTGATCCAGACACTGAGATTCTAGCACAGAGTGTGGACGAGGATGGAACCTACAGTATTAAAATTCGCAAGGACAAGAAGAAGCGAGAGATTAAAGTCACCTGTATCAAGCCTGAGAACTTCCTGGTTGATCGGTTGGCTACCTGCATTGATGATGCACGCTTCCTCTGTCACCGTGAGAAGTATACCGTAAGTGACCTGAGGCTCTTGGGTGTTCCCGAGGATGTACTAGATGAGCTTCCATACGATGAGTATGAATTCTCTGATAGTCAGCCAGAAAGGTTGGTACGTGATAACTTCGATATGACTGGCCAACTCCAGTACAACTCTGGGGATGATGCTGAAGCCAACCGTGAGGTATGGGCCTCTGAGTGCTACACCCTTCTGGACGTAGATGGGGATGGTATCTCTGAGTTGCGCCGTATCCTGTATGTGGGCGACTACATCATCAGC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In another aspect, the invention provides an TIVP-27 bacteriophagetargeting Pseudomonas aeruginosa. In certain embodiments, TIVP-27 bindsa molecule of type IV pilus. In certain embodiments, the TIVP-27bacteriophage has a genome comprising a nucleic acid sequence comprisingSEQ ID NO: 5.

TIVP-27 (SEQ ID NO: 5)CAGCCGCTCTCATTTTGCAATGAGAATTCGTACAGTTCATCATGCGCCTCCTTGAAAGTGATTTCTACTTTCGGTATGCGGATGCATGCTATATACTTGTATAGCCCGCTATCCCGTTTTGCATGGCACACGAATTGCATAAGCATGACAAGGGTAACCTCGAAAGCGGAGCTTTCAAAGTGGTCTGTGAAGTGGTGGCTCTACCTCTATTATAGTATTTGCGGACCGGAAGTAGTGACACTGAAAACATTGACTCTGCAGCTCCAGTAAATACGTTAAATCGAAAGGCTGATAGCTGCCGCTATCGAGTAACCAACATTCACAATAAGGAGTGCAATGAATGACAAGCAAACAATCATGCCAAGATCCATTACGCTAAGCAAATCTACTACGCCATAAAACGTCATCGCAGGTATGATGAGATATGCAAGGAATGGGTCACACAGGCTTTGAAGCGTTCTATGATTGGCGGTGAATGTCAGGGCACGCTACCGCCTAGATAAGAATATCCTCTTCCCGGGAACAAGCCTATTCGCATACGTGCGAGTTCACGCTCACATGCATACACTCTTCACCAACTGTGACAAGACAGCGAATAACCGTGCCAATACGTGGGATAGTTATATCCCTTAGGCGTCCTGCCTAGCACGCTATGACAAGTACGGGATGCTACACGTTGCTCAGTGGTGACACTTTGAAAGAAGTCTACCCTGATCGTTCGACGATCCGATGTGTTTTCCATGGCATGGCAACATGCCGCCATTAGCAGCCATCCGCGAATGGCTGATCTCTATCGATGGAGGATGTCTTCACAGTGTGAACGTTGTTCGCTGCTGTTGGAGAGAGCGGGATGACTTGGCGCGACATTGCACAGGGAAGAGAGACAACCCTTTGCAACAACATTTGATAAGTCGATGGTCAACCCTTCGAGAGTGCGAGAACTTTGTGTGGAACTCCGATAGCGAAGCTTAATAAACGTATATGCATATTCCATGCCAACATGTGGAAAGATTTCCCCACCCGGTGGGCGGGAGCCCGTTGGCATTAGTTTGTATAGCTTTAGCTGTCGCAGCGGAAAGACCACGGCCAAATTCATTATGGAATTTATTAGGTTAGAGAGACAGGGTTCGTGGTTAAGCAGCTCCGGAAATAGAACCACAACTCCCGAACAGGATACACTCGGACGTAGGCCACACTACATCACTATTTTCTCCCAGCCAGAGTAAACGCACCTTCAAGCGGTCATTATTTCTGGAGTGGGGATTTCGTCGTGTGATACAATAGCAGCTTCCGCTTGGTAATAGGAGAATGGCCAATGCAAATCTATAGGATTGGTATTGGGAATAAGCCGGACAACAGCTGTAGACCGTAATCCGTAGATTCGCTGCCCGGGCTTTTGTCTCTACTGATTGTATTCCATGTCCCTGCTTCCAAGCATCCCTGCATAACCTTGCATACTCTTCGTTAATCTGGTCCATGTACTGCAACGCTCGTTCTGCTCTACCGACTGAACCCGTTGTGACGGAGAATCTTGGTTCAAATTTCATCATCCCAGAAGTCTCTGACCAAGCTTCCCAAGCCACTGCTTTTCAGACTCTTTATGCAATCTCGATAGGCTGATGTTCAATATTGCTCAGACATTAGACCCTCCCGAACGTTACGATCACGCCTTTGCTTTATTAGGGTTGCTTGTAGCTCATCCAGGAGAGGGGCTTACTGCCCACGATGATGATACTTATCTGCCTCTCTAGAGTCATCACACACTTAGTCTGAAGGTAGGCCTATACAAGGCGTACATATCGGGTTGCCACTTCGCTTCGCAGGCCTGTTCCAGAAGCTAATGAACCGTCTTCGAATGATCCCGATGTACAGGCACCGGGGACTATCGTCTGGCCCATCTACGGAGATAGGGTGTTCCATCCACTCCCCTGATCTTATCAACGACGCCCTTCCTACTTCCTTCAATTGAGCGTACTGGTTAAAACGGGTTAACGCACCAAACTGTTCGGCAAGCGGAAATGTTTATCGATCTCTTTAGTTTTCATTCTCTTCCTCCATGCTCCGCAATGATTTTCAACGCTTGAAGCGTGTAGGTTACGAAGCTCTGTGTAGACCAGTGTCACACTCATGAAGCGTGTACGCGGTCACTTTCTTCAGTGACGAAATGGAAGTCTACCCCTTCGAAGTCGTAGGTCGATTTCGAGTATCCAATGGCCTTTGAGTTCTTTTCCTCCGTACCACAGGAATGTCATTGGACTTCCGTCGCTTTTACGAGTGTGTAGTCCAGCAGATTATCTCCAACCCACAGTAGCACTTTTGAGCCTTGTCGTACATGAAGCCGTTTCCGCCCCAACCGATACCATAAGCCTTAAGAGGTGCTGTTGTATCGCAATGTTCTCTTCGTGGGGGGTCTTCTAACAATAGTGTAAACTTCACCAAACGCTCTTTCACCCTCTCTCATTCCTCCTGTTCGTGCTTTATGGGAGTGTAAACGTTCCCAGTCACTGTCAAGTTTCTGGGGATAGACCCAGACGCTTCAGCTTTTTAGAATGATATCCCACTCATCGCCTTCTTGGACCTTCTACATACTTTCCATCATCAACGCACGGTCAATCAGACCAGCCTTGTAGTTATCCCGGCTACGCTTATACAACAGCTTGTCGATGTAGTCCTTCTTATCTGCCAAAGCGATAGCCTTCCTGGCCATATACAGCGTATTCTTCCGAAGTCATCCACGGCATATTGGTCAGTACGAGGTCAGCGGCGTCCCCTGACCAAGGGGATATTCCTCCATAGAACTTTACCGGTATCAGGTTCGATTCGCAGCTCTCCACTGTAGCACTGTTCCGGTCTTAGAATTGGTAATATGCACCTTCTCATCGATACGGTGGGCCATCATCGAAAATTCCACGTTGCGGCTCCATGATCCATCGCTTCCAGTCGAAGAATGTAGCACAAATAGCTTTCCAACTGGCTCCGACCTGCAACCGTCTTCTTCAGACGTTAATCTGCTTAGCGTTTATATACTTTACAGGCCGGGAGGTCGGATCATAGCACCTCTTACCTGGAACCTCAGCCCGAGACCCCAACAACACTTAGGCTCATCGTTACTTTTCCTCTCGAACCATGCGAACAGCTTCTAAAACATATCCAGTCCTCCTTCCTGTGATACAATTTAAATAGTCTCCACACTTTTCTAGGAGATTAACGAGGAATAGCATATTCATAAACGGTACGGCGATAGGCCATCATTCCAGCCAACCACCGCTTCGGGCCTCTTCTACGCTCTCGGTAATTTTCCCTCCACCCAAGAAGGGGGCGTAGAGATTCCCATACGAACATCCCTATCACAGAGTAGAACAATAGGCAGACCACTCCGGACGACTATGCATGGCGAGAATGAGAAGCCCCACGGTCTCCATGGTGCGGATCCCTCTCTTTAAGTAGTTTACGGCTGTTCCAGATAGACAGAGCCCACTTAGGTAACAACACCACTTTCAAAACGCGCTGCTGTATGTTGCGTAGAGTAGTGCAGTTAGCACACTGCGTATGTATTAGGCCATAGCAGTCCCAGTACAATGGCAAAAGCCCGATACCCTCTCTGTGATCTTTTAGTCGCACTAGCTGGGAAGTTATCTTTGAAATACTCCGTGATACCCATGTAGGTCCATTACGAATAATTTCACGCGAGCGAGAGGACGAATAGCATTGGGATTATTCCATTACCCTCCTTTCGAATAAGTCGAAGTAGGCTCACGTAGAAGTTGCACCACGCCCCGCCTATGGCCCAGCCTTCCAATAGTCTTCCCCTGAAACCTTGTTCGGAGGGTTATTCTCGAACATGGATAACACGCATGAATCAGCTACTTCGTCCAAGAGGTGCATTACCGAGTTAAGCGGCCCGATTCCAAAGGTCTTATCTAGCCACCCCTTAAATCAACCGCACGTCTGGAGACGGTGACGCTGGAGTCACTGGCACAGCGCCAATCTTCCGAATGTAGCACACATGTATGGTTCCTCGTTCTCGAAGAATGCCCGCATGCCCTCCTTGATTAGAGGTGCAATAGAATTAGAGTTCATTGTTTTTCCTTCCTTTGAGCCCCACTAGGCTCTAAATTTTTTGGTTCGACCTGTCAACACATCACAACCCAGTTGTACAGGTCAGCCTCGTAAGCCGATGGCAGCGATTAATTCAAGAAGAACGCATATCAATAGCTGCGTATTTGGTTGCGAAGCTGTTGATGTACGTTATAAACCCGTTGTCGCCCCGGCTAAACAGGGCGTATTCCCTCAGTCCCATCCTTGAACGTATCTAACGCGATAATATACTTGTCGAAGATCACTGCGGCTTCCTCCCGGCTGATGTAGTAATTGTATTCGTCCTCTTGACGAGGAACGCACGATAGAAGCCTTTCAAAGTTCCCCTTGACCAGCACCAGATTGCTCCTCCACCTTGCATGTATAGATATACATGGTGTTTGCTACTGGATAACAGGATCATCCCTGGGACGAACATCCAGAGCAGAGCATAGCCTCCATTGGCATGCTTAATAAGTGTGCAACTACAGCGAGCAGTATTCTGCATCGCGGCCAGAACCCAGACAGCAGGAGCGACCGGCACGAATGCAGGGCGAGTGTAAAACGCAATAGCTACGAGTTTCTTGGAAATTCGGCTCACCCTCCTTCTTGGTTCGTCTGGGGAACATCCGGCTCAGTAGACGAATGTCTTGGATACTTCATGCATTCTTAGCTCATCTTTTGCAGAACCCGTCAATCAATTCTCATGTGCGAATTCCGCAGCCTTGTAGTAGCGATTAGCTTCCGTCTTGCCTCCACTCCGGAAGGAGGTGGCTGCCCAGCTGCTGATATTACGCGACTCTTGCAAAATTGTCAAGAGCTTTTGCAGAGAGGGATTGACCTTCGTCAGGTCTGTACCAATCAAGTCTACACCTTGAGAACGTCAGTCCACCCACAGAGGGTAGCTCC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In another aspect, the invention provides an SFA1-1 bacteriophagetargeting a Shigella spp. Bacteria. In certain embodiments, SFA1-1 bindsa molecule of OmpA. In certain embodiments, the SFA1-1 bacteriophage hasa genome comprising a nucleic acid sequence comprising SEQ ID NO: 6.

SFA1-1 (SEQ ID NO: 6)GTACTATATCAATATCAACTACTGATACAGAAAACAACTTGGAGAATAAAATGGAAAACTTAATTATCATCGAGCAATCTTTCAACGATTATGGTATGGCTTACGGTTATCGTGCGATAATGGAAGATTCTCGTGGATGTGTTATCGATATTGCTGAATGTAAAGATTTACTGCAGCTTTTGAAGATTGTTCGTAAAAATTGGGATTGTGAAAATATTAAAGTTCGAGTTGTTACAGAAGAAGAAACTGTTTTTCATGATGTAAAATTCGCCAAAGGTGCTGCTACTCTTCTGAAACGTATCGCTCCACTGTTCAATTAATGAGGAAATTGTAATGAAACGTAAAATTGTTCAGAATTGCACTAATGACGAATTTGAAGATGTATTATTTGATCCAAATTTGGTAGTAGTTCAAAAGGAACATACTAGCAAGTTTACTCACTTAACTTCGGTTTATGTGTATGAGAAAGTCGGTGATAAACAGCCAATTTACGGTGTATTTCGTGAAATTACTGAAGACGGCACAACTTACTGGAAGGAAATTTATTAATGGCTATTAAATTTGAAGTTAATAAATGGTATCAATTTAAAAATAAATAAGCTCAAGAAAATTTTATTAAAGACCATACTGATAACGGAATCTATGCGCGACGTTTAGGTATGTATCCTTTTAAAATTTTAGATGTGGATGCTCTTGGGCGTCCTATTAAAATTTTGTCATCTACTGGAAATTTAGTACTATCTTCTGGTAAAGATGTTTTGGATGAAGACTTTATTTGGCTTTCAAAAAGTGAAGCTGGGTTCTTTGATGAAGTGGAAAATCCATATCAGGCAGCTGAAGAGCAAGAGCAGGAAGAGCAAGAACAAATAGAAGATTTCACAGAATTCCCGGTAATGAAAGTTACTATTGAAAATGATGAACAGGCATGGTCCTTGTATCAGATGTTGAAAGCTCACTTTAAGGAATAATTATGCCGCTTTATGATTATAAATGTCAATCCAAAGACTGCACAAAAGAATACGAAAAAATCAAGAAAATTTCTGAAAGGGATACTGATGTATGTCCTGATTGTCATCGGATTGCTATTCGGTTAGTTTCCGCTCCTAAGCATGTGAATGGTGGTTTTTACGACTTACTTAAAGGGTGATTATGTTTAAAATCGGTAAGAAATATCGTATTCGCGAAGGTGAAGAACAGAAATTTCTACTTTCTGCTAGTAATAGGAATAGTTCTATTAATGTTGTAATATTGACAAACGAATTTATCGTTGAAGATATGAAAGGTCATAATGTTACAATGATTGGTACAGCATCTGGAAATGCTGGAAAAACTCTTCATAGTCTGCAAAGTAGTGTTCTAATTTATGATGAAGAATTTGACTTTTTCGAAGAAGTCACAGAAGATTTTGATTTTGAATGCACTATTACTATGAAATCTGGCGACCCTCTTTCCTTTACAGTTAAAGATGAAAGAAGCCGCTTGAGAGTTATTAGTCTTCTTCAAGCCATTAAATTTGAGTGAAATTATGAAATATGTTAATCGTTCTATCGCAGCATTAGTATTAGCAGTGTCTTTAATAGGATGTACTGATGCTGATAATGCAACCAAAGTTTTGTCTTCAAGTGGTTTTACTAATATTGAAATCACTGGATATAATTGGTTCGGTTGCTCTGAAAATGATTTCCAGCATACTGGATTTCGTGCTATTGGACCTACTGGGCAGAAAGTAGAAGGAACAGTATGTTCTGGACTATTCTTCAAGGATTCGACTATTCGTTTTAAATAAAAGGCCTTCGGGCCTTTAGCTTTATGATTACCGGAGTATAATATTCCCGAAACCAAACGAGGATAAGTGATGATTAAGAATGAAATTAAAATTCTGAGCGATATTGAACATATCAAAAAGCGTAGCGGCATGTATATTGGCTCTTCTGCTAATGAAATGCATGAGCGCTTTCTGTTTGGTAAATGGGAAAGTGTTCAGTATGTACCTGGTCTTGTTAAGCTTATTGATGAAATTATCGATAACTCAGTAGATGAAGGTATTCGTACTAAGTTTAAATTCGCAAATAAAATTAATGTTACTATTAAAAACAATCAAGTAACAGTTGAAGATAACGGTCGCGGTATTCCACAAGCGATGGTCAAAACACCTACTGGTGAAGAAATTCCTGGTCCTGTTGCTGCCTGGACTATTCCAAAAGCAGGTGGTAACTTCGGTGATGATAAAGAACGCGTCACTGGCGGTATGAATGGTGTTGGTTCTAGTTTGACAAACATTTTTTCTGTGATGTTTGTCGGTGAAACTGGTGATGGTCAAAATAATATTGTAGTTCGTTGTTCAAATGGCATGGAAAATAAATCATGGGAAACTATTCCTGGAAAATGGAAAGGAACTCGTGTTACTTTCATTCCTGATTTTATGTCATTTGAAACTAATGAGCTGTCCCAAGTTTATCTTGACATTACACTAGATCGTCTCCAGACACTTGCAGTAGTTTATCCTGATATTCAATTTACCTTTAATGGTAAAAAGGTTCAGGGCAATTTTAAGAAATATGCACGCCAATATGATGAGCATGCTATCGTTCAAGAACAAGAAAATTGCTCTATTGCGGTTGGTCGTTCACCGGATGGTTTTCGTCAATTAACTTATGTGAATAACATTCACACTAAGAATGGTGGCCATCACATTGACTGTGTTATGGATGATATTTGTGAAGACCTTATTCCACAAATCAAACGTAAGTTCAAAATTGATGTGACTAAAGCACGCGTTAAAGAATGTTTGACTATCGTTATGTTTGTCCGTGATATGAAAAACATGCGATTTGATTCTCAAACTAAAGAGCGTTTGACTTCTCCATTTGGTGAAATCCGTAGTCATATTCAACTTGATGCTAAAAAGATTTCACGTGCTATTCTAAATAATGAAGCAATTCTAATGCCGATTATTGAAGCTGCTTTGGCTCGTAAATTGGCAGCAGAAAAAGCAGCTGAAACTAAAGCAGCTAAAAAGGCTTCTAAAGCTAAGGTTCATAAACATATTAAAGCGAATCTTTGCGGTAAAGATGCTGACACTACATTGTTCTTGACTGAGGGTGATTCAGCTATCGGATATCTTATTGATGTTCGCGATAAAGAACTTCATGGTGGTTATCCATTGCGCGGTAAAGTTCTTAATAGCTGGGGTATGTCATATGCTGATATGCTTAAAAACAAAGAACTATTTGATATTTGCGCAATCACTGGATTAGTTCTCGGTGAAAAAGCTGAAAACTTGAATTATCATAATATTGCTATTATGACTGATGCTGACCATGATGGTTTAGGAAGCATTTATCCTTCTCTGCTCGGATTTTTTAGTAATTGGCCAGAATTGTTTGAGCAAGGACGAATTCGCTTTGTCAAAACTCCTGTAATCATCGCACAGATTGGTAAAAAACAAGAATGGTTTTATACAGTCGCTGAATATGAGAGTGCTAAAGATGCTCTACCTAAACATAGCATCCGTTATATTAAAGGACTTGGCTCTTTGGAAAAATCTGAATATCGTGAGATGATTCAAAATCCAGTATATGATGTTGTTAAACTTCCTGAGAACTGGAAAGAGCTTTTTGAAATGCTCATGGGAGATAATGCTGACCTTCGTAAAGAATGGATGAGCCAGTAGTTTACTTTACCACAAGGATGTGGTATAATTAATTGGGCAAATGAGGATATTGAAATGAAATCATATAAAGTAAATTTAGAACTTTTTGATAAAGCAGTTCATCGAGAATATAGAATCATTCAACGCTTTTTCGATATGGGAGAAGCCGAAGAATTTAAAAACCGCTTTAAAGATATTAGAGATAAAATTCAATCCGACACTGCAACTAAAGATGAATTACTAGAAGTTGCTGAAGTTATTAAGCGTAATATGAATTAATGAGGAAATTATGATTATCACCACTGAAAAAGAAACAATTCTTGGCAATGGTTCTAAATCAAAAGCATTTAGCATCACAGCATCTCCTAAAGTATTTAAAATTCTGTCATCTGATTTGTATACAAACAAGATTCGTGCAGTAGTCCGTGAATTAATTACTAATATGATTGATGCCCATGCACTTAATGGAAATCCTGAAAAATTTATCATACAAGTTCCAGGACGATTAGATCCGCGATTTGTTTGTCGAGATTTTGGTCCGGGTATGAGTGATTTTGATATTCAGGGTGATGATAATTCTCCTGGGTTATATAATTCATACTTCAGTTCATCTAAGGCTGAATCTAATGACTTTATTGGCGGGTTTGGTTTAGGTTCTAAATCTCCGTTTAGTTATACTGATACATTTAGTATTACTTCGTATCATAAAGGTGAAATTCGTGGTTATGTAGCTTACATGGATGGTGATGGTCCACAGATTAAACCTACATTCGTAAAAGAAATGGGTCCAGATGATAAAACTGGTATTGAAATCGTAGTTCCAGTTGAAGAAAAAGACTTTAGAAACTTTGCTTATGAAGTTTCTTATATCATGCGACCATTCAAAGATTTGGCTATCATTAATGGTCTTGACCGCGAAATTGATTATTTTCCGGATTTTGATGACTATTACGGTGTAAATCCAGAAAGATACTGGCCTGATCGTGGTGGATTATATGCTATCTATGGCGGTATTGTTTATCCTATCGATGGTGTTATTAGAGACCGTAACTGGCTAAGCATTCGCAATGAAGTGAATTACATTAAGTTTCCAATGGGTTCACTTGATATTGCTCCATCTCGCGAGGCTCTTTCACTGGATGATCGTACTCGTAAAAATATTATTGAACGAGTTAAAGAACTCAGTGAGAAAGCATTTAATGAAGATGTAAAACGATTTAAAGAATCCACATCTCCCCGTCATACATATCGTGAATTGATGAAGATGGGGTATTCTGCTCGAGATTATATGATTAGTAATTCAGTCAAATTCACGACTAAAAATCTGTCATATA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In another aspect, the invention provides an SF60B bacteriophagetargeting a Shigella spp. bacteria. In certain embodiments, SF60B bindsa molecule of OmpC. In certain embodiments, the SF60B bacteriophage hasa genome comprising a nucleic acid sequence comprising SEQ ID NO: 7.

SF60B (SEQ ID NO: 7)AATTTAGCTTTAGCTTCTTTGTTATCATCAAGAGCCTTCAGCTCTGCAATATAATCTTTATCTATCATAATATTTCCTCAGTATAAATATAGATATATTTATTACATGGTATTTAGACATGACTGACATTAAAGTACATTTTTATGATTTTAGTCACGTGAGAATTGATTGTGAAGAAAGTACATTTCATGAACTCCGTGATTTCTTTAGCTTTGAAGCTGATGGGTATCGTTTTAATCCGAAATACAAATATGGCCACTGGGATGGACGAATCCGTCTTTTAGATTATAATCGTCTTCTTCCATTCGGCTTAGTCGGGCAAATTAAAAAATTCTGTGATAACTTTGGCTATAAAGCCTGGATTGACCCACAAATTAACGAAAAAGAAGAATTATCAAGAAAAGATTTTGATGAATGGCTTTCTAAATTAGAAATCTATTCAGGAAATAAAAGAATTGAACCACACTGGTATCAAAAAGATGCAGTGTTCGAAGGATTAGTTAATCGTCGTAGAATTCTTAATCTTCCAACATCCGCCGGTAAATCATTAATTCAAGCTTTGCTTGCGCGATATTATTTGGAAAATTATGAAGGTAAAATTCTTATCATTGTTCCAACAACTGCCTTAACAACTCAGATGGCTGATGACTTTGTTGACTATCGTTTATTCAGTCATGCAATGATAAAGAAAATTGGTGGCGGAGCATCAAAAGATGATAAATATAAAAATGATGCACCAGTCGTTGTTGGTACATGGCAAACTGTAGTAAAACAACCAAAAGAATGGTTCTCACAGTTTGGAATGATGATGAATGATGAATGCCATCTTGCTACAGGAAAAAGTATTTCATCTATTATATCAGGTTTAAATAACTGTATGTTTAAATTTGGTCTATCAGGTTCATTACGTGATGGCAAAGCCAATATCATGCAGTATGTTGGAATGTTTGGTGAAATATTTAAGCCAGTAACGACTTCTAAATTAATGGAAGATGGACAAGTAACTGAGCTAAAAATTAATAGTATTTTTCTTCGCTATCCCGATGAGTTCACTACTAAATTAAAGGGAAAAACTTACCAAGAAGAAATAAAAATTATTACTGGGCTTAGTAAAAGAAATAAATGGATCGCTAAATTAGCTATTAAACTTGCGCAAAAAGATGAAAACGCTTTTGTCATGTTTAAGCATGTATCACATGGTAAAGCTATTTTCGATTTAATTAAAAATGAATACGATAAAGTTTATTACGTATCAGGAGAAGTTGATACTGAAACACGCAACGTAATGAAAACCTTAGCTGAAAATGGTAAAGGAATAATTATAGTAGCTAGTTATGGTGTATTTTCTACTGGCATTTCAGTTAAAAATCTTCATCACGTTGTTTTAGCGCACGGTGTTAAATCTAAAATTATCGTATTGCAAACAATAGGTCGCGTATTACGTAAGCATGGTTCTAAGACAATAGCAACAGTCTGGGACCTCATAGATGATTGTGGCGTTAAGCCAAAATCTGCTAATACGAAAAAGAAATATGTTCATTTGAACTATCTTTTAAAACACGGCATTGATCGTATTCAGCGCTACGCAGATGAAAAATTTAATTACGTAATGAAAACAGTTAATTTATAAGGGCTTCGGCCCTTTGGAGAAAAAGATGTTACTAGAATTTAAACAATTTCTTTATGAAGCTTCTATTGATGAATTTATGGGTAAAATTGCCTCTTGTCAAACATTAGAAGGTTTAGAAGAACTTGAAGCTTATTATAAGAAAAGAGTTAAAGAAACTGAATTAAAAGATACTGATGACATCTCTGTGAGAGATGCTTTGGCAGGAAAAAGAGCTGAATTAGAAGATTCAGACGATGAAGTAGAAGAAAGCTTTTAAATTAAAAAAGGCCCAACCAAAAAGGAAGGGCCAAAACTATAGACTAAAGGTCACACTATAGCAAAAGTTGTGTTTCATTTAATTGTTCTTCCGAACTTTCTGAAACTGGTAGTTCTTTAATGTAATTATAGCAAGGCCCAGGATGTACAGGACCTTTGTCTGTTTCAACAACCAATGCAGAATCGATTGGAGTTTTACAGACAACACAAATCTTATCTGACATGATTGTCTCCTCTGAATTATATATCTATTTATACAACTCTCATATGCATATCAATGCCCATATCTTTAGAATAAAAATATTCATCAAGATATCCGGCAAATTTTCCTTTAATATAAAGGACATCTTCACCACATGGATGATCGGCCAGGATACGAATATCCTGACGCTTAAGATTATGCTTTTTCATTAAGAATTGAATTTCCGTTTCAAATTCTTCTTCATAATTAAAAGCATCATCAATGCTATATCTCATTATTTTCCAGCCTCAAATGCCCGCATGTCTTGAATATGCTTAATAGCAAATCCGCGTGATTTAATAGCATCAAGAGCTCCGCTACAGAAATCTAATAAAATTCCCCAATATTGTAATGAAGTATCAACCTTTAAAACATCCTTATCCGCTGATAGAACTGTCTTCATTTCTGATTTCTCGTAACGATCCATACTAAATTCATCACCATCTCCTCGTCCCGAGTAGTAGTCTAATTTAGCTTTAAGAGCAACTTTTTTCTGTGCATCAATTCTAAGCATTTCCTTTTTAATACTTGAATGCTTATTAAGCCATTTACTATATAACATCACATTATTAGCTGCTTCATACTGTAATTTAGTCGAATCTATAAACACATCTTTCTTCAATTCTTCTTGAAGATCTTCTAATTTCATGTTGTTCTCTATTCAATTGTTATTGGATGGACTTAGATTCATTATACCACGTTTATACGTGAAGCATTATACTCTATTACTGGAAGCCAGCTGCAGTTTTATCTGCTCAATATCATCAGGGTTATCGATGACTGAAAAGCGTATTTCTACTATCAGAGTATAATCATCATAAACTGGTATCACATTAACTGCTAATTTGTCAATACGCGGCTCATAGTTTCTTACTGCGCTTTCAATGTTACGCTCAACCGTGTCAGCAGTAAGAGGAGTCATATTCTCAAAAAGCTGATCAGATAAATCACATCCAAACTCAGGGTCAAACGGTCTTGACCCTTTTCTGGTTGTAATAATTCCCAAAAGACTGTTTTTAATTGACCTTAATCCAAGGGATCTAGAAACATCTTTGTCCCAGTCCATTTTCATTTCTGGGTCAATGTCAGAATAAAGCTTATTAATATTTGCCATTACAATAGCTCAAAGAATTCTTTGAGTCCTCTTATTACATGAGCGTGAGATTTTCCACACTCTGGACATTTAATTGGAACAGCCAAATAAACAGTAGGCTTTAAAAGCATATCTTTTATAGCTACAATATCTGACTCTGTGATGATAGAATATAAATCTTCCAACTCTTTTTCATTTAAGTCTTCAATTGGAATGCTTTCCCCGTTCGCGTGAATCGTTTCTATGCATGATACTATCATATGGGCTATATTTTTATCATCAAAAATTTTGGGGTAATGGAACTTAATTTTAATGTCACCTAGTGTATACCAGAGGTCTTCTGGTGCATCTATTTGTGTATGTAATAGATTTATATGGGTTGGTATTTCAGTTCCACAGGTGCACTTCCAGGAGTTTTCGTGATTAACTTCTCCAAGAGAATGCGCCCATAAATGAATCAGTAATAGTTCTGATTCTTGACGGTTTAAATCTTTTGCATTTGTGCAGTCTTTGATTAGCTTTTTAACAATTTCTTCTACGGAACCGTTATTTTTAGCAGTAATAAGTTCTAGATACTCTTTAAGAGTAAATGCGCGACAATTGATTATTTTAGAACCAACTCTCACGTCAAATTTATATTCATACATATTTAGCTCCTTTATTTATCATATTTATAAATAGAATAAAAGGAGCATCTATGGCAAACATTATTCGTTGTAAATTACCAGATGGTGTTCATCGTTTTAAACCATTTACGGTAGAAGATTATCGAGATTTTTTGTTAGTTCGAAACGATATAGAACATCGGTCACCACAAGAACAAAAAGAAGTAATTGCTGATTTAATTGCTGATTATTTTGGAGACTATCCAAAGACTTGGCAACCATTTATATTTTTGCAGGTATTTGTAGGGTCAATAGGTAAAACTAAAGTACCAGTCACATTTGTATGTCCAAAATGTAAAAAAGAAAAGACAGTTCCATTTGAAATATACCAAAAAGAATTAAAGGAGCCTGTTTTTGATGTAGCTAATGTTAAAATTAAATTAAAGTTTCCTTCTGAGTTTTATGAAAATAAAGCAAAGATGATTACTGAAAATATTCATTCTGTTCAAGTAGATGAAACTTGGTATGATTGGAAGGAAATTAGCGAATCAAGTCAAATAGAACTTGTTGACGCCATCGAGATAGAAACATTAGAAAAAATTCTCGATTCAATGAATCCTATTAATTTAACATTGCACATGTCGTGTTGTAATAAGTATGTAAAAAAATACACTGATATAGTAGATGTGTTTAAGCTATTAGTTAACCCAGATGAAATATTTACTTTTTATCAAATTAATCACACACTCGTAAAAAGTAATTATAGCTTAAATTCAATAATGAAAATGATTCCTGCCGAGCGCGGATTCGTATTAAAACTGATTGAGAAGGATAAACATCAATGAGTATGTTACAACGCCCTGGATATCCAAATCTCAGCGTTAAATTATTTGATAGCTACGACGCTTGGAGTAATAATAGATTTGTTGAATTAGCTGCTACTATTACCACATTAACTATGCGGGATTCTCTTTATGGACGAAATGAAGGAATGCTGCAGTTTTATGATTCTAAAAATATCCACACAAAAATGGATGGAAATGAAATAATTCAGATTTCTGTAGCTAATGCAAACGATATTAATAATGTTAAAACACGAATTTATGGATGCAAGCATTTTTCCGTGTCAGTAGATTCAAAAGGCGATAACATCATTGCTATT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In another aspect, the invention provides an SFNHSI bacteriophagetargeting a Shigella spp. bacteria. In certain embodiments, SFNHSI bindsa molecule of OmpC. In certain embodiments, the SFNHSI bacteriophage hasa genome comprising a nucleic acid sequence comprising SEQ ID NO: 8.

SFNHSI (SEQ ID NO: 8)TATTATTAAGTAAACTCATTATGCAATCCTTATCCAACGGTATACAGTAATAGACGGTTGAATATTACTAATATTAGTAGGAGGAGTATGTGAAGAGTTTGTTGTTGCGTAGTCTTCACGATATTTTGTATATATAGGACCAGTTTCGTCTGGGTCATATTGACATCCTCCAATAATAACTGATCCATTTTCGTCTTCAATTAAAACTCTTTCATCAGTTTTAGTCGCAGGAAGATTTGCGTTTTCAAGCGTTACTGATGTTGTACCAACTGTTCCACCGGCAGTATGTGAAGGATTTCCGCTAGAATCTAAATCATTATTGTTTAAAGCAAAGTTTGGATCCGTAACATCATCATTCCATCCTACTAAAACTTGTCCTTTACCAAATAATTTCCATGAACCAAATCCCATATAAGTCACCGGATTATTTGGGTTTATAGCATTTTCATAAATTGAACCAACAGGATAAATGCTGTCGAAAATAGATGATATTGAATTATACGTTCTAGTATAAGAATCAACTTTTTCAACATTTGGCCAACCGATTTTATCAAAATCTGTTAAGGCTACATCCCCAGTAACTTCAGTAGATGATCCTTTACTAACATAACGGTCATCAGTTAATTCAATAATGTCATCTTTTTCTAAAAGAGTTCCTAAATCATTATTAAACCATGTTATAACGATTATATCACCTGATTCAAATTTTCTATCAAATAAAAGACTGACAGGTTTTCCATCTTCATATTCTATAGAATAATCTGTGTTCGATTCTTTCCATTCACCACCAAGAGATATACATCCTGCTTGCGTATCTGAGTTAGCACCTTCACACAAAAACAGAGGATATCCTGCTGTTCCAGCTTGTTGTTGTAAAATTCCATTAAAACGAACTTCAAGAGAATTAGGATTAATAGGTTCTCCAGGAATTAATCCAAATGCAGAAAATGGAATTGATTTCATTGTTGATAAATCAGTAACGTAAATACTTCCTTCTAAAGACGTTTTTGACGTTAGTTTTGAATCCAGTACTTTTATTTGGCGTCTTGTATATGAACTTCTCCATTGTGATACACCATCCATAAATGTTTCAATTTGAACAGTGTCACCAATATTACAAGGCTGTCTTAACCTAATATTAAATCCATCAAGAGGAATCAATTCTCCTTCATTTTCTCCGGGAGAGCCAAAGTCACTGTTTTCACTAAATACATCGCCGTAATATAATTCATTACCACGGTGTTTTACTCGGATGTTATTAACATTATAGCTAGTTCCGCGGAAAACATCTAAAAAGTCTGTTTGTCCTTGAACTTCGACTAAAAATTCTTTACGTGCTACATTACTAATATCTGAACTAATAATTTTGTCAATTTGTTTGTTTTTGACATATTCCCAACGTCCTGGAGCGCAATAAACGAGCTCTAAATCACTAAATTGAATATTAATTTCAACTGACGATGACGACCCTTTAATTGTATCCCCAGAAGCAGCTACTAAAGTAACTGGATTAATGTTCCATGTTGCAAATACATCCCTAGCTCTAATTACTTTATTATAATCATTAACAGTTCCTTTAGGAAGTTGTAAAGTTACTCTTCCAGAAGAGGTATTAATAGCGTATGATTTTCCCCACTTAGCTTTTAATGTTTGACCGGATGAAGCATTATAAGTTTTCCAGGCACCGGCTGAATATGGAACATCTCCATCGCCAAGTTCATAATAAAGTTCATCAAAGTTTTCATTTATTTTTATACCACCTTTACGCAGGTAGTCACCGGTACCATCATCAACAACATTACCGATATTAATATTTTGTTTCATTATTGAGCCACCCCGATTTTCTGCGTAGCGATAACTTTAACTGCTGCTCTCATGCCAACGGTAGAAGAACTTATAGTCGCCGTTACATAGTTGGTTTTAATACTAAATGCAATATTAGCAATCTCGTCTTCTTCTGTTTCATTTCCAACTCTCATGACAGCATACTCAGAAGAAATAACTTCTGAATTAACAGTATCCACAAGAATATTTATTTCTGCTGTTTTAATTTTTCTTCCATCTACTGATTGGCACGTAACTAGCAATTTAGCCATATTGTATTCAGTGCGATGAAATAGTGGAATATCAACTGATCCGGATGTAGAAATATTCCATGTACCTTCAGCTGGTGATTCCTTTTGTCCAAACATACTTTCAATAGAATAATTCCAAACCGATGTAGAATTATCAGATGAAATACAGCGTAAAGTTACTTTACTATATGGGCTAGTTACTACTAAATTACCTGAAACACCTTTAATTGAATCAATAGCTTGAATCGTTAAAGGATTAGTAACTGATATTGATCCATTAGAGTTAATGAATTCAACACAATCGCCGAGTTCGCCTCTTTCAATAATAACTTTAACACCTACAGTAGAGGTATCAATATCATGTCTAGTGCCAACTTTCACTGGAGTTGCGTACTCTGTAATAGAGTGTTTTTGATAATACCCAGTAGCATGGATAATTTGACCATCTGCTCCAGTGCCATTTGCTACTGCCATTTTACGCTGATCGCCAAACGCATTATAAATTGCGTTAAAATCACTATTAATTTTATTACCACCGTCGAATAAGATATCACCAGTAGAAGCGTTACCAATTTCGCCGGTATCAATCAATTTCTTTGGTTCTTGAATGAACATAGCGGTTTCCTTATGAGTTTATAGTATTTATAAAGAAAAAGGGAGCCCATGGGCTCCCTTAATTTAAAATGTAAACAGAATATTGATTTCTTCTGTCTGATCCATTGCCATGATAATAGGTGGCCTATTTTCCATATAAATCATTTCGCCCGAATGCCTCATTAAATCTTCTGGGTCATAATAATCCTTTTCAGCTTTAACGTTTGGGTCATTTGGATGAGCTTTAGCTTCAAGAGGATTCGTGATTATTGATATTTGTCTAAATCCTTTATTTCCTGGCAATGCAGCATCAGGAAAATAAACTGAATCTAAATATGCTTTAAAACGGATAGTATTTGCCTTAACCCGGTAAATTAATCCAAAATCATCTTGCTGCCAAGTGAGATTATCTTCATACCCCCATCTAGTTGGATCTTCTTTTAATTCCTCAGGCCAAGGAACTACGATATATTCATTTGTGCATCTATTTATAGATACATCGGGCGGAATCTCAAAAAGATATTCCCAAACATATCCGTCTCCAGGTTCGATTGTTCCTTCCGCATCTCCTCGACCTTCAGGAGGAGTCATTGACCTAACAGAAGGAGTCCATTTTCCGCCTAATTTAAGGCATTCATCCTTATCAGTTAAAGATGCAATTGAACACATTCCAGTATCAGGAACATCTAAACAACGATATACTAACCAGCCTGCGCCTGATTCAGTAGCGTTGTAAGGAGCTGAGTTACACACTACAATATCGTTAATTCTAAATGTGTATGGATCCGGATATCTAGTATCTCCCCAATCTCGACGAGGAATAACTGCGTCAAGCATTGATGGAAGAACCTTTACTGTTCCCATCATATGCGTCCACATGTCAGTTACGCCTAATACAGAATCGGTTGGATAAGGTGGGGCAAAGCCCACCTCATTTTCATTTGATGACCACGGTTCTGATCTTCCAAATGTGATAAAGATAGTGTTTTTATCCGGACCACTTCCAATTGAATTATAAAAATTCAACATTTTTTCTGTTCTAAATTTTGAAGTAACTATCGCACGATAGATAACACTTGAATCATTCATCTATTTTAACCTGTGTTGGATTTTCAGGGTCTCTTGGATTTCCTATATTATCTTTTAGACGTTTATTAACTAAATCCCTAAATTGCGTAAATGTTGTTCCAGAAGCATCAAATAGGGGACTCATTAATTTACGTCGTTCAGACGGCAATTGACCTTGAAATATTGAATTATTATTTTCAGCATTATAGTCATCAGGAAGAGGATATTCTACACCAGCCATTGGGCCAGGCTCATAAATTGCTTCGCCTGTTACTGAATCATGCTCAATTTCACCGGTTGGAGTTAATTTAGCTACTCTATCAGCATATTCAGTAGGCAATCCAGAATCCCATTTATAGTTTTTATATTTATTAATTATTGTCTCTGTGTGTTTAAGAGTTAAACCAACATTAATAAACATCGTTAAAAGGGTAATTGCTATAAATCCAAATCCTACTGGATGAACAAAACGAATAACGTCAGATTTCCAGCGGGAAGAAGGTAAATTGGATTTAATTTTCATTACATAGTATGATCTACTTCTATTAATATAGTCTATATTGTTTTGAAGCAAATCCTTTCCTTTAACTCCACGAATAATTTCGCCTTCAAAACTAGGGAGTCTTTCTGCTTTAACTTCTTGACCAGCAATTAATCTTCCTAAAAGATTATGAATAGTTACGGTCCATTGCAATTTACCATTAGAATAGCTTCTTTCTATATAAGTAACATTACATCTTCCTGTTGCCGTATAAATCGTTTGTCCTACTAAATCTTCAGTCAAAGAATCAGATTGAACGATTATGTCATATTCAGTACCGGCCCCAGATTCAATTTCAATTTCAACTTCTTCATTATAAAGAACTTTAAAAAGAAACTTGTATGATGCTTCAATTCCTTTAGTAGAATAAAAATCATAGCTACGTGATTCAAAGAATCTCGCAACAGCATCACGTTTATCAGCATTTAAATAAATGTTTCTTTTATATATCTCTGACCACAAATATTCCCACGCATGCTCTTCTCGTGGATATTGGTTACGAATTAAATTTCGTAAATTGTTATACTGAGTTCCATATCCGTCAGAAAGATATTGAATATATGCTTCACAAAATGCCTCAAAATTAGAATCTTGTAACAAGTAAGAATCAGGCATCATTGTGCCAATTAATGGTCTTAAATCAGGGTCAGCTAATCCATGCTCTTCTTCTGGCGACCAAGGAGTTTCGCGCTCTTGGTTTTGTAAAAA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In another aspect, the invention provides an SF37B bacteriophagetargeting a Shigella spp. bacteria. In certain embodiments, SF37B bindsa molecule of OmpC. In certain embodiments, the SF37B bacteriophage hasa genome comprising a nucleic acid sequence comprising SEQ ID NO: 9.

SF37B (SEQ ID NO: 9)TAAATCAGAATTTACTGCAAAAAGGTGCAACTTCTGTAGTATCGCAGTATAATCCATCTCCTATTAAAATGATTTATGAATTGAGTATCTTTACTCGCTACGAAGATGATATGTTTCAAATAGTTGAGCAGATTCTTCCATATTTTCAACCTCATTTTAATACAACTATGTACGAGCAGTTTGGAAATGATATTCCATTTAAAAGGGATATTAAAATTGTACTGATGTCTGCTGCTATAGACGAAGCTATAGATGGGGACAATTTATCTCGTCGTAGAATTGAATGGTCATTAACATTTGAAGTAAATGGATGGATGTATCCTCCAGTAGATGATGCAGAAGGATTAATTCGTACTACTTATACAGATTTTCATGCTAATACCAGAGATTTGCCTGATGGCGAAGGCGTTTTTGAATCTGTTGATAATGAAGTTGTTCCTCGAGATATTGACCCAGAAGACTGGGATGGAACAGTAAAACAAACTTTCACTAGTAATGTAAATAGACCAACACCGCCAGAACCTCCTGGCCCAAGAACATAGAGGTTATTATGGAAGGTCTTGATATAAACAAACTTTTAGATATTTCTGACCTCCCCGGAATTGACGGGGAGGAAATTAAAGTATATGAACCTCTGCAATTAGTAGAAGTTAAAAGCAATCCACAAAACCGTACTCCAGATTTAGAAGATGATTATGGAGTAGTTCGTCGAAATATGCATTTTCAACAACAAATGCTAATGGACGCGGCCAAGATTTTTCTTGAGACAGCAAAGAATGCTGATTCTCCTCGTCACATGGAAGTATTTGCAACTCTTATGGGGCAAATGACTACGACGAACAGAGAAATACTGAAGCTTCATAAAGATATGAAAGATATTACATCTGAGCAGGTTGGCACTAAAGGTGCTGTTCCTACCGGTCAAATGAATATTCAGAATGCGACAGTATTCATGGGTTCACCGACAGAATTAATGGACGAAATTGGTGATGCTTACGAGGCTCAAGAAGCTCGTGAGAAGGTGATAAATGGAACAACCGATTAATGCATTAAATGATTTCCATCCATTAAATGAAGCTGGAAAAATTTTAATAAAACACCCAAGCTTAGCAGAAAGAAAAGATGAAGATGGAATTCATTGGATAAAATCTCAGTGGGATGGAAAATGGTATCCTGAAAAATTCAGTGATTACCTTCGTCTACATAAAATAGTAAAAATTCCAAACAACTCTGATAAGCCTGAATTATTTCAAACTTATAAAGATAAGAATAATAAAAGATCTCGGTATATGGGTCTTCCTAACTTGAAACGAGCTAATATTAAAACACAATGGACTCGTGAAATGGTTGAGGAATGGAAAAAATGCCGAGATGATATTGTTTATTTTGCAGAAACATACTGTGCCATTACTCATATTGACTATGGTGTCATAAAAGTTCAATTACGTGATTATCAGCGTGATATGCTCAAAATAATGTCATCTAAACGTATGACTGTTTGTAATCTATCGCGCCAGCTCGGTAAAACAACTGTAGTAGCTATTTTCCTTGCACACTTTGTATGTTTTAACAAGGATAAAGCTGTAGGTATTCTTGCGCACAAAGGCTCAATGTCTGCGGAAGTTTTAGACCGTACTAAGCAAGCAATTGAATTGCTTCCTGACTTTTTACAACCAGGAATTGTTGAATGGAATAAGGGGTCAATTGAACTAGATAATGGTTCTTCAATTGGCGCTTATGCTTCCTCTCCTGACGCAGTTCGTGGTAACTCGTTCGCAATGATTTACATTGACGAATGCGCATTTATTCCAAACTTCCATGATTCCTGGCTTGCTATTCAGCCAGTAATTTCATCTGGTCGTCGTTCGAAAATTATTATTACTACGACTCCTAATGGATTAAATCATTTTTATGATATTTGGACTGCAGCCGTTGAAGGTAAATCTGGATTTGAACCATATACTGCTATTTGGAATTCAGTTAAAGAACGTCTTTATAATGATGAAGATATTTTTGACGATGGATGGCAATGGAGCATACAAACCATTAATGGTTCTACTTTAGCTCAATTTCGTCAAGAACACACTGCAGCGTTTGAAGGGACTTCTGGTACATTAATTTCAGGAATGAAATTAGCTATTATGGATTTCATTGAAGTAACTCCAGATGATCATGGTTTTCATCGATTTAAAAGCCCTGAACCAGATAGAAAATATATCGCAACTCTAGACTGCTCAGAAGGTCGTGGGCAAGATTACCACGCTTTACATATTATTGATGTTACCGATGATGTGTGGGAGCAGGTTGGTGTTTTACACTCAAACACTATTTCTCATTTAATTCTACCTGACATCGTTATGCGTTATTTAGTAGAATACAATGAATGCCCAGTTTATATTGAATTAAATAGTACTGGTGTGTCAGTTGCGAAATCACTTTATATGGATTTAGAATACGAAGGTGTTATCTGCGATTCATATACTGATTTAGGAATGAAGCAAACTAAACGAACGAAAGCAGTAGGATGCTCTACATTAAAAGACCTTATTGAAAAAGATAAGCTTATTATTCATCACCGTGCAACTATTCAAGAGTTTAGAACGTTTAGTGAAAAAGGCGTGTCTTGGGCGGCTGAAGAAGGTTATCACGACGATTTAGTAATGTCTTTAGTAATTTTTGGATGGTTATCAACACAATCAAAATTTATTGATTATGCTGACAAAGATGACATGCGACTAGCATCTGAAGTATTTTCAAAAGAGCTTCAAGATATGGGTGATGAATACGCTCCAGTCATATTTGTTGATTCGGTTCATTCTGCTGAGTATGTTCCAGTATCTCAAGGTATGTCAATGGTATAAATATATTAAAGCATATTAAAGAGGATTAAAAATGACTTTATTATCTCCGGGCATTGAGCTCAAAGAAACTACGGTTCAAAGCACCGTGGTTAATAACTCTACTGGTACAGCAGCTTTGGCCGGTAAATTCCAGTGGGGTCCTGCTTTTCAGATTAAACAGGTTACAAATGAAGTAGATTTAGTTAATACTTTTGGTCAACCAACCGCTGAAACTGCTGACTATTTTATGTCTGCGATGAATTTCTTGCAGTACGGAAATGACTTACGAGTAGTTCGTGCTGTTGATAGAGATACCGCTAAAAACTCATCTCCGATTGCTGGTAATATTGAATACACAATTTCTACCCCAGGTAGTAACTATGCAGTTGGAGATAAAATCACGGTCAAATATGTTTCAGATGATATTGAAACTGAAGGTAAAATTACTGAAGTAGACGCAGATGGAAAAATTAAGAAAATTAATATTCCTACTGCAAAAATTATCGCTAAAGCTAAAGAAGTCGGTGAATACCCAACATTAGGTTCTAACTGGACTGCAGAAATTTCTTCGTCTTTCTCTGGTTTAGCCGCAGTAATAACTCTTGGAAAAATTATTACTGATTCTGGTATTTTATTAGCTGAAATTGAAAATGCTGAAGCTGCTATGACAGCGGTTGACTTTCAAGCAAATCTCGAAAAATACGGAATTCCAGGAGTAGTAGCTCTTTATCCAGGCGAATTAGGCGATAAAATTGAAATTGAAATCGTATCTAAAGCTGACTATGCAAAAGGAGCTTCTGCATTACTCCCAATTTATCCAGGTGGTGGTACTCGTGCATCTACTGCTAAAGCAGTGTTTGGATATGGACCACAAACTGATTCACAGTACGCTATTATAGTTCGTCGTAATGATGCTATTGTTCAAAGTGTTGTTCTTTCAACTAAGCGCGGTGAAAAAGATATTTACGACAGTAACATCTATATCGATGACTTTTTCGCAAAAGGTGGCTCAGAATATATTTTTGCAACTGCACAAAACTGGCCAGAAGGATTCTCTGGAATTTTAACTCTGTCTGGTGGATTATCATCAAATGCTGAAGTAACAGCAGGAGATTTGATGGAAGCTTGGGACTTCTTTGCTGACCGTGAATCTGTTGACGTTCAACTGTTTATTGCGGGTTCTTGTGCCGGTGAATCTTTAGAAACAGCATCTACTGTCCAAAAACACGTCGTTTCAATTGGGGATGCTCGTCAAGATTGCTTAGTATTGTGCTCACCACCACGTGAAACTGTAGTTGGAATTCCTGTAACTCGTGCAGTAGATAATTTAGTTAACTGGAGAACTGCGGCAGGTTCATACACTGATAATAACTTTAATATCAGTTCAACCTATGCAGCAATTGATGGTAACTACAAATATCAGTATGACAAATATAATGATGTGAATCGTTGGGTTCCATTAGCAGCTGATATTGCTGGTTTATGCGCAAGAACTGATAACGTATCTCAGACTTGGATGTCTCCAGCTGGTTATAATCGTGGCCAGATTCTTAACGTTATTAAACTTGCTATTGAAACTCGCCAGGCTCAGCGCGACCGTTTATACCAAGAAGCTATCAACCCGGTAACTGGTACAGGTGGTGATGGTTACGTATTGTATGGTGATAAAACAGCTACTTCTGTTCCTTCTCCGTTTGATCGTATTAACGTTCGTCGTCTGTTTAATATGTTGAAAACGAATATCGGACGTAGTTCAAAATATCGTTTGTTCGAATTAAACAACGCGTTTACTCGTTCATCATTCCGCACGGAAACTTCCCAGTACTTGCAGGGAATTAAAGCTCTCGGTGGAATTTATGAATATCGTGTAGTTTGCGATACAACAAATAACACTCCGTCAGTAATTGATAGAAATGAGTTTGTTGCAACATTCTACATCCAACCGGCGCGCAGTATAAATTATATTACTTTGAATTTCGTCGCAACTGCTACTGGTGCAGACTTCGATGAGTTAACTGGTCTTGCAGGTTAATTGATTATGGGGCTTCGGCCCCTATTCTCGAGGAAACAAGTGATTATTTCTAAGTTTGTTAAAGTGAAAATTGTACCATCAAATTTTAAACATTATCAATCAAAGGGTTATAAA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In another aspect, the invention provides a PG-I1 bacteriophagetargeting Staphylococcus aureus. In certain embodiments, PG-I1 binds amolecule of peptidoglycan. In certain embodiments, the PG-I1bacteriophage has a genome comprising at least one nucleic acid sequenceselected from the group consisting of SEQ ID NOs: 10-12:

SEQ ID NO: 10TCAGTGTCTACTGATTTAGAAACGTAACCTTCTACTTTCTTGCTCTCCGTTTGTAGATGTTACTGATTTTTCTACAGCTTCTTCATCAGTGTCTACTGATTTAGAA SEQ ID NO: 11TTCTAAATCAGTAGACACTGAAGAACAAGCTGAAACTGGTGAAGCAAAATCAGAAGAAGCTGAAGAAGTACAAGAAGATAACACATTTAAAGGATTAAGTCAAGAAGAACGAACTAAGTTCATGGATTCTTACAAAGCACAAGCTAAAGACCCTAGAGCTTCTAAACATGACTTACAATCAGCTTACCAATCTTACTTGAACATTAACACTGACCCTACTAATGCATCAGAGAAAGATATTAAAACTGTAAAAGACTTTGCACAAATTTAATTAATGCACAAAGTTGTGTTATATTATACGGTGTAACTAAAGAATATAAATAGGGTACATTTTACTGTACCCCACATAAAATAAAAAAGAACACAAAATGAAAGGTGATAAATTTATATGACTATCGAAAAGAACCTGTCAGACGTTCAACAAAAGTACGCTGACCAATTCCAAGAAGACGTAGTAAAGTCATTCCAAACTGGTTATGGAATCACTCCTGATACACAAATTGACGCAGGAGCTTTACGTAGAGAAATTTTAGATGACCAAATCACAATGTTAACATGGACTAATGAAGACTTAATCTTCTATCGTGATATCTCACGCCGTCCTGCTCAATCTACAGTAGTAAATACGACCAATATTTACGTCATGGTAACGTAGGTCACTCTCGTTTCGTTAAAGAAATCGGAGTAGCACCAGTATCTGACCCAAATATCCGTCAAAAAACTGTATCAATGAAATACGTTTCTGATACTAAAAATATGTCAATTGCATCAGGTTTAGTAAATAACATTGCTGACCCATCACAAATCCTTACAGAAGATGCTATCGCAGTTGTTGCAAAACAATTGAGTGGGCTTCATTCTACGGTGACGCTTCATTAACTTCTGAAGTTGAAGGTGAAGGTCTAGAGTTTGATGGTTTAGCTAAATTAATTGACAAAAATAACGTAATTAACGCTAAAGGTAATCAATTAACTGAGAAACACTTAAATGAGGCGGCGGTACGTATCGGTAAAGGTTTCGGTACAGCTACAGATGCTTACATGCCTATCGGTGTACACGCAGACTTCGTTAACTCAATCTTAGGTCGTCAAATGCAATTAATGCAAGACAACAGCGGTAACGTTAACACTGGTTACAGCGTAAATGGTTTCTACTCATCTCGTGGATTCATTAAATTACATGGTTCTACAGTAATGGAAAATGAACTAATCTTAGATGAATCATTACAACCATTACCAAATGCTCCACAACCTGCTAAAGTTACAGCTACTGTTGAAACTAAGCAAAAGGTGCTTTTGAAAAATGAAGAAGACCGTGCAGGATTATCATATAAAGTAGTAGTTAACTCAGATGACGCTCAATCAGCTCCTTCTGAAGAAGTAACAGCTACAGTATCTAACGTAGACGATGGTGTTAAACTTTCAATTAATGTTAACGCTATGTACCAACAACAACCACAATTCGTTTCTATCTACCGTCAAGGTAAAGAAACAGGTATGTACTTCCTAATCAAACGTGTACCAGTTAAAGATGCACAAGAAGACGGAACAATCGTATTCGTAGATAAGAACGAAACATTGCCTGAAACAGCAGACGTATTTGTTGGTGAAATGTCACCACAAGTAGTTCACTTATTCGAATTACTTCCAATGATGAAATTACCATTAGCTCAAATTAATGCTTCTATTACATTTGCAGTATTATGGTATGGTGCATTAGCATTACGATGCTCTAAAAAAATGGGCTCGTATTAAAACGTTCGTTATATCGCAGTTTAATAGAATAAGAAAAACTGAATACAAGAGAATAGGGATAAACTTAGGGTTTATCCCTTTTTTATTAAATAAACTTGAAGGGATTTAATAAATATGTTATACTATAAGAAACTATTAGATAAAAAAATGGCTACTGTTTATGGTACAGTGGAGATTGACAAAGATGGAGTAGTCAAAGGATTAACCAAGAACAAGAAAAGAATTTGCCAATGTTCCAGGTTTTGAATTTGAAGAAGAAAAGAAAACTACTAGAAAACAATCAGCTTCTACTAGTAAAGAAGAAGAGCCTAAGGAAGAGGAAAAGCCTCTACTAGAAAAACTACAAATACTACTAGAAAATCTACAGCACGTAAAACAACAGCCAAAAAAAAGATGAAAATAAGTAAAGGGTGAATTAAATGGTTAACTCAATGTTTGGAGGGGACTTAGACCCTTATGAAAATCATTAAACTATGAATATCCTTATCATCCTAGTGGTAATCCTAAACACATAGATGTAAGTGAGATAGATAATTTAACATTAGCTGATTATGGATGGTCACCGGATGCAGTTAAAGCATATATGTTCGGTATTGTAGTTCAAAATCCTGATACAGGACAGCCTATGGGTGACGAGTTCTATAACCATATATTGGAAAGAGCGGTAGGTAAAGCTGAAAGAGCATTAGATATATCTATACTACCTGACACTCAACATGAGATGAGAGATTATCATGAGACAGAGTTTAATAGTTACATGTTTGTACATGCTTACAGAAAACCTATATTACAGGTAGAGAACTTACAGCTACAGTTTAATGGTAGACCCATATATAAATACCCTGCTAACTGGTGGAAAGTAGAGCATCTAGCAGGACATGTTCAATTATTCCCTACAGCACTTATGCAAACAGGACAATCAATGTCATACGATGCAGTATTCAATGGATACCCCTCAATTAGCAGGTGTATACCCACCATCAGAGCAACATCATTTGCACCTCCTCAAATGATACGATTAGAATATGTATCAGGTATGCTTCCACGTAAAAAGCAGGAAGAAATAAACCTTGGGAAATGCCCCTGAGTTAGAACAGTTAGTTATAAAATATGCATTGAAAGAAATATACCAAGTATGGGGTAACTTAATTATTGGTGCCGGTATTGCTAATAAAACATTAGAAGTAGACGGTATTACAGAATAGGTACTACTCAATCAGCTATGTATGGTGGAGCTAGTGCTCAGATACTTCAAATAAATGAAGATATAAAGAACTATTAGATGGTTTAAGAGCTACTTTTGGATATAATATGATAGGATTATAAGGAGGGTTAGAAAATGGAAAACCGTATATGATAGGGCTAACTCTAACCCTAATGTTATTAATAAGTCAACAACATATACTACTACAACACAAGCAGATGAACAAGATAAACCTAAGTATACTACTAGACTAGAGTTTGATACGATTGACATGATTAGGTTTATTAATGACCAATTATAAAAGTACTATGGGAAGAAGCATATTTCTGTCCTTGTCTTAATCTGATACAGGACATCCTAGAGTGGAATTGCCCTAGATGTCATGGTAAAGGTATTGCATATCTACCTCCTAAAGAGACGATAATGGCAATACAGTCTCAAAGAAAGGAACTAACCAGTTAGATATAGGTATATTAGATACAGGTACTGCAATAGGTACCACTCAATTAGAAAGAGAATTTCCTATAGAGACAGGTTTACTGTTCCTGAGGTATTGATGCCCCAACAAATGATTTATTTTGTGAATAAAGATAGAATTAAAAAAGGTATACCTTTATACTACGATGTAAAGAAATAACTTATATAGCCACTCAAGACGGTACAGTCTATGAAGAAGATTATGAAATCAAGAATAATAGATTGTATTTAAATGAAAATATGAGAATCATACAGTAACTTTAAAGATACTTATGACTTTAAGATATGTAGTATCAGATATACTAAAAGAAAGTCGTTATCAATATACTAAGTTTAATCAACCTAAATCAAAATTTGAAAACTTACCTCAAAATTACTTCTTAAAAGGGAAGATGTCATTGTACTACAAGACCCTTATAAAGTTAATGATGGTATAGAAGAAGACCTAGAAATTCAAGTAGATGACCCTAAGGCTTCGGCATCTAATCCTAGTAATTTAGGTGGATTCTTCGGAGGTGCATTTAAATAATGCCAGTTCATGGAAAGAGACCTAATTTATTTAAAATAAAACTATAAGCAGGTAGGTAAGAGAACAATTGATGGTATGCGTTCAGAAGTTCTTGATAAATTACAAGCAACAGCACAGCAAGTAGAGAATACTAGTATTAAACGTATGCCTACTTATCTACAAATAACAGAGAAAAGCTTGAAAAGAAGGAGTAGTAGACCTTAAAAAAGCTTTGCTCACTCATCTAAAAAAGAAAACTAGTAAAGATGGCGGATGGTATTTAACTGTACCAATCCGCATCAAAACTAGTAGAATGAATAACAGTACTTATCAAGATATGAGAACTTTAAAAGTAGATAAAGGAACAGGTTCAGTTTCGAAGATAACTGATTACCTAGAAGGACGTAGGAAGAATGTAAGCCACCCTTCAATGAAGCCTGAACCTATGACTCATAATATGACTAAAGTTAAAAGAGGAAAGCAATCTTCTTACTTTATATTTAGAACTGTTTCTAGTAAGTCACCTGCTAGTTCTTGGATACTTAACAGAGATAAAGTTAATGAAGATAACTTCTCTAAAACAACTCTAAAAACTGTTAAGCAATTAATGAACTGGAAGATGAAAAATTTAAATTAAGAGGAGGGTTAGTATTAAATGGCAATAACATCAGTTGATTCATATTTATTATCAGAAATAAAGCCTAGACTTAACACTGTGCTAGAAATTGTTATATTATAGATGAAGTTTTAAAGACTTTGATTATCAAACTAGAGAGAGCTTTAAAGAAGCTTTCTGGTAGAAATGCACAACATGAAGTAACGGTAGGATTTAACTTCCCAAAATTTAAAATAACTATGAAGCTCATTACTTTGACAGCCAATTAGGTCAAGGACAAGAGACAAAAAACTCTTTAGAAGGTATTCAGTCATCTTACTTTGAGGCAACAGGAGATACTTTAATGAATCTTCTACAGCAATAAGAGAAGATGATAAGTTAGTTTTACTGTTTCTAAACCAATAGGAGAGTTAATAAAGGTAGAAGAT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SEQ ID NO: 12TTGTCATAATAATCAAATCCTTTTCTGTTTGTTTTGTTATCTTAATAATATCATGGTTTCAAGTGACTGTCAATAGTTTTTTTTAAACTTTTTTTATTTAGGTTGGAAGCGGTTGACCGCTTCCCTTACCTTGTATCTTAATATTAACATCTATTGTTTAAGTTGTCAAGCCTTATTTTGAATATTTTACAATTTTATTTGCTTTCAAGAAAGTAACATCTTGACGGTAGTTTTTTAACTCTTCTGTAAACCTTTCATTATTTTTCATGCCGATTAAGTTTAAAGTTGTTGTGATTTTTTTCATTTTATCATTTCCTTTATTGATTTATTTGTTATCTTAATATTAACATGTTGTTTCTAGGTTGTCAATAGTTATCTTAAAAAAAATATTTATATTATCTTGTAGTAGTAAAACCAGTTTACAAGTTTAGGTGTGACTGTTGCAACTAAACCCCTATAATAAGTAAGAGAATGTTATCTGTTTTTGTGTTGATTTGATTGTTTTGTTTTTCCATTTAAATTTTATCATTTTGTTCAATCCCTTTCATTTGGTATACCTTTATATTAAACTATAATGATATTAAAGTCAATAGATTTAATGAAATTAATTTAAAAAACTTTTACATTTATCTATTGACATTAAGACCGAATTATTATATAATGGAAGTGATACCAAAAAAGGAGGAGTAAAAAATGGTTGAAAATAAAATTAATGAAATTTGGAAACCTATAAAAAAAGAATACTTTAATAAATATAATTTTTATGTTTCTAATTTAGGTAGGGTAAAATAAATGATAGGTTGAGTAAAGTACATCAAGACCGTGACGGATATTTAACCGTAAGGGTCAATAATAAAAACACATGGTGCATAGACTTGTATATGAATATTTTGGCAATGATTTTATTAAATCAAACCATGTACACCATATAGACGGTAACAAACAAAATAATTGTATTGATAACCTAGAATGTATTAGCCCGTCAGAACACAATAAAAGGCACCATAAAGACAATACTTTCAATAGGTATAATAGGGTTATGCATTAACAGAAGATGAAAGAAAAGCCATAGCAAGCAAATACAAGCCTAGAAAGTACACTCAACCTATGTTAGCAAAGGAATATAATATAAGTGAAATAACCGTTAGAAGAATTATAAAAAATATAAAGATTAAAGAAAAAGGGTTGACCTTTTCTTTTTTCTATAGTATACTATAAGTATAGTAAGAAAGCGGTAAGGAGCCTACGTGTCCGCTATATAAGAGAAGAGGTTCCGGGAAAGAGTGGTTTTAAAACCATTTAATATAAATTTTTTATATAATAATTTTTTTATACTAAAAGGTCTTCACTTCATTATACCATAAAAAATACAACCTTGTCAACAGTCAATTTTACACTAATTTATTTATTAAATAATTTTTTTATATAAATTAAAATAAATAAAATCCCTAGAAATCTAATCCTAGGGAATTGTATAATTTTTTTTATATTATTGTATTGCACTTCTATTATATCTTAATTTCATAAATTTATTATAAGTTTGTTTACTGTTAAATATAATAAATTCATCTGATTCATTTTAAATATATTGTGTACAGTTTGATAGCTCATATATCCATTTTTGCTAAATTCCATAAAGTTTTATATCACTATTATTTTTTTCTATTTTAAATTTCATATTATCATATCCTTTTATATAATTTTTTATTTAATTCAGAAGCGGTTATATTCAACCGCTTCATATTTAATTTTATTGACTAATTCTATTTGTTTTAACTTGTGTGTAAGCATATTCTAGAGTATCCGCTATATTATAACTTTGAATACTACACCACCGCCAAACCATTTAGCAGTATATTTTTTAAAGCCGTATAGTTTATTGATGTTGTCATAGTCTGCTAGTTTAATATCTAAATCCATGAAATGCACTACATAACGTGGGTTGCCGTTTGCGTCATTTGGAATTCTGAAAGCCGTAATGTCTTGCCCTTGTACTGTGTGAGTTTCTTCGTATAAGTAATTTTTTGTTTGTCATAATAA TCAAATCCT

In another aspect, the invention provides a U136B bacteriophagetargeting an E. coli bacteria. In certain embodiments, U136B binds amolecule of TolC. In certain embodiments, U136B binds a molecule of LPS.In certain embodiments, the U136B bacteriophage has a genome comprisinga nucleic acid sequence comprising SEQ ID NO: 13.

U136B (SEQ ID NO: 13)CTGCTCTTTTGGTTAACGCAATTAATGAAATGATTGATGATTCAGATAAGCAGAATGAAACCATTCAGAAGCAACAAGATGAAATCAATGAGCTAAAAAATGAAGTAGCAGAAATGAAAAAGATGATCGAGGAAATGCAATCAATGTTTATTCAGATTGCTAAGTAATAAAAAAGGAGCCTTTCGGCTCCTTTTCTTTTATCAGAATGGGATATCATCATCAAAATCCATAGGCGGCTCGTTGTTTTGAGGCGCTTGCTGGCGTGGCGCTTGTTGTTGCTGTCGAGGTTGCTGCTGTTGTGGCGCTTGCCCTTCTCCGCGTTGACTGAATAAAAGATTAGGAAAACCCGCCGCCGTCAATGTGTTATAAATCTGCCCGTTGTATTCCTGGCTATCAATGCGTAACTGATCGCATGATACAGAAATAACTTTACCCTGCTGAAATGCTTCACGATACCAATTATTCATGCCGTCGCTTTTAGCATTAAAGAAGAATTTGTAATTGGTGTATTGTCGATTACCTTCACGATCTTTAAATGACTCCGAAAGCTCAACGATGTATAATGTGCCGTTTGCGCCTTGCTTTACAAATGGCTCTTTGCGAATTTCTCCGGTGATTACGTGCATTCTTAATCCTTATTGGGGCGTTACCGCCCCACGTTAATTTATTCAAAGTCTGTGATAGATTGAGATTTTACTTCCTGTTGCGGCTCGTTTTCAACATTTTCCTTCTTCGCAACATTAGCCGCTGGCGCTGCCGGATTAAAACCGCGAGCCTTTCCGATTTCCATTTTTGCTTTTAGCTTGTCGTAATGCTCTTTAATGATTCTCCTGTTAGCCGCGTCAGATTGCTTGTAAGCCGTTTTAAACGTTTCTTGCAAGTCTGTAAGGTTATCGCAAACATCAAGATCTTTTTTCCAATCCTGCGCGTTTTTGGTGGCAAGATTTGCGTCATCGTCAGCCGTTGCCAGGCCAAGAGCCGTGCAAAGAGCATAACGTCTCGCATAGCTGTTTGTTGAGCCGCCGCCTTGTGGATCTAATTTCTGCATTGGCAACGTGAAACTATATTCAACCCATTCATTTGATTCAACATGAATGAATCGCGTGAATACAGTCATTGATTTAAGATCTTCACTGACTTTCTGATCTTGCGTCAGGAATAAACCCTTATCAGTAAGCCCAGGCATAATTGCATCAAGAACACTGTCAAGCGTTGCATATTTATTTTTAAGGTGCGTATTTTGCTTATCCTTTTTTACTTTTGTGAATAACTGACGCGCCTCAAACAATGCCTTAATTACGTTTGCGTTTTGATCTGATAATTTCATTTCATTGACTCCGGTTTAATAATGGCGGCTTGCGCCGCCGTGTTAATTAATGCTTTTCTTCGTTATCGTTGTGATAATCAATCAAATTCTGGATCATGATTTCACTTGCCTGATTAATCATCTTGCGGTGTTCTTCGTTATTTTCCATTTGAAGAACCGTTAACACAACGTTATCAATCGAATATGCAACCTTGCGAACATATTCAAGAGTTTCCGGTGATTCGCTTGGATCAATTACGCGCAAGAACTGGCGTTGCATAATTCCTAATGCGTTTACAAATCCGCCTACGTGATCGCGCACATCTTGAATGTCTTGCTCATTGAATTGCTGTTCCATTTTTGTTTCCTCTCTCTCGTTGGTTGATGCGTGTAGTATACCACGCATCGAATGGCAGTTTTAGCAAAAAGTGCTATTTATAAAAAACCTTTGTATTGACGACGAACCCAATCAGGCGTTTGAAGGTCAATTTCCGGCTCTCCGTTTGCGTATGAAGGCCAAACGTCATTTACCTGGCATTCTGCAAACTGGTTTATCACGCTCATGTATTGAAGTCGTCCGATCTTCAATTGTTCATCCGTCATGCGGTATGCAATCGGTAAATAAGGCTCTTTCTTTTCCTGCGCCAGCAATCTGACTACTACGGGGCGCGTTTCTTCTGGATACGCTTTCTTGAATAAGTCATGTTGCAATGCCATTTTCAAGTAGTAGCCGTGATTGAATGCCAGCCTTGCAAACTCTGACGGGTTAGCGCTTGACGTTGTTTTATAATCCGTGATCACAATCGCTTCATCAAATCGCGTTGTTTCATATACCGGATTACCTTCACCATCATAACCGGAAATCACCGTTGCAAGCACATCTTTGCAAATATCAACATGGTCAAGCCTTACTTTGACTTTCACGCCTTTGATAGTTCCGAAAATTGATAGCTCGCGTTGTGCTGTTGGGCTATTCATGCAAGCGTTGTGTTCAGGTATGCTTTCCAGTACGCGGCGCATGGTAACGCAAGCGTCGTAATCTTTAGCCGGAACCAATTCAACGTTATCCGCTCGCGCCTGGCTTTCTGCGATCATTTCAATGAGCCATTGCACATTTAGATCCTCACCACAATCAACCATCATCTTAATCAGATCTGGATACGTTTTCCCGCTTGTACCAGTCAGGCCAAAAGATTTTAATTTCGCTGCCAATGCTGCCTGGCTCGTAATCAGGTTTTCATAATCTTCCGGCGCTGGCGCTCTGCGGTACTCTTTTGCGAATAGCTCACTACTCTGGAAGTTTGTGTGTGACTGCGTACCGAAAACAAGCGCTTTGCTTTCCTCGCGTGGTCTGTATTTCCACGCTGCCGGACAACTTGCAAAGATTTCTGCCAGGCTTGAACCGCTAACGTATTCAGCCGCCCAGCCTTTCGGATCGTGATATTCACCGTTGGTTAACTGGTCAAAGGTGTAAACTTTAAAATCGCTCATTTATTCATCCTCTCGTTGGTATGTCTGCATTATATGTGAATGTTTCATGTAGTCAATACCATTTAAGTGTTCTTTTTGTTTTGAATACGTTTACAACTAGCATTGACAACAAAATCACATCGTAAGTTTATGATTTTACTAATTGTTGTTTTTGTGTTCCATTGTTCACGCATTTACGCCGCATACCATATATAAATACATACCATGTGATATATAACCATCAACCAACACAAAACACACAACCACTACAAACCATAGAGAACAATGGAAACAAGAAGGATACAAATAGATATATATAATAATAATTAAACTCTAAGTGTATGTATTATATAGATATTTAATTTGTTCTTTTTGTTGTCATAACGTTCTCAATTCTACGCCGGATTAAGTTGTGAACACCGTAGAACAAAAGAAAACAAAATGCCCCGACCGTTAAGCCAGGGCATTGATTTACCTCCTTTTATGCTTTGAATAGCAGTATTGTTAATACTGGAACCGCGTTAGCGTGGTTCAGGTTGCCACCATATGAAAGCGTTGTTGCGTTACCCGCTGGTAACAGAAGGTATCCACTTGAACCGCCATGCATAGCCGTAGCTTGAACGTTAGCCAAGCGACCGCCATATGATGAATCAACCCAAACAGTACCACCGCCCCACGTACCGCCTGAATAGGTATAGCCATGCAAACCAACATAAGGAATCACAAGGTGTCTGTCGTAGTTTACTGCCGGAATGTGAACCGATCCGTTAAACCCAAGCACAACAGCCTTTGCAACGTCGCCCTCGATTTTTTCAGCGTAAACAGTACCCCTAAACCAACCATCAGTAGCGTAAACGTTACCAGTGAATGATCCGGCGTTTGCGTACACTGTACCCCTTACCGTTATCTGGTTAAATTCAGCATAACCATTCTTATTAATCATCCATCCAGCCGCGCCGCTGCTCCAGTTGTTAGAGTTAATCTGATCCGCAATCTGAGCGTTACCAATAGAGCCATTTTTCACAAGCAAGCTGTTGATAAACACCTGATTATTCTCAACAACAAACGGTAGTGTAAAACCTCCGCTCTGTTGGTTGTTTATGATCGCAAATCGTCCAGCATCAAACAGGAATTGTGATTTAACTCCTGATCCGTCACCAACAAGGGAAAGAGCCATACCAGCGCTATATTCCTGCCCGTTGTAACGTAACCCCAACTTAACGCCGTACATCGCGCCTACGCTATCGGCATTAACCCAAGAATCAAGTTTCTGGTTAACCGCTGATTGGGTATCACCAATTTGAGTTGATAACGCCCTATCCGCTGACGCTCGCGCTTCCGCTTCATTGGTGATTGCCTTGTTAACATCAGTTATCTGTGCTTTGATATCCTGCTTAACACCATCAATTTCGCTCTCAAACGTAGCTGTAAGCTGATCAATCCTTTGGCTAATGGTTTCAGTGCTGTTAGCAATTACCTCTCTCAATTCGCTATTTTGAGCCGTTAATTTCTCGTCAAATTGCGCACTCATTTGAGTGACCTGCGTTACCCTTGCTTCTGTTTCGTCTGCAATGAGTTTCAGCGATTGCAAGAACTCCGCTTTACGCTTGCCGTTTTCAACTCGCATACGTCGCACATCTTTATCATTCGCTAATGCGTTTTCAATCACTGATTCCGCTGTGCTGTGGATCTTATCATTGGCCTTTATTGCGTTTTCCTGTAACCACTTATATCCATCAGAATTTTCAATATCGACCTTAATATGATCCGTGATAATGCTCGTATCGTCGGAAGCCATGCCGCGCACAAAGTCAGTCCAATCAGACACATTCCCGATTTTGTCAACTGCCCTTGCCTTGTACCAGACAACATGACCCGCTGGCAGTATTGAATGCCAATACTCATATTGCGGGAACGGAACAAGCGTTAATAGCGTTGCTTCGTCAACTATAGGATGACCATCAGCACCGTTTGGCGCTTGATGCAACTCTATATAGGCCGTGTCTCCGCTTCCCTCCGGCATACCCCATTTTACGCGAATTCCGAAAACCTCATTATCTGACGCTGTAAGGTTAATTGGCTTTTCCGGCTCTCCCACTTTTCCGGTTAATCCTGCGCTTACTATTGCAGACCATCCAGACGCTGAACCATTAGCCGCAACAGATCTAACCCTTACGTGATAGTTACCCGCATAAATACCTTCAACTTC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Tolerable variations of the bacteriophage sequences will be known tothose of skill in the art. For example, in some embodiments thebacteriophage comprises a nucleic acid sequence that has at least 60%,at least 65%, at least 70%, at least 75%, at least 80%, at least 81%, atleast 82%, at least 83%, at least 84%, at least 85%, at least 86%, atleast 87%, at least 88%, at least 89%, at least 90%, at least 91%, atleast 92%, at least 93%, at least 94%, at least 95%, at least 96%, atleast 97%, at least 98%, or at least 99% sequence identity to thenucleic acid sequence set forth in any one SEQ ID NOs: 1-13.

Methods

In another aspect, the invention includes a method of increasingantibiotic sensitivity and/or decreasing virulence in pathogenicbacteria. In some embodiments, the pathogenic bacteria are drugresistant. In some embodiments, the pathogenic bacteria are multi-drugresistant (MDR) bacteria. In some embodiments, the pathogenic bacteriaare pan-drug resistant (PDR) bacteria.

The method comprises contacting the pathogenic bacteria with a lyticbacteriophage selected from the group consisting of OMKO1, LPS-5,TIVP-H6, LPS-TLTL, SFA1-1, SF60B, SFNHSI, SF37B, and U136B. In certainembodiments, the bacteriophage binds a molecule of an efflux pump, OmpA,OmpC, Type IV pilus, LPS or peptidoglycan in the bacteria and thebacteria either genetically resists bacteriophage infection or becomesinfected and lysed by the bacteriophage. The genetically resistantbacteria have impaired efflux pumps and increased sensitivity toantibiotics, or have impaired virulence factors, such as reducedproduction of pyocyanin or elastase, that are responsible for decreasedvirulence.

In one embodiment, the bacteria are contacted with bacteriophage at amultiplicity of infection (MOI) of bacteriophage to bacteria in therange of about 0.0001 to about 10¹⁰. The MOI may range from about 0.0002to about 10⁹, from about 0.0003 to about 10⁸, from about 0.0004 to about10⁷, from about 0.0005 to about 10⁶, from about 0.0006 to about 10⁵,from about 0.0007 to about 10,000, from about 0.0008 to about 5,000,from about 0.0009 to about 2,500, from about 0.001 to about 1,000, fromabout 0.005 to about 500, from about 0.01 to about 100, from about 0.05to about 50, from about 0.1 to about 10, or any range therebetween.

In another embodiment, the method further comprises contacting thegenetically resistant bacteria with an antibiotic. The antibioticincludes any of the antibiotics described herein, any commonly knownagent, and any combination thereof.

In another embodiment, the method comprises or further comprisescontacting the genetically resistant bacteria with one or moreantibiotics, e.g., 1-100 antibiotics or 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10,11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, or moreantibiotics.

In yet another aspect, the invention includes a method of treating abacterial infection in a subject in need thereof. In certainembodiments, the bacterial infection is drug resistant or multi-drugresistant (e.g. caused by a drug resistant or multi-drug resistantbacteria). The method comprises administering the pharmaceuticalcomposition as described herein to the subject with the bacterialinfection. In one embodiment, the composition is administered directlyto a site of the bacterial infection. In another embodiment, the methodfurther comprises administering an antibiotic as described herein to thesubject. In one such embodiment, the antibiotic is co-administered withthe pharmaceutical composition. In another such embodiment, theantibiotic is administered before or after the pharmaceuticalcomposition is administered.

In some embodiments, the antibiotic can be administered minutes, hours,days, or weeks, before or after the pharmaceutical composition isadministered, e.g.: 1, 5, 10, 15, 20, 30, or 45 minutes; 1, 2, 3, 4, 5,6, 7, 8, 9, 10, 12, 14, 16, 18, 20, or 22 hours; 1, 2, 3, 4, 5, or 6days; or 1 or 2 weeks, or any amount of time there between.

In another aspect, the invention includes a method of disruptingpathogenic bacteria associated with a biofilm and compositions for usethereof. In another aspect, the invention includes a method ofpreventing formation of a biofilm.

In some embodiments, the biofilm is on Dacron and/or any otherprosthetic material.

In some embodiments, the pathogenic bacteria are associated with abiofilm. In some embodiments, the pathogenic bacterium is Pseudomonasaeruginosa. In some embodiments, the Pseudomonas aeruginosa is aPseudomonas aeruginosa biofilm.

In various embodiments, the bacteriophage are selected from among thebacteriophage listed in Table 1.

In certain embodiments, the bacteriophage comprises a nucleic acidsequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 1-13. Incertain embodiments, the bacteriophage comprises a nucleic acid sequencethat has at least 60%, at least 65%, at least 70%, at least 75%, atleast 80%, at least 81%, at least 82%, at least 83%, at least 84%, atleast 85%, at least 86%, at least 87%, at least 88%, at least 89%, atleast 90%, at least 91%, at least 92%, at least 93%, at least 94%, atleast 95%, at least 96%, at least 97%, at least 98%, or at least 99%sequence identity to the nucleic acid sequence set forth in any one SEQID NOs: 1-13.

Administration/Dosing

In the clinical settings, compositions of the invention can beadministered to a subject by any of a number of methods, each of whichis familiar in the art. For instance, a pharmaceutical formulation ofthe composition can be administered by inhalation, topically, locally orsystemically, e.g., by intravenous injection, intramuscular injection,intraperitoneal injection, retro- or peribulbar injection.

The regimen of administration may affect what constitutes an effectiveamount. The therapeutic formulations may be administered to the subjecteither prior to or after the manifestation of symptoms associated withthe disease or condition. Further, several divided dosages, as well asstaggered dosages may be administered daily or sequentially, or the dosemay be continuously infused, or may be a bolus injection. Further, thedosages of the therapeutic formulations may be proportionally increasedor decreased as indicated by the exigencies of the therapeutic orprophylactic situation.

Administration of the composition of the present invention to a subject,such as a mammal, for example a human, may be carried out using knownprocedures, at dosages and for periods of time effective to treat adisease or condition in the subject. An effective amount of thecomposition necessary to achieve a therapeutic effect may vary accordingto factors such as the extent of implantation; the time ofadministration; the duration of administration; other drugs, compoundsor materials used in combination with the composition; the state of thedisease or disorder; age, sex, weight, condition, general health andprior medical history of the subject being treated; and like factorswell-known in the medical arts. Dosage regimens may be adjusted toprovide the optimum therapeutic response. For example, several divideddoses may be administered daily or the dose may be proportionallyreduced as indicated by the exigencies of the therapeutic situation. Oneof ordinary skill in the art would be able to study the relevant factorsand make the determination regarding the effective amount of thecomposition without undue experimentation.

Actual dosage levels of the cells in the pharmaceutical formulations ofthis invention may be varied so as to obtain an amount of thecomposition that are effective to achieve the desired therapeuticresponse for a particular subject, composition, and mode ofadministration, without being toxic to the subject.

Routes of Administration

Routes of administration of the compositions of the invention includeinhalational, oral, nasal, rectal, parenteral, sublingual, transdermal,transmucosal (e.g., sublingual, lingual, (trans)buccal, (trans)urethral,vaginal (e.g., trans- and perivaginally), (intra)nasal, and(trans)rectal), intravesical, intrapulmonary, intraduodenal,intragastrical, intrathecal, subcutaneous, intramuscular, intradermal,intra-arterial, intravenous, intrabronchial, inhalation, topical,intra-orbital, intra-aural, intra-articular, and topical administration.

Suitable formulation of the compositions and dosages include, forexample, dispersions, suspensions, solutions, beads, pellets, magmas,creams, pastes, plasters, lotions, discs, suppositories, liquid spraysfor nasal, ocular or oral administration, aerosolized formulations forinhalation, compositions and formulations for intravesicaladministration and the like.

It should be understood that the formulations and compositions thatwould be useful in the present invention are not limited to theparticular formulations set forth in the examples. The followingexamples are put forth so as to provide those of ordinary skill in theart with a complete disclosure and description of how to make and usethe cells, differentiation methods, engineered tissues, and therapeuticmethods of the invention, and are not intended to limit the scope ofwhat the inventors regard as their invention.

The practice of the present invention employs, unless otherwiseindicated, conventional techniques of molecular biology (includingrecombinant techniques), microbiology, cell biology, biochemistry andimmunology, which are well within the purview of the skilled artisan.Such techniques are explained fully in the literature, such as,“Molecular Cloning: A Laboratory Manual”, fourth edition (Sambrook,2012); “Oligonucleotide Synthesis” (Gait, 1984); “Culture of AnimalCells” (Freshney, 2010); “Methods in Enzymology” “Handbook ofExperimental Immunology” (Weir, 1997); “Gene Transfer Vectors forMammalian Cells” (Miller and Calos, 1987); “Short Protocols in MolecularBiology” (Ausubel, 2002); “Polymerase Chain Reaction: Principles,Applications and Troubleshooting”, (Babar, 2011); “Current Protocols inImmunology” (Coligan, 2002). These techniques are applicable to theproduction of the polynucleotides and polypeptides of the invention,and, as such, may be considered in making and practicing the invention.Particularly useful techniques for particular embodiments will bediscussed in the sections that follow.

EXPERIMENTAL EXAMPLES

The invention is now described with reference to the following Examples.These Examples are provided for the purpose of illustration only, andthe invention is not limited to these Examples, but rather encompassesall variations that are evident as a result of the teachings providedherein.

The materials and methods employed in these experiments are nowdescribed.

Bacterial growth conditions and media: Bacteria were grown in LB brothwith 10 g tryptone, 5 g yeast extract, and 10 g/L NaCl. LB agar included15 g/L agar and LB top agar included 7.5 g/L agar unless otherwisenoted. Overnight culture incubation was performed at 200 RPM shaking at37° C.

Phage library screens: To isolate phage U136B, thirty-three phageisolates collected previously from various sources were screened. Eachisolate was screened using the plaque spot test on host lawns ofwild-type and knockout E. coli from the Keio collection obtained fromthe Yale Coli Genetic Stock Center (FIG. 12 ). Those phages for which adifference in plaquing was observed in the library screen were thenscreened for differences in efficiency of plating (EOP, the number ofplaques formed on a mutant divided by the number of plaques formed onBW25113). The initial EOP for phage U136B on the tolC knockout wasdetermined using a full plate dilution series in top agar that contained3.8 g/L agar and serial dilution spot tests of 2 μL to obtain phagetiters on each bacterium.

Phage TIVP-H6 (Myovirus) was discovered by screening for phages thatinfect Pseudomonas aeruginosa strains which overproduce the virulencefactor pyocyanin, and determining that evolution of phage resistance ledto reduced pyocyanin production in bacterial mutants.

Phages LPS-5 (Podovirus) and LPS-TLTL were discovered by screening forphages that interact with LPS of P. aeruginosa, indicated by classic‘rough-colony-forming’ phenotypes when phage-resistant mutants grow onagar (Luzar and Montie (1985) Infection and Immunity 50:572-576).

Phages SF37B, SF60B, SFNHSI, and SFA1-1 were discovered by screeningphage isolates from various sources on Shigella strains PES77 and/orBW25113.

Phage PG-I1 was discovered by screening phage isolates from varioussources on Staphylococcus aureus bacteria.

Mutant selection procedure: To select for phage-resistant bacteria,wild-type bacteria and phages were mixed, then plated onto LB agar andincubated overnight at 37° C. To ensure the isolation of independentmutations, each replicate was grown from a single isolated colony. Toconfirm the multiplicity of infection (MOI, the ratio of phage particlesto bacterial cells) on the agar plate, bacteria and phage were plated intriplicate and counted cfu/mL and pfu/mL, respectively. From eachmutant-selection plate, a random colony was picked, plus any colonies ofnotable morphology, and streaked onto LB agar plate and incubated at 37°C. overnight. The colonies were re-streaked to obtain double-purifiedisolates and each grown in 10 mL LB at 37° C. with shaking overnight.Freezer stocks of each mutant were archived in 20% glycerol, stored at−80° C.

Assessment of phage resistance: 10 μL of a high titer stock of phage(˜10⁹ pfu/mL) was streaked along ˜10 cm lines on LB agar plates. Phagestreaks were allowed to dry, and 1 μL samples of overnight cultures ofeach bacterium were streaked perpendicularly across the phage lines induplicate. Plates were allowed to dry and incubated overnight at 37° C.Bacterial streaks were scored for signs of phage lysis. Isolates withsigns of lysis were scored as susceptible to phage while isolateswithout lysis were scored as phage resistant.

Bacterial growth curves for phage resistance assays: Cultures of wildtype and other bacteria (e.g., phage-resistant and gene-knockoutstrains) were grown to exponential phase as measured by optical densityat 600 nm wavelength (OD600) of 0.25-0.38. The exponential-phasecultures were diluted 1:5 into wells with LB to a total volume of 200 μLwith phage to reach the target MOI. Cultures were incubated at 37° C.with shaking at 288 RPM for 18 h and OD600 read every 2 minutes using anautomated spectrophotometer (TECAN microplate reader).

Bacterial growth curves for comparison of differing mutants: Bacterialcultures were preconditioned in LB medium overnight from individualcolonies, then transferred to fresh LB in 200 μl total volumes. Cultureswere incubated at 37° C. with shaking and optical density was monitoredat 5-min intervals for 24 h by a TECAN microplate reader.

Single step growth curves: Overnight cultures of bacteria were diluted1:100 into 10 mL pre-warmed LB broth and subjected to shaking at 200 RPMat 37° C. until exponential phase. These cultures were then inoculatedinto pre-warmed LB at an initial concentration of ˜2*10⁷ cfu/mL to beginthe assay. Phage were added to an initial concentration of 2*10⁸ pfu/mL,for an initial MOI of 10. The assay flasks were incubated with shakingat 200 RPM at 37° C. Every 10 min, 50-μL samples were removed from eachflask, transferred to a Spin-X column (CLS8160 Sigma), and spun at14,000 rpm for 1 min. At 2 min and 12 min, bacterial samples wereobtained from flasks with and without phage, and were diluted and platedin duplicate as above, in order to preliminarily assess infection rates.Within a week, each filtered phage sample was diluted in a 1:10 dilutionseries in sterile LB and 100 μL diluted samples were plated in soft agaroverlay with 4 mL 7.5 g/L LB soft agar and 100 μL overnight bacteria(e.g., FIG. 12 ). Plates were incubated at 37° C. and plaques werecounted the following day. For each time step, the dilution step withthe greatest number of countable plaques was counted and used foranalysis.

Transmission electron microscopy: Images of high-titer phage lysateswere collected at the Yale Electron Microscopy facility in the Centerfor Cellular and Molecular Imaging. Samples were negatively stained with2% uranyl acetate and imaged with FEG 200 kV transmission EM.

Broth microdilution method for antibiotic MICs: To examine colistin MIC,an original colistin solution (Alfa Aesar) with a concentration of 50mg/mL was diluted to the following test concentrations in LB medium:12.5, 25, 50, 100, 150, 200, 250, 300, 350, and 400 ng/mL. Bacterialcultures were grown from single colonies overnight in 10 mL of LBincubated at 37° C. with shaking. Each culture was diluted to ˜2*10⁵cfu/mL in LB. MICs for colistin were measured by dispensing 100 μL of agiven colistin concentration into each column and 100 μl of dilutedbacteria into each row of a 96 well plate and incubating at 37° C. withshaking for 18 hr. Bacterial growth was scored visually as a binaryvariable (no growth vs. any visible growth). The lowest colistinconcentration at which the well was completely clear was the valuerecorded as the MIC. For cases where replicates gave different answers,we report the mode.

Statistical analysis: All analyses were performed in R Studio (RDevelopment Core Team (2010) R: A language and environment forstatistical computing. (R Foundation for Statistical Computing, Vienna,Austria) using custom scripts.

Genome sequence analysis: Genome sequences were collected at theUniversity of Pittsburgh Microbial Genome Sequencing (MiGS) center.Genomic DNA libraries were prepared using a modified Illumina Nexteralibrary preparation (Baym M, et al. (2015) PLoS One 10(5):e0128036).Paired-end reads of 151 bp length were collected to a final coverage of˜100-fold across the reference genome. Sequences were analyzed usingbreseq with default sequence end-trimming mode (Baym M, et al. (2015)PLoS One 10(5):e0128036; Deatherage D E & Barrick J E (2014) Methods MolBiol 1151:165-188).

Complementation assays for gene knockouts: Electrocompetent bacterialcells were made by inoculating 10 mL LB broth with 100 μL of overnightbacterial cultures grown in LB broth. These cells were then incubatedand shaken at 37° C. for 2-3 hours until they reached an OD600 ofapproximately 0.6. Next, the cells were centrifuged at 4,000 rpm for 10min. The supernatant was poured off, then 10 mL of chilled 10% glycerolwas added to the pellet. After resuspending the pellet by vortexing, thecells were centrifuged for 5 min at 4,000 rpm, then the supernatant waspoured off. This glycerol wash cycle was performed 4 times. Finally, thecells were resuspended in 150 μL of 10% glycerol and were frozen at −80°C. or immediately electroporated. Plasmid DNA from ASKA clones (KitagawaM, et al. (2005) DNA Res 12(5):291-299) (FIG. 12 ) was purified usingthe protocol found in the QIA Miniprep Handbook from Qiagen. Theelectrocompetent cells were then either transformed with an emptyplasmid or complemented with a plasmid containing the gene which hadbeen knocked out. These transformations were performed by thawingelectrocompetent cells and plasmid DNA and adding 1-3 μL of DNA (<100 ngof DNA) to the electrocompetent cells. After being chilled, the mixturewas pipetted into a chilled cuvette and electroporated. Immediatelyafter electroporation, 500 μL of LB broth were added to recover thecells. The cells were then incubated for 1 hr at 37° C. with shaking.100 μL of the electroporated cells were then plated on LB platescontaining approximately 20 μL of 30 pg/mL chloramphenicol. These plateswere then incubated overnight at 37° C. before isolation of transformedcolonies.

Bacteriophage enumeration and efficiency of plating for complementationassays: Soft agar overlay tubes were prepared by mixing 4 mL 7.5 g/Lsoft agar, 4 μL of 30 p,g/mL chloramphenicol (for transformed strainsonly), 20 μL of 100 mM IPTG, and 100 μL of a bacterial overnight culture(grown in LB broth). These soft agar overlays were poured over LB plateswith added chloramphenicol. For non-transformed strains, nochloramphenicol was added. A 1:10 dilution series was performed for 4phage stocks from 10⁻¹ through 10⁻⁷, and 2 μL of each dilution from eachphage stock was spotted onto every bacterial overlay. After these spotswere completely dry, the plates were incubated overnight at 37° C.Finally, pfu/mL was calculated for each plate, and the EOP wascalculated by dividing the pfu/mL of a test strain by that of the wildtype.

Assessment of tetracycline resistance: Overnight cultures were dilutedin 1:10 dilution series in sterile LB, and 2 μL spots of each dilutionwere immediately plated on LB agar plates containing varyingconcentrations of antibiotic: 0, 0.12, 0.25, 0.5, 1.0, 2.0, and 4.0pg/mL tetracycline. Plates were allowed to dry and incubated for twodays at 37° C. The MIC of tetracycline was recorded for each isolate asthe concentration at which colonies no longer formed at the 10⁻⁵ spotteddilution. For cases where replicates gave different answers, the modewas reported.

Preparation of phage stocks for the evolution experiment: 20 μL ofcryogenically frozen U136B phage stock was diluted in sterile LB brothin a 1:10 dilution series. 100 μL of each dilution was plated with 100μL of an overnight culture of DH5a in 4 mL 7.5 g/L LB soft agar overlayon standard LB agar and incubated overnight at 37° C. Ten isolatedplaques were randomly chosen from the 10⁻⁷ dilution plate, suspended in750 μL sterile LB, and filtered through a 0.22 p,m Spin-X column(CLS8160 Sigma) at 14,000 rpm for 1 min. The ten phage stocks wereenumerated by top agar overlay plating and subsequently diluted insterile LB to a target concentration of 1.0*10⁷ pfu/mL. 200 μL samplesof each replicate phage stock were combined in duplicate with 200 μLsterile 40% glycerol solution and frozen at −80° C.

Preparation of bacterial cultures for the evolution experiment:Cryogenically-frozen E. coli strain BW25113 was streaked onto LB agarand incubated overnight at 37° C. Twenty separate isolated colonies wererandomly chosen and suspended in 10 mL sterile LB in separate flasks.Cultures were incubated overnight at 37° C., with 200 rpm shaking.Samples of these founding cultures were archived by combining 900 μL ofeach replicate bacterial culture with 900 μL sterile 40% glycerolsolution in duplicate, and frozen at −80° C. The experimentalpopulations were established by adding 9.8 mL sterile LB to 50 mL glassErlenmeyer flasks and then inoculating with 100 μL of one of the BW25113bacterial cultures described above (each flask receiving a distinctstarting culture) to an estimated concentration of 2*10⁷ cfu/mL(assuming final E. coli overnight densities in LB are 2*10⁹ cfu/mL). Forthe +phage populations, 100 μL of one of the diluted U136B phage stocksprepared above was then added to 10 of the flasks (each flask receivinga distinct starting culture) to a concentration of 1*10⁵ pfu/mL. For the10 control populations, 100 μL sterile LB broth were added in place ofphage. Flasks were incubated overnight at 37° C., with 200 rpm shaking.

Serial passaging in the evolution experiment: Each day (24 h±2 h), theappearance of each flask was recorded and 100 μL from each experimentalflask were transferred into 9.9 mL sterile LB broth in fresh flasks. Toreduce risk of contamination, the transfer micropipette was wiped downwith 70% ethanol on a between each transfer, and flasks with phage andwithout phage were alternated to enable detection of crosscontamination. To archive the evolved samples each day, 900 μL samplesof each replicate experimental volume were combined in duplicate with900 μL sterile 40% glycerol solution and frozen at −80° C.

Daily enumeration of bacteria during evolution experiment: Each day,1:10 serial dilutions of each experimental volume were prepared insterile 0.85% NaCl up to 10⁻⁸, and 2 μL spots of each dilution wereplated on both standard LB agar plates and LB agar plates prepared withtetracycline. Plates were allowed to dry and then incubated overnight at37° C. The following day, the most dilute spot with colonies present wasidentified and colonies were counted in order to determine the totalbacterial population density and the Tet^(R) bacterial populationdensity for each replicate flask.

Daily enumeration of phage during evolution experiment: The dilutionseries prepared above was also used to enumerate phage daily. For the 10flasks with phage, 2 μL spots of each dilution were plated with 100 μLof an overnight culture of DH5a in 4 mL 7.5 g/L LB soft agar overlay onstandard LB round plates (when square plates were used, 125 μL DH5a wasused in 5 mL soft agar) and incubated overnight at 37° C. For the flaskswithout phage, only the least dilute concentration was plated as a checkfor phage contamination. The following day, the most dilute spot withplaques present was identified and plaques were counted in order todetermine the phage titer.

Isolation of bacteria from evolution experiment: Two individual isolateswere obtained from each population at day 5 and day 10. Isolatedcolonies were selected in the most dilute spots that contained colonieson the bacterial enumeration plates described above. One colony waspicked from the total bacterial population (on the standard LB plates)while one colony was picked from the LB plates containing 0.5 p,g/mLtetracycline. The colonies were streaked onto sterile LB plates andincubated overnight at 37° C. For each isolate, the colony most distantfrom its neighbors was streaked onto a new sterile LB plate andincubated overnight at 37° C. For each re-streaked isolate, the colonymost distant from its neighbors was suspended in sterile LB broth andincubated overnight at 37° C., with 200 rpm shaking. To archive theisolated bacteria, 900 μL samples of each bacterial culture werecombined in duplicate with 900 μL sterile 40% glycerol solution andfrozen at −80° C.

Kirby Bauer colistin disk diffusion assay: Mueller Hinton plates wereprepared by pipetting 25 mL of Mueller Hinton agar into each plate, thenallowed to dry for two days. Plates were then used either immediately orrefrigerated until use. Overnight bacterial cultures of each strain wereprepared by incubating a single bacterial colony in 10 mL LB broth at37° C. for 18-20 hours. After incubation, 1:10 dilutions of eachbacterial strain were prepared by combining 900 μL 0.85% NaCl solutionwith 100 μL bacterial inoculation. To prepare the disk diffusion plates,100 μL of each bacterial dilution were pipetted onto a Mueller Hintonplate then spread evenly across the plate with a sterile plastic Lspreader. Plates were then allowed to dry and cardboard colistin disks(ThermoFisher, #CT0017B) containing 10 μg colistin were placed in thecenter of the plates using sterile forceps. Plates were incubated for20-24 hours at 37° C. Finally, to measure the diameters of the zones ofinhibition (ZOI), three straight lines, each at a different angle, weredrawn through the center of the ZOI using a ruler. The diameter of theZOI was measured along the drawn lines.

INSeq transposon mutant library preparation. The insertion-sequence(1NSeq) transposon mutant library was made via conjugation. A donorbacterial strain containing a plasmid was conjugated with a wild typerecipient strain on agar plates, at a ratio of 1:1 donor to recipient.After 3 hours incubation at 37° C., conjugation mixtures were plated forsingle colonies on plates with antibiotic to isolate transconjugantsthat were resistant to both markers (i.e., marker on plasmid and onrecipient chromosome). Following 24 hours incubation at 37° C., colonieswere scraped into LB medium using a sterile spatula and stored in 20%glycerol at −80° C.

INSeq screen. Aliquots of the library were thawed on ice, washed once inLB and resuspended to a concentration of approximately 10⁷ CFU/mL in LBand incubated at 37° C. for 1 hour, with shaking. A sample of test phagewas added, in triplicate, to a final concentration of approximately 10⁵PFU/mL, for MOI≈0.01. Following overnight incubation, cultures wereharvested and genomic DNA was extracted and prepared for sequencing. DNAlibraries were pooled and sequenced at the Yale Center for GenomeAnalysis via the Illumina HiSeq2500 system. Sequences were analyzedusing scripts modified from Goodman et al (Cell Host Microbe 6, 279-289(2009)). Briefly, using Python scripts adapted from analysis packagespreviously described (Goodman et al. (2011) Nat Protoc 6, 1969-1980),sequencing reads were indexed by barcode, and transposon sequence wastrimmed leaving 16 bp of adjacent genomic DNA. These 16 bp sequenceswere aligned to a reference genome using Bowtie2, by counting the numberof reads for each insertion site, normalizing to counts per millionreads and binning by gene (Langmead and Salzberg (2012) Nat Methods 9,357-359). Transposon insertions mapping to the distal 5% ends of anycoding region as well as transposon insertions mapping to intergenicregions were filtered out during analysis. A Z-test was performed usingthe log ratio of normalized output count to normalized input count, andQ-values from false discovery rate (FDR) correction of <0.05 wereconsidered significant for further analysis.

Efficiency of plating, and adsorption assays. Efficiency of plating(EOP) was measured as the ratio of the test phage titer on theexperimental strain to its titer on the WT strain. Phage binding tocells (adsorption) was measured over a 20 minute adsorption assay(Kropinski. Bacteriophages. (Humana Press, 2009), pp. 151-155), whichestimates the rate of ‘disappearance’ of phage particles (i.e.,reduction in titer) in liquid LB medium over time when viruses arechallenged to attach to bacterial cells.

The results of the experiments are now described.

Example 1

Bacteria frequently encounter selection by both antibiotics and lyticbacteriophages. However, the evolutionary interactions betweenantibiotics and phages remain unclear, in particular whether and whenphages can drive evolutionary trade-offs with antibiotic resistance.Herein, Escherichia coli phage U136B is described. Its reliance on twohost factors involved in different antibiotic resistance mechanisms: 1)the efflux pump protein TolC, and 2) the structural barrier moleculelipopolysaccharide (LPS), was demonstrated. Since TolC and LPScontribute to antibiotic resistance, phage U136B should select for theirloss or modification, thereby driving a trade-off between phageresistance and either of the antibiotic resistance mechanisms. To testthis hypothesis, fluctuation experiments and experimental evolution wereused to obtain phage resistant mutants. Using these mutants, theaccessibility of specific mutations (revealed in the fluctuationexperiments) were compared to their actual success during ecologicalcompetition and coevolution (revealed in the evolution experiments).Both tolC and LPS-related mutants arose readily during fluctuationassays, with tolC mutations becoming more common during the evolutionexperiments. In support of the trade-off hypothesis, phage resistancevia tolC mutations occurred with a corresponding reduction in antibioticresistance in many cases. However, contrary to the hypothesis, somephage resistance mutations pleiotropically conferred increasedantibiotic resistance. The molecular mechanisms underlying thissurprising pleiotropic result, consideration for practical aspects ofphage application, and the importance of ecology in evolution of phageresistance are discussed herein. It is envisioned that phages are usefulfor the reversal of antibiotic resistance, but that such applicationswill need to account for both unexpected pleiotropy and evolutionarycontext.

Example 2: Phage U136B Relies on the Antibiotic Resistance Protein TolC

To identify phages that use the antibiotic efflux pump protein TolC forinfection, a collection of E. coli phages were screened for theinability to form plaques on a tolC knockout. This screen identifiedphage U136B, a curly-tailed phage with siphophage morphology (FIG. 8 )that had been originally isolated from a pig farm in Connecticut (FIG.12 ) and has no plaquing ability on a tolC knockout (FIG. 1A). Knockingout outer membrane proteins used by other phages had no impact on phageU136B infection, indicating tolC is unique in this respect. Expressionof tolC from a plasmid vector fully restored phage U136B plaquing on thetolC knockout (FIG. 1 ). Phage U136B also had no effect on the growth oftolC knockout bacteria in liquid culture (FIG. 1C), and correspondinglythe phage did grow on the tolC knockout (FIG. 1D).

Example 3: Phage U136B Relies on Inner Core of the Lipopolysaccharide

In addition to outer membrane protein receptors, many phages alsorequire LPS receptors in their initial contact with the host cell. Toassess whether U136B relies on LPS, a screen was conducted on a panel ofgenes involved in LPS synthesis (the “rfa” genes, named originally forthe rough (′rf) colony phenotype of some strains with altered LPSstructures). All of the rfa gene knockouts available in the Keiocollection were used (Baba T, et al. (2006)Mol Syst Biol 2:2006 0008)(FIG. 12 ). Four of the fourteen rfa genes were required by U136B (FIG.2A). It was confirmed that these genes were required for plaqueformation using genetic complementation tests (FIG. 2B). These fourgenes (rfaC, rfaD, rfaE, and rfaP), were all involved in formation ofthe core region of the LPS polysaccharide component (FIG. 2C). Together,these results show that U136B likely requires the inner core of thelipopolysaccharide. Because knocking out either tolC alone or any of therfa genes alone provides full protection against U136B, both TolC andLPS appear to be necessary for infection, rather than an “either/or”mechanism.

Example 4: Phage Host Range is Limited to a Subset of E. coli Strains

Phage host range depends largely on receptor availability and receptorstructure, so host specificity can be constrained within species.U136B's host range was tested on a panel of divergent E. coli strainsand more distant Gram-negative bacteria relatives (FIG. 12 ). Among thestrains tested for plaquing ability, U136B's host range was limited toE. coli and had strain specificity, with plaquing ability on E. coli K,E. coli B and UPEC, but not on a commensal isolate (FIG. 5 ).

Example 5: Phage U136B Selects for Altered Cell Surface Factor Genes

E. coli phage resistance mutations were examined to determine potentialevolutionary paths bacterial populations may take when evolving in thepresence of phage. To do this, modified fluctuation assays were used,which reveal pre-existing phage resistance mutations that have hadminimal time to compete with one another. Twenty independent cultures ofE. coli BW25113 (K strain, U136B^(S), Tetracycline^(R), Colistin^(R))were plated with phage U136B, yielding a mutant frequency of 4.0×10⁻⁶.One phage-resistant mutant colony was randomly picked from each culture.After streaking for double-isolation, the genomes of each mutant weresequenced. Either tolC mutations or LPS-related mutations were observedin 100% of these mutants (FIG. 6 ), with LPS-related mutations occurringmore frequently (70%, ˜2.8×10⁻⁶) than tolC mutations (30%, ˜1.2×10⁻⁶).

Example 6: Phage Resistant Mutants have Altered Sensitivity toAntibiotics

To determine if the phage resistant mutants had altered resistance toantibiotics, in particular decreased antibiotic resistance viaantagonistic pleiotropy, their minimum inhibitory concentrations (MICs)for tetracycline and colistin were determined and compared to theirwild-type, phage-sensitive parental strains. Tetracycline is anantibiotic that binds to the bacterial ribosome and prevents peptidechain elongation. Resistance to tetracycline can occur by efflux throughthe TolC-AcrAB efflux pump, and it was predicted that phage resistancemutations in tolC would result in decreased resistance to effluxedantibiotics. Colistin is a polypeptide antibiotic in the polymyxin classand used as a drug of last resort. Previously, a large screen of E. coliknockouts suggested that changes to several of the rfa LPS synthesisgenes may result in increased colistin resistance (summarized in FIG. 6); here, it was predicted that phage resistance mutations in rfa geneswould result in decreased resistance to colistin.

Supporting the antagonistic pleiotropy hypothesis, all six tolC mutantshad reduced resistance to tetracycline compared to the parental strainand a similar phenotype to the tolC knockout control (FIG. 3A, FIG. 6 ).Some of the tolC mutants also had reduced colistin resistance (FIG. 3B,FIG. 6 , FIG. 13 ). Meanwhile, the other phage-resistant mutants withLPS-related mutations had decreased resistance to colistin (FIG. 3B,FIG. 6 , FIG. S13 ) compared to the parental strain. Surprisingly, asubset of the LPS mutants had increased resistance to tetracycline (FIG.3A, FIG. 6 ) at the same time as their reduced resistance to colistin.This result indicates that the mutant LPS also has a pleiotropic effecton tetracycline resistance (FIG. 3C, Table 17).

Example 7: Antibiotic Sensitivity Evolves in Populations with PhageSelection

Fluctuation experiments revealed bacterial mutations in tolC andLPS-synthesis genes, so it was tested if these same types of mutationswould be selected in evolving communities of bacteria and phage.Compared to fluctuation experiments where phage-resistant bacteria havenot competed with one another, evolution experiments expose the fitnesscosts of mutations to selection, altering mutation frequencies overtime. The phage resistance mutations may vary in their general fitnesscosts, in their degree of phage resistance, or the potential for phagesto counteract the various resistance mechanisms via coevolution. It wasexpected that the tolC mutations may arise more quickly and outcompetethe LPS-synthesis mutants, as growth curve data demonstrated that tolCmutants are generally more fit than LPS-synthesis mutants (FIG. 14 ).

To test these ideas, a 10-day serial-passaging evolution experiment wasconducted. Twenty populations with E. coli BW25113 were founded: 10populations with phage U136B (“+phage”) and 10 control populationswithout phage (“−phage”), each passaged serially for 10 days. Each day,total bacterial density (FIG. 4A) and tetracycline-resistant bacterialdensity (FIG. 4B) was enumerated in real time by plating populationsamples upon serial transfer. During serial passaging, phage densitieswere monitored on a daily basis. Phage persisted in all populationsthrough Day 5, with half of the phage populations going extinct by Day10 (FIG. 14 ).

Again consistent with antagonistic pleiotropy, the populations evolvedwith phage U136B show a decreased frequency in thetetracycline-resistant phenotype relative to total population size. Thiseffect was present both before phage extinctions occurred on Day 5 (FIG.4B, t(10.1)=−6.0, p<0.0001, t-test of unequal variance) and at the endof the experiment on Day 10 (FIG. 4B, t(11.4)=−3.0, p<0.01, t-test ofunequal variance). The total bacterial population size was unchanged byphage treatment both before phage extinctions (FIG. 1A, t(18.0)=0.82,p=0.789, t-test) on Day 5 and at the end of the experiment (FIG. 1B,t(11.7)=−1.27, p=0.11, t-test of unequal variance) on Day 10.

To investigate the genetic basis of adaptation and patterns ofpleiotropy in the evolved populations, one random bacterial clone fromeach of the control (−phage) and treatment (+phage) populations wasisolated on Day 10. Consistent with the hypothesis that +phagepopulations would face selection against TolC, after 10 days ofevolution, the isolates from the +phage populations showed apredominance of tolC mutations and no LPS-related mutations (FIG. 7 ).However, the unexpected result that 3/10 of these evolved tolC mutantsalso retained the ancestral tetracycline (Tet) resistance phenotype wasalso encountered (FIG. 3D, FIG. 7 : Tet^(R)=R), indicating these phageresistance mutations had no pleiotropy effect for tetracyclineresistance. Those mutations mapped in or near the surface-exposed loopsof TolC (FIG. 15 ), similar to mutations isolated under simultaneousselection by phage TLS and novobiocin. Few mutations in the −phagecontrol populations were observed, with no mutations in either LPS ortolC. Only isolates evolved in the presence of phage U136B wereresistant to the phage (FIG. 7 , U136B^(R)), showing that the phageselection was responsible for the evolution of these alleles, and not apleiotropic effect of selection in this general environment. Theisolates from the control populations also had largely unchanged MICsfor tetracycline and colistin (FIG. 3G, 3H, 3I). To follow-up on thetetracycline-resistant population members, isolates were obtained fromcultures plated on tetracycline-containing agar, revealing that the tolCmutations do not reach fixation in all +phage populations (FIG. 16 ).Most strikingly, after 10 days of evolution none of the random +phagepopulation isolates had increased tetracycline resistance, as wasobserved for some of the fluctuation isolates (FIG. 3A vs 3D, FIG. 17 ).

Example 8: Discussion

The interactions between bacteriophages, antibiotic-resistant bacteria,and antibiotic-sensitive bacteria are complex. One reason detailedknowledge about their ecological and evolutionary interactions islacking is that few phages have been tested for interactions withantibiotic resistance genes. To gain insight into such relationships, acollection of 33 environmental and commercial E. coli phages werescreened for their reliance on the antibiotic efflux pump gene tolC. Thescreen identified phage U136B (FIG. 5 ), which relies on both theantibiotic resistance gene tolC (FIG. 1 ) and the core of the LPS (FIG.2 ). Fluctuation assays were used to find that phage U136B selects forhost mutations in genes encoding its critical host entry factors, tolCand LPS (FIG. 6 ). These phage-resistant mutations had pleiotropicchanges to their sensitivity to tetracycline (mediated by tolC changes),colistin (mediated by LPS-related changes), or both (FIG. 6 , FIGS.3A-3B), including both predicted cases of antagonistic pleiotropy aswell as surprising cases of synergistic pleiotropy. Phage resistancemutants and their associated antibiotic sensitivity phenotypes alsoevolved in communities of E. coli and phage U136B (FIG. 7 , FIGS.3D-3E).

The role of competition and community in pleiotropic evolution:Comparing the mutations and phenotypes that arise during fluctuationexperiments to those from evolution experiments provides an opportunityto compare the accessibility of specific mutations (in this case, tolCand LPS-related mutations) to their actual success during ecologicalcompetition and coevolution. Fluctuation experiments revealed that bothtetracycline-sensitive (tolC) and colistin-sensitive (LPS-related)mutants arise readily, with LPS-related mutants dominating numerically(FIGS. 3A, 3B, & 6), likely because this complex, multi-locus trait hasmore mutational targets than the single tolC gene. In contrast, after 10days of evolution in a community with phage U136B, LPS-related mutantswere relatively rare, appearing in none of the random isolates from the10+phage populations. This effect was mediated by fitness differencesbetween tolC and LPS-related mutations (FIG. 11 ). Overall, theseresults revealed that competition can result in different outcomes thanmight be expected from a survey of accessible mutations.

The outcomes of competition over evolutionary time will also beinfluenced by how long phage persist in the treatment environment. Whileall 10 of the +phage populations started under identical conditions andcontained tolC mutants, these populations otherwise widely varied interms of phage persistence (FIG. 14 ), the frequency of tetracyclineresistance (FIG. 4B), and the specific mutations observed (FIG. 7 ).Strikingly, the final densities of tetracycline resistance varied bynearly four orders of magnitude across the populations. Together, theseresults suggest that development of predictable therapeutic phagepopulation dynamics may be complicated, especially since laboratoryconditions will be much less variable than those within and amongpatients, which would further amplify differences in phage persistence.Furthermore, the dynamics of tetracycline resistance in the +phagepopulations also varied both before and after phage extinctions,suggesting that the among-population differences were driven in part bythe dynamics of competition among the host mutations within thepopulations (FIG. 10 ).

Obtaining a better understanding of community evolution and ecologicalvariability is important in predicting dynamics of therapeutic phages inpatients, especially since these complex environments contain othercommunity members that can impact evolutionary outcomes. Suchinterdisciplinary work may include incorporating evolutionary factorsand environmental heterogeneity into computational models of phageinfection, tracking phage population sizes in infection models andclinical trials, and including both pharmacokinetic/pharmacodynamic(PK/PD) and phage dosing (rather than relying on a single initialinoculum). Together, these approaches may help to better control phageinfection and limit persistence to therapeutic windows.

The effects of specific phage-resistance mutations on pleiotropictraits: The specific tolC mutations observed varied in their effects onthe gene as well as on the resulting tetracycline phenotype. Two typesof tolC phage-resistance mutations were observed: one type that lost theefflux function of TolC, and another type that retained the effluxfunction (FIG. 7 , FIG. 16 ). All of the evolved tolC alleles thatretained efflux function contained either nonsynonymous substitutions orsmall in-frame indels. These mutants were observed only after a periodof evolution, suggesting that TolC function may be under weak selectioneven in the absence of antibiotic, for example through TolC's role indealing with oxidative stress. However even tolC alleles that lostefflux function retained rapid growth rates and high cell densities(FIG. 10 ), so the importance of non-efflux TolC functions appears to beweak.

Data presented herein reveal that phage resistant mutants withLPS-synthesis gene mutations have decreased resistance to the antibioticcolistin. These data are consistent with the results of ahigh-throughput screen that identified some rfa genes involved incolistin resistance (FIG. 9 ). Colistin's mechanism of action isdisruption of the bacterial outer membrane via interactions with LPS. Itis possible that phage-selected mutations in rfa genes change the LPSstructure in such a way that makes it more susceptible to colistindisruption, resulting in the evolutionary trade-off between phageresistance and colistin resistance. Although LPS-related mutations weregenerally less abundant than tolC mutations after experimental evolutionwith phage U136B, the LPS mutants did not necessarily go extinct (FIG.16 ), indicating their potential importance in phage treatments ofinfections.

LPS-related changes may also have unintended, negative consequences inpathogenic bacterial populations. The mutation screen uncoveredphage-resistant mutants that had increased resistance to tetracyclinethrough changes to LPS (FIG. 6 ), likely due to a combination ofdecreased permeability of the outer membrane and reduced expression ofOmpF, tetracycline's uptake porin. However, not all LPS-related mutantsfrom the initial screen had increased tetracycline resistance relativeto the wild type, suggesting the potential to nudge LPS evolution in adirection amenable to reducing antibiotic resistance. The fitness costof LPS-related mutations is also more severe than that for the tolCmutations (FIG. 10 ), indicating that a general trade-off betweenLPS-related phage resistance and bacterial growth may further constraintheir evolution.

The evolution of pleiotropic traits beyond antibiotic resistance: LPS isa crucial determinant of host range and medically relevant phenotypeslike antigenicity and virulence. Many phages currently being developedfor therapeutic use are reliant on LPS, so understanding theevolutionary implications of phage-LPS interactions is important inpredicting if and when LPS phage selection may change bacterialvirulence and resistance phenotypes. In particular, these interactionsare important to predicting how phages will interact with their hosts,including potential collateral damage to commensal bacteria and theevolution of host-range expansion during treatment. Additionally, ifLPS-related phage resistance also results in reduced LPS-associatedvirulence, then this resistance mechanism might be a useful means forreducing bacterial load while also evolutionarily reducing infectionseverity.

Overall, these results highlight the importance of consideringcommunity-level effects, such as competition, when measuring pleiotropiceffects of phage resistance. Phage U136B and others like it are usefulfor the direct treatment of pathogenic infections.

Example 9

Bacteriophages OMKO1, TIVP-H6, SFA1-1, SF60B, and SF37B were tested todetermine if the phage could grow on the target bacterial species andthat the phage could not grow on the target species when at least one ofmultiple putative molecules to which the bacteriophage is intended tobind was knocked out. In each case, the bacteriophage formed plaques onthe target bacterium but did not form plaques when the molecule to whichit was intended to bind was knocked out (FIGS. 18, 19A-19D, 21, and22A). Binding of phage TIVP-H6 to P. aeruginosa genes involved in TypeIV pilus biogenesis was additionally confirmed by a modified InSeq(insertion sequence) approach, using the methods for InSeq librarypreparation and InSeq screen described above (FIG. 22B).

Bacteriophages LPS-5 and LPS-TLTL in Table 1 were not tested for bindingto putative LPS receptors. Rather, it was observed that spontaneousmutants of the target Gram-negative bacteria (Pseudomonas aeruginosa)with evolved resistance to each of these phages showed classic “rough”colony phenotypes, associated with loss of the O-polysaccharide, themost external LPS moiety (Hancock et al. (1983) Infect. Immun.42:170-177). Consistency of these observed rough-colony phenotypes ledto the conclusion that phages LPS-5 and LPS-TLTL putatively bind to LPSof P. aeruginosa.

The binding target of phage PG-I1 in Table 1 is putatively determined tobe peptidoglycan, because of the genetic relatedness of the phagesequence to other phages in the Kayvirus genus that infect S. aureus byusing wall techoic acid or other portions of peptidoglycan as thebinding receptor.

The binding receptor(s) for bacteriophages SFNHSI and TIVP-27 in Table 1have not been putatitvely determined at this time using laboratoryexperiments.

Evolution of resistance in Shigella bacteria to phages SFA1-1, SF37B andSF60B can occur through mutations that alter or delete OmpA and/or OmpC.Shigella bacteria are facultative intracellular pathogens of humans,which replicate in epithelial cells of the colon to cause dysenterydisease. Mutational changes in ompA and ompC genes of these bacteria areknown to be associated with reduced virulence or loss of virulence inShigella species, because these proteins abolish intercellular spread ofthe bacteria. Therefore, selection exerted by phages SFA1-1, SF37B andSF60B can cause Shigella bacteria to evolve a trade-off: evolution ofphage resistance causes reduced virulence or avirulence in targetbacteria.

Deletion of type-IV pili is shown to attenuate virulence in P.aeruginosa, by impairing pyocyanin production, twitching motility, andbiofilm formation (Persat et al. (2015) Proc. Natl. Acad. Sci.112:7563-7568). Phage TIVP-H6 selects for phage resistance in P.aeruginosa via bacterial alteration or loss of type-IV pili. Data showedthat phage TIVP-H6 caused statistically significantly (P<0.001) reducedpyocyanin production in 48-hour cultures of PA14, similar to controlsusing sub-inhibitory concentration of erythromycin (Kanoh and Rubin(2010) Clinical Microbiology Reviews 23:590-615) (FIG. 23 ). Also, thephage did not interfere with effects of erythromycin, and the beneficialphage effects persisted in presence of ciprofloxacin, one of theantibiotics that either increased or did not affect pyocyanin production(FIG. 23 ).

Deletion of O antigen can reduce ability for CF-associated P. aeruginosastrains to produce extracellular elastase (Leone et al. (2008) EuropeanJournal of Clinical Microbiology and Infectious Disease 27:1093-1099),and can cause re-sensitivity to hydrophobic antibiotics and impair ironuptake by bacteria (Delcour (2009) Biochimica and Biophysica Acta1794:808-816). This strongly suggests a mechanism for phage LPS-5 toselect for phage resistance in P. aeruginosa via LPS mutations thatdecrease elastase production and drive antibiotic re-sensitivity. Thesedata used classic Congo-elastase assays (Sachar et al. 1955) Proceedingsof the Society for Experimental Biology and Medicine 90:323-326) toconfirm that elastase was below the limit of detection in 48-hour-oldcultures of phage resistant mutants of PA01 (FIG. 24 ).

OTHER EMBODIMENTS

The recitation of a listing of elements in any definition of a variableherein includes definitions of that variable as any single element orcombination (or subcombination) of listed elements. The recitation of anembodiment herein includes that embodiment as any single embodiment orin combination with any other embodiments or portions thereof.

The disclosures of each and every patent, patent application, andpublication cited herein are hereby incorporated herein by reference intheir entirety. While this invention has been disclosed with referenceto specific embodiments, it is apparent that other embodiments andvariations of this invention may be devised by others skilled in the artwithout departing from the true spirit and scope of the invention. Theappended claims are intended to be construed to include all suchembodiments and equivalent variations.

What is claimed is:
 1. A method of increasing antibiotic sensitivityand/or decreasing virulence in a pathogenic bacteria, the methodcomprising: contacting the bacteria with a lytic bacteriophage selectedfrom the group consisting of OMKO1, LPS-5, TIVP-H6, LPS-TLTL,TIVP-27,SFA1-1, SF60B, SFNHSI, SF37B, PG-I1, and U136B.
 2. The method of claim1, wherein the bacteria are contacted with bacteriophage at amultiplicity of infection of bacteriophage to bacteria in the range ofabout 0.05 to about
 50. 3. The method of claim 1, wherein thebacteriophage binds at least one molecule selected from the groupconsisting of an O-antigen, efflux pump, Type IV pilus, LPS (core),OmpA, OmpC, TolC, and peptidoglycan in the bacteria.
 4. The method ofclaim 1, wherein the bacteriophage binds TolC and LPS.
 5. The method ofclaim 1, wherein the bacteriophage binds a protein of a Mex efflux pump.6. The method of claim 5, wherein the Mex efflux pump is a surfaceexposed protein.
 7. The method of claim 5, wherein the Mex protein isselected from the group consisting of OprM, MexA, MexB, MexX, and MexY.8. The method of claim 1 further comprising contacting the pathogenicbacteria with an antibiotic.
 9. The method of claim 1, wherein thepathogenic bacteria is drug resistant.
 10. The method of claim 1,wherein the pathogenic bacteria is a multi-drug resistant (MDR)bacteria.
 11. The method of claim 1, wherein the bacteriophage comprisesa nucleotide sequence at least 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%,or 100% identical to any one of SEQ ID NOs: 1-13.
 12. The method ofclaim 1, wherein the bacteriophage is administered to a subject in needthereof.
 13. A pharmaceutical composition comprising one or more lyticbacteriophages selected from the group consisting of OMKO1, LPS-5,TIVP-H6, LPS-TLTL, TIVP-27, SFA1-1, SF60B, SFNHSI, SF37B, PG-I1, andU136B.
 14. The pharmaceutical composition of claim 13, wherein thebacteriophage binds at least one molecule selected from the groupconsisting of an O-antigen, Type IV pilus, LPS (core), OmpA, OmpC, TolC,and peptidoglycan on multi-drug resistant (MDR) bacteria.
 15. Thepharmaceutical composition of claim 13, wherein the one or morebacteriophages comprise a nucleotide sequence at least 80%, 85%, 90%,95%, 96%, 97% 98%, 99%, or 100% identical to any one of SEQ ID NOs:1-13.
 16. The pharmaceutical composition of claim 13, further comprisingan antibiotic.
 17. A method of treating a bacterial infection in asubject in need thereof, the method comprising administering thepharmaceutical composition of claim 13 to the subject with the bacterialinfection.
 18. The method of claim 17, wherein the pharmaceuticalcomposition is administered directly to a site of the bacterialinfection.
 19. The method of claim 17, further comprising administeringan antibiotic to the subject.
 20. The method of claim 19, wherein theantibiotic is administered before or after or co-administered with thepharmaceutical composition.
 21. The method of claim 17, wherein thebacterial infection is drug resistant.
 22. The method of claim 17,wherein the bacterial infection is multi-drug resistant.
 23. The methodof claim 1, wherein the pathogenic bacteria is associated with abiofilm.
 24. The method of claim 1, wherein the pathogenic bacteria isPseudomonas aeruginosa, a Shigella species, Staphylococcus aureus, orEscherichia coli.
 25. The method of claim 24, wherein the pathogenicbacteria is in a biofilm.
 26. A method of disrupting a pathogenicbacteria associated with a biofilm, the method comprising contacting thebacteria with a lytic bacteriophage selected from the group consistingof OMKO1, LPS-5, TIVP-H6, LPS-TLTL, TIVP-27, SFA1-1, SF60B, SFNHSI,SF37B, PG-I1, and U136B.
 27. A method of preventing formation of abiofilm on a surface, the method comprising contacting the surface witha lytic bacteriophage selected from the group consisting of OMKO1,LPS-5, TIVP-H6, LPS-TLTL, TIVP-27, SFA1-1, SF60B, SFNHSI, SF37B, PG-I1,and U136B.
 28. The method of claim 26, wherein the bacteriophage binds amolecule selected from the group consisting of an O-antigen, effluxpump, Type IV pilus, LPS (core), OmpA, OmpC, and TolC in the bacteriaand the bacteria either genetically resists bacteriophage infection orbecomes infected and lysed by the bacteriophage, and wherein geneticallyresistant bacteria have impaired efflux pumps and increased sensitivityto one or more antibiotics.
 29. The method of claim 26, furthercomprising contacting the bacteria or surface with the one or moreantibiotics.
 30. A composition comprising an LPS-5 bacteriophagetargeting Pseudomonas aeruginosa, the bacteriophage having a genomecomprising a nucleic acid sequence comprising SEQ ID NO:
 1. 31. Acomposition comprising an OMKO1 bacteriophage targeting Pseudomonasaeruginosa, the bacteriophage having a genome comprising a nucleic acidsequence comprising SEQ ID NO:
 2. 32. A composition comprising a TIVP-H6bacteriophage targeting Pseudomonas aeruginosa, the bacteriophage havinga genome comprising a nucleic acid sequence comprising SEQ ID NO:
 3. 33.A composition comprising an LPS-TLTL bacteriophage targeting Pseudomonasaeruginosa, the bacteriophage having a genome comprising a nucleic acidsequence comprising SEQ ID NO:
 4. 34. A composition comprising anTIVP-27 bacteriophage targeting Pseudomonas aeruginosa, thebacteriophage having a genome comprising a nucleic acid sequencecomprising SEQ ID NO:
 5. 35. A composition comprising an SFA1-1bacteriophage targeting a Shigella spp. bacteria, the bacteriophagehaving a genome comprising a nucleic acid sequence comprising SEQ ID NO:6.
 36. A composition comprising an SF60B bacteriophage targeting aShigella spp. bacteria, the bacteriophage having a genome comprising anucleic acid sequence comprising SEQ ID NO:
 7. 37. A compositioncomprising an SFNHSI bacteriophage targeting a Shigella spp. bacteria,the bacteriophage having a genome comprising a nucleic acid sequencecomprising SEQ ID NO:
 8. 38. A composition comprising an SF37Bbacteriophage targeting a Shigella spp. bacteria, the bacteriophagehaving a genome comprising a nucleic acid sequence comprising SEQ ID NO:9.
 39. A composition comprising a PG-I1 bacteriophage targetingStaphylococcus aureus, the bacteriophage having a genome comprising atleast one nucleic acid sequence selected from the group consisting ofSEQ ID NOs: 10-12.
 40. A composition comprising a U136B bacteriophagetargeting E. coli, the bacteriophage having a genome comprising anucleic acid sequence comprising SEQ ID NO:
 13. 41. A method of treatinga bacterial infection in a subject in need thereof, the methodcomprising administering to the subject a therapeutically effectiveamount of a composition according to claim
 23. 42. The method of claim41, wherein the bacterial infection is drug-resistant or multi-drugresistant.